肉牛的生長(zhǎng)速度和胴體重是肉牛品種優(yōu)劣的重要標(biāo)準(zhǔn),能夠直接影響肉牛經(jīng)濟(jì)效益,因此,培育生長(zhǎng)速度快,出肉率高的優(yōu)質(zhì)肉牛品種是一項(xiàng)有重要的實(shí)際意義的工作。牛骨骼肌的發(fā)育起始于妊娠早期,骨骼肌的發(fā)育經(jīng)歷了間充質(zhì)干細(xì)胞、肌祖細(xì)胞、成肌細(xì)胞、初級(jí)肌纖維、次級(jí)肌纖維幾個(gè)階段,在多種轉(zhuǎn)錄因子的作用下,逐漸在妊娠后期發(fā)育成型。為了探索肉牛生長(zhǎng)發(fā)育性狀重要候選基因NCAPG在牛骨骼肌發(fā)育中的機(jī)理,通過(guò)研究NCAPG在體外成肌分化模型中的作用來(lái)初步解釋其對(duì)生長(zhǎng)性狀的作用機(jī)制。主要通過(guò)siRNA干擾NCAPG表達(dá)的手段,研究NCAPG對(duì)牛胎兒骨骼肌來(lái)源的成肌細(xì)胞有絲分裂和成肌分化的影響,并探究其作用機(jī)理。得到主要結(jié)果如下:1、用膠原酶消化法從三月齡的牛胎兒骨骼肌組織中分離成肌細(xì)胞,用馬血清培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化,成肌細(xì)胞分化能力較強(qiáng),誘導(dǎo)后大量細(xì)胞融合形成肌管,隨著分化時(shí)間的增加,MYH1、MYH2、MYH3和MYH4的表達(dá)量上調(diào),MYOD和MYF5表達(dá)下調(diào),MYOG表達(dá)量基本穩(wěn)定;2、在成肌細(xì)胞增殖時(shí)期,用siRNA干擾NCAPG表達(dá)后,成肌細(xì)胞有絲分裂的時(shí)間比陰性對(duì)照組延長(zhǎng)了約25%;3、在成肌細(xì)胞分化階段,用s... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

凝縮蛋白的分子結(jié)構(gòu)(Hirano,2012)

士學(xué)位論文 第一章一過(guò)程是非必須的。通過(guò)干擾 Condensin 的亞基表達(dá)來(lái)降低細(xì)胞中凝胞染色質(zhì)壓縮在細(xì)胞分裂前期末才開(kāi)始，但是隨著核膜的崩解，染色都表明 Condensin II 和 Condensin I 對(duì)染色質(zhì)壓縮是有先后順序的，并用不同(Hirota,Gerlich,Koch,Ellenberg,Peters, 2004)。在個(gè)體發(fā)育水平上，-G2 的基因會(huì)導(dǎo)致胚胎致死的發(fā)生(Xu et al., 2006a；Smith et al., 2004)。胞中的 1:1 和非洲爪蛙卵細(xì)胞提取物中的 5:1 到雞 DT40 細(xì)胞中的 10:1胞中的比例有所不同。Condensin I 和 II 的相對(duì)豐度在不同類型的細(xì)胞中可能直接反映了兩類凝縮蛋白對(duì)染色體壓縮的不同功能(Ono et al., II 的比例變�。◤� 5:1 到 1:1），胚胎的細(xì)胞染色體變粗變短，當(dāng)去除 C 1:0 時(shí)，染色體變得更長(zhǎng)，這一結(jié)果有力的證明了 Condensin II 負(fù)責(zé) Condensin I 負(fù)責(zé)染色體的側(cè)向壓縮(Shintomi et al., 2011)，如圖 1.2。

夠?qū)?xì)胞類型特異性的基因表達(dá)起調(diào)節(jié)作用，小鼠 T 細(xì)胞的發(fā)育和靜息狀態(tài)的維持需sin II 使染色質(zhì)壓縮，CAP-H2 的突變會(huì)導(dǎo)致染色質(zhì)結(jié)構(gòu)開(kāi)放從而使 T 細(xì)胞在正常情況下因表達(dá)上調(diào)(Rawlings et al., 2011)。鼠科動(dòng)物的 CAP-G2 能夠在紅細(xì)胞分化成熟的過(guò)程中，在這一過(guò)程中細(xì)胞核逐漸被壓縮(Xu et al., 2006a)。Condensin 對(duì)胚胎干細(xì)胞高度有序壓縮及其存活也是必不可少的(Fazzio et al., 2010)。酵母的 Condensin 對(duì)于間期染色質(zhì)的NA 聚合酶 III 轉(zhuǎn)錄的基因簇的轉(zhuǎn)錄起著重要作用(Iwasaki et al., 2010)。了 Condensin 調(diào)控的壓縮，組蛋白修飾也可以影響線蟲(chóng)有絲分裂過(guò)程中染色質(zhì)壓縮和線償 X 染色體的結(jié)構(gòu)。在有絲分裂過(guò)程的染色體上和有絲分裂間期劑量補(bǔ)償 X 染色體上生組蛋白 H4 第 20 位賴氨酸一甲基化（H4K20me1）的增加和第 16 位賴氨酸乙酰16ac）的減少(Wells et al., 2012；Oda et al., 2009a；Rice et al., 2002a；Vielle et al., 201s et al., 2014)。在細(xì)胞周期中，H4K20 甲基轉(zhuǎn)移酶 PR-Set7 和 H4K20me1 的水平在 G2 期高，并在有絲分裂中保持較高水平，而在 G1 期下降，干擾 PR-Set7 會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期的致有絲分裂和間期染色體的解壓縮(Oda et al., 2009a)。這表明了 H4K20me1 對(duì)于有絲分體壓縮的重要性。H4K16ac 的水平在細(xì)胞的 S 期增加，而在有絲分裂期間水平下降，這 H4K20me1 對(duì) H4K16ac 具有拮抗作用的發(fā)現(xiàn)相一致(Nishioka et al., 2002a)。H4K16ac 去引起H2A和H4臨近分子相互作用的增強(qiáng)，導(dǎo)致染色體更高程度的壓縮(Shogren-Knaak e

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]全基因組關(guān)聯(lián)分析在畜禽重要經(jīng)濟(jì)性狀中的研究進(jìn)展[J]. 喬賢,張磊,李曉凱,范一星,馬宇浩,張燕軍,劉志紅,王瑞軍,王志英,王志新,趙艷紅,何利兵,李金泉,蘇蕊.  家畜生態(tài)學(xué)報(bào). 2017(10)
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博士論文
[1]牛間充質(zhì)干細(xì)胞成肌/成脂分化中差異miRNAs的鑒定及miR-23a調(diào)控機(jī)制研究[D]. 關(guān)龍.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017



本文編號(hào)：3494605