石杉堿甲（Huperzine A,HupA）是我國自主研發(fā)治療輕中度阿爾茨海默癥的石松生物堿類藥物,由于其化學合成技術體系不成熟,加之石杉類植物的人工栽培與組織培養(yǎng)困難,目前僅能從日益匱乏的野生千層塔等藥用植物資源中微量提取,嚴重制約了其藥物生產。本研究從千層塔中分離了兩株具有合成石杉堿甲能力的千層塔內生真菌膠胞炭疽Cg01（Colletotrichum gloeosporioides Cg01）與波蘭青霉hy4（Penicillium polonicum hy4）,并對其進行全基因組測序與轉錄組測序,通過比較基因組學與轉錄組學研究,獲得了賴氨酸脫羧酶（lysine decarboxylase,LDC）、銅胺氧化酶（copper amine oxidase,CAO）、聚酮合酶（polyketides synthases,PKS）、組蛋白賴氨酸N-甲基化轉移酶（histone methyltransferase,HMT）、組蛋白乙�；D移酶（histone acetyltransferase,HAT）、組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）等候選基因,通過同... 

【文章來源】：湖南農業(yè)大學湖南省

【文章頁數】：185 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

石杉堿甲的化學結構式Fig.1-1ChemicalstructureofhuperzineA

長等多種問題。因此，生物合成石杉堿甲是解決石杉堿甲原料問題最有效的措施之一，石杉堿甲的生物合成途徑及調控機制是其理論基礎。圖1-2 石杉堿甲等石松生物堿的推測途徑[15]Fig. 1-2 Proposed biosynthetic pathway of huperzine Aand related lycopodium alkaloids[15].Ma Xiaoqiang等人[15]在前人推測出的石松生物堿生物合成途徑的基礎上提出了石杉堿甲的生物合成途徑（圖1-2），卻未鑒定參與石杉堿甲合成的酶類。Ma提出的合成途徑認為石杉堿甲生物合成的前體物質為L-賴氨酸(Lys)，L-賴氨酸經過L-賴氨酸脫羧酶LDC（Lysine decarboxylase，酶A）脫羧形成1, 5-戊二胺(Cadaverine, 尸胺)，1, 5-戊二胺經銅胺氧化酶CAO（Copper amine oxidase，酶B）脫胺后再脫水形成△1-哌啶烯

[23]。圖2-1 石杉堿甲標準品(A)與膠胞炭疽Cg01樣品(B)液相質譜圖Fig. 2-1 LC-MS spectrogram of HuperzineA(A) and culture extracts of C. gloeosporioides Cg01 (B).圖2-2 不同誘導子對內生真菌膠胞炭疽Cg01(A)/波蘭青霉hy4(B)合成石杉堿甲的誘導作用。1: HupA; 2: PDB+莖葉汁；3：Cg01(A)/hy4(B)；4：Cg01(A)/hy4(B)+莖葉汁；5：Cg01(A)/hy4(B)+1%乙醇；6：Cg01(A)/hy4(B)+MeJA；7：Cg01(A)/hy4(B)+SAFig. 2-2 Effects of different elicitors on the huperzineAbiosynthesis of endophytic fungus C.gloeosporioides Cg01 (A)/ P. polonicum hy4 (B).1: Hup A; 2: PDB+extracts; 3: Cg01 (A)/hy4 (B); 4: Cg01 (A)/hy4 (B)+ extracts; 5: Cg01 (A)/hy4(B)+1% ethanol；6: Cg01 (A)/hy4 (B)+MeJA；7: Cg01 (A)/hy4 (B)+SA.

【參考文獻】：
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