HBx通過(guò)激活I(lǐng)L-6/STAT3通路誘導(dǎo)干性基因的表達(dá)及其對(duì)肝癌細(xì)胞惡性行為的影響
發(fā)布時(shí)間：2021-11-28 19:34
目的:乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染是肝癌發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素,但其如何導(dǎo)致肝癌發(fā)生尚不清楚,目前認(rèn)為由乙型肝炎病毒X基因編碼的蛋白（HBx）在其中起著關(guān)鍵作用。當(dāng)慢性乙型肝炎患者病情急性加重時(shí),白細(xì)胞介素6（Interleukin-6,IL-6）水平上升,激活下游相關(guān)信號(hào)通路,促進(jìn)肝癌的發(fā)生發(fā)展。其中IL-6/STAT3信號(hào)通路至關(guān)重要,其異常激活能促進(jìn)卵巢癌、肺癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌等惡性腫瘤中某些干性基因的表達(dá),但其是否促進(jìn)肝癌發(fā)展的機(jī)制尚不明確。本研究擬通過(guò)探索HBx對(duì)IL-6/STAT3通路的調(diào)控作用,及其二者與干性基因表達(dá)之間的關(guān)系,證明IL-6是驅(qū)動(dòng)乙型肝炎病毒相關(guān)性肝癌的內(nèi)在細(xì)胞因子,為今后靶向IL-6治療肝癌提供理論依據(jù)。方法:將攜帶HBx基因的慢病毒感染肝癌細(xì)胞HLE,以獲得穩(wěn)定表達(dá)HBx的HLE細(xì)胞（HLE-HBx）。以HLE細(xì)胞作為對(duì)照,分別使用PCR、Western Blot、MTT、Transwell和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HLE-HBx中HBx和IL-6的表達(dá)豐度、IL-6、IL-6R、STAT3和p-STAT3蛋白水平、對(duì)5-氟尿...
【文章來(lái)源】：海南醫(yī)學(xué)院海南省
【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
HLE-HBx細(xì)胞株的建立GAPDH
HBx 對(duì)肝癌細(xì)胞惡性行為的影響1 HBx 促進(jìn)肝癌細(xì)胞的耐藥性為了驗(yàn)證 HBx 對(duì)肝癌細(xì)胞耐藥性的影響，我們選用了一種常用的經(jīng)典 5-氟尿嘧啶（5-FU），將 5-FU 稀釋為不同濃度（0、40、80、160、3 μmol/L），作用 HLE 細(xì)胞 24 h 后，根據(jù) MTT 比色法測(cè)定的 OD 值繪度 5-FU 對(duì)肝癌細(xì)胞 HLE 的生長(zhǎng)的影響的柱狀圖，結(jié)果如圖 3.2 所示的 5-FU 對(duì) HLE 肝癌細(xì)胞的增殖均有一定的抑制作用，在 5-FU 濃度為ol/L 和 640 μmol/L 時(shí)，HLE 細(xì)胞的增值率低于 50%；然后用 320 μmo μmol/L 5-FU 比較 HLE、HLE-GFP、HLE-HBx 三種細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制情如圖 3.3 所示，用這兩種濃度 5-FU 處理細(xì)胞，HLE-HBx 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑顯低于與 HLE、HLE-GFP，這說(shuō)明 HBx 促進(jìn)肝癌細(xì)胞 HLE 耐藥。
圖 3.3 比較 5-FU 作用下 HLE-HBx 生長(zhǎng)抑制率的ol/L 5-FU 作用三種細(xì)胞 24 h 后，在波長(zhǎng) 490 nm 處測(cè)得吸光值細(xì)胞 24 h 后,在波長(zhǎng) 490 nm 處測(cè)得吸光值�？v坐標(biāo)為細(xì)胞生長(zhǎng)%）=（正常組吸光值-加藥細(xì)胞組吸光值)/正常組吸光值×100%，與 HLE 和 HLE-GFP 相比，** P＜0.01。進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移 Transwell 實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)兩種方法來(lái)驗(yàn)證 HB移性的影響，用 HLE、HLE-GFP 和 HLE-HBx 三種細(xì)胞果如圖 3.4A 所示，較 HLE 和 HLE-GFP，過(guò)表達(dá) HB細(xì)胞數(shù)明顯多于對(duì)照組，其遷移能力也高于其他兩組 HLE-HBx 三種細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖 3.4E 細(xì)胞的遷移性明顯高于 HLE 和 HLE-GFP，72 h 的愈
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝癌危險(xiǎn)因素及早期診斷與篩查[J]. 李鵬,丁惠國(guó). 中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志. 2015(03)
[2]HBx蛋白生物學(xué)作用的研究進(jìn)展[J]. 龔倩,何松. 世界華人消化雜志. 2010(34)
本文編號(hào)：3525020
【文章來(lái)源】：海南醫(yī)學(xué)院海南省
【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
HLE-HBx細(xì)胞株的建立GAPDH
HBx 對(duì)肝癌細(xì)胞惡性行為的影響1 HBx 促進(jìn)肝癌細(xì)胞的耐藥性為了驗(yàn)證 HBx 對(duì)肝癌細(xì)胞耐藥性的影響，我們選用了一種常用的經(jīng)典 5-氟尿嘧啶（5-FU），將 5-FU 稀釋為不同濃度（0、40、80、160、3 μmol/L），作用 HLE 細(xì)胞 24 h 后，根據(jù) MTT 比色法測(cè)定的 OD 值繪度 5-FU 對(duì)肝癌細(xì)胞 HLE 的生長(zhǎng)的影響的柱狀圖，結(jié)果如圖 3.2 所示的 5-FU 對(duì) HLE 肝癌細(xì)胞的增殖均有一定的抑制作用，在 5-FU 濃度為ol/L 和 640 μmol/L 時(shí)，HLE 細(xì)胞的增值率低于 50%；然后用 320 μmo μmol/L 5-FU 比較 HLE、HLE-GFP、HLE-HBx 三種細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制情如圖 3.3 所示，用這兩種濃度 5-FU 處理細(xì)胞，HLE-HBx 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑顯低于與 HLE、HLE-GFP，這說(shuō)明 HBx 促進(jìn)肝癌細(xì)胞 HLE 耐藥。
圖 3.3 比較 5-FU 作用下 HLE-HBx 生長(zhǎng)抑制率的ol/L 5-FU 作用三種細(xì)胞 24 h 后，在波長(zhǎng) 490 nm 處測(cè)得吸光值細(xì)胞 24 h 后,在波長(zhǎng) 490 nm 處測(cè)得吸光值�？v坐標(biāo)為細(xì)胞生長(zhǎng)%）=（正常組吸光值-加藥細(xì)胞組吸光值)/正常組吸光值×100%，與 HLE 和 HLE-GFP 相比，** P＜0.01。進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移 Transwell 實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)兩種方法來(lái)驗(yàn)證 HB移性的影響，用 HLE、HLE-GFP 和 HLE-HBx 三種細(xì)胞果如圖 3.4A 所示，較 HLE 和 HLE-GFP，過(guò)表達(dá) HB細(xì)胞數(shù)明顯多于對(duì)照組，其遷移能力也高于其他兩組 HLE-HBx 三種細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖 3.4E 細(xì)胞的遷移性明顯高于 HLE 和 HLE-GFP，72 h 的愈
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝癌危險(xiǎn)因素及早期診斷與篩查[J]. 李鵬,丁惠國(guó). 中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志. 2015(03)
[2]HBx蛋白生物學(xué)作用的研究進(jìn)展[J]. 龔倩,何松. 世界華人消化雜志. 2010(34)
本文編號(hào)：3525020
本文鏈接：http://sikaile.net/kejilunwen/jiyingongcheng/3525020.html
最近更新
教材專著
