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庫爾勒香梨自交不親和SFBB基因RNAi表達(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化

發(fā)布時間:2021-11-04 05:50
  目的:‘庫爾勒香梨’(Pyrus sinkiangensis Yü),作為新疆的特色果樹,梨屬植物具有自交不親和性,制約新疆梨產(chǎn)業(yè)的發(fā)展進(jìn)程。本研究首先建立了庫爾勒香梨葉片離體誘導(dǎo)再生的穩(wěn)定高效再生體系,再利用基因工程技術(shù),針對庫爾勒香梨自交不親和SFBB基因不同的兩個區(qū)域構(gòu)建干擾載體,為通過分子手段改良梨自交不親和性狀和培育自交親和的梨品種奠定一定基礎(chǔ)。方法:1、以庫爾勒香梨離體培養(yǎng)的繼代30天左右的無菌苗葉片為材料,1/2 MS為基本培養(yǎng)基,用TDZ與IBA或NAA分別組合設(shè)計配方,探討不同生長調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度組合對愈傷組織形成率和不定芽形成率的影響,選取最優(yōu)配方附加不同質(zhì)量濃度的Ag NO3,獲得不定芽再生的最佳培養(yǎng)基。用IBA和NAA分別組合設(shè)計生根生長調(diào)節(jié)劑的配比,根據(jù)生根率、平均生根數(shù)以及平均生根長度篩選最適宜生根的生長調(diào)節(jié)劑的配比,建立生根的培養(yǎng)體系。最終建立庫爾勒香梨葉片誘導(dǎo)再生植株。2、以新疆自交不親和梨品種‘庫爾勒香梨’的花粉為材料,根據(jù)本實驗室已獲得的1344 bp SFBB基因(SFBBx-gamma(Gen Bank登錄號:KU756268))設(shè)計引物,以SFB... 

【文章來源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

庫爾勒香梨自交不親和SFBB基因RNAi表達(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化


庫爾勒香梨愈傷組織生長情況

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A Bmg/L 愈傷組織誘導(dǎo)率均較高,為 97.78 %或 100%,這些配方之間生長效果差異不顯著,但顯著高于其他處理?傮w來說 TDZ 與 含 NAA 的配方愈傷組織比 TDZ 與 含 IBA的配方愈傷組織的數(shù)量多、體積大、顏色更鮮綠。圖 2-1 庫爾勒香梨愈傷組織生長情況(A)10 d 的再生愈傷組織(B)25 d 的再生愈傷組織Fig.2-1 The growth of Korla Fragrant Pear callus.(A)10 days’regeneration of the tissue (B)25 days’regeneration of the tissue2.3.2 1.0 mg/L TDZ 與 IBA 或 NAA 組合對庫爾勒香梨愈傷組織誘導(dǎo)不定芽的影響ABCDE

不定芽,生長狀況,形成率,再生率


不同質(zhì)量濃度的 AgNO3對再生不定芽形成率的影響2-2可以看出,附加AgNO3對不定芽再生的效果不一,含IBA的配方附3葉片再生不定芽率有明顯提高(圖 2-3-A),為 84.92 %,顯著高于未芽率;附加 1.0 mg/L AgNO3時,不定芽形成率顯著低于未添加 AgN不定芽的形成有抑制作用。但對含 NAA 的配方附加 0.5 mg/L 和 1.0 m進(jìn)不定芽的再生,其再生率反而低于未添加 AgNO3的再生率(圖 2-表 2-2 不同濃度 AgNO3和最優(yōu)配方組合對庫爾勒香梨葉片再生不定芽的影Table 2-2 The influence of different concentrations ofAgNO3and the optimformula on the regeneration of the leaf regeneration of the Korla pear處理Treatment濃度 concentration( mg/L ) 不定芽形成率Frequency of adventitiousformation ( SE) / %TDZ IBA NAA AgNO31 1 0.5 0 75.55±1.92 b2 1 0.5 0.5 84.92±1.92 a3 1 0.5 1 65.55±1.92 c4 1 0.6 0 72.22±1.92 b5 1 0.6 0.5 41.11±1.92 e6 1 0.6 1 56.67±3.33 dAB


本文編號:3475128

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