類鈣調(diào)蛋白（Calmodulin-like protein,CML）是植物細(xì)胞中一類非常重要的鈣感受蛋白,且CML蛋白在花粉萌發(fā)和花粉管生長中起到重要作用。該研究以大白菜自交不親和系‘91-125’自花授粉后柱頭為材料,克隆獲得大白菜BrCML49基因cDNA全長序列1 046 bp,包括960 bp開放閱讀框,編碼319個氨基酸,包含2個EF-hand保守結(jié)構(gòu)域。序列分析發(fā)現(xiàn),BrCML49蛋白為穩(wěn)定的親水蛋白,沒有跨膜區(qū)。實時熒光定量（qRT-PCR）表達(dá)分析顯示,BrCML49基因的表達(dá)量在‘91-125’的花藥中最高,其次是全花和花瓣,在其他組織中表達(dá)量較低;BrCML49基因在大白菜自交親和系‘14S23’的全花和柱頭中表達(dá)量較高,在其他組織中表達(dá)量較低。亞細(xì)胞定位分析發(fā)現(xiàn)BrCML49主要定位于煙草葉片的細(xì)胞膜和細(xì)胞核中。該研究結(jié)果可為進(jìn)一步研究大白菜BrCML49基因的功能奠定基礎(chǔ),并為闡明大白菜BrCML49基因參與自交不親和花粉萌發(fā)及花粉管生長的信號機制提供理論依據(jù)。 

【文章來源】：西北植物學(xué)報. 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

BrCML49蛋白的疏水性分析

BrCML49蛋白的磷酸化位點分析

以大白菜‘91-125’自花授粉后柱頭cDNA為模板,用含有雙酶切位點(KpnⅠ和XbaⅠ)的特異引物49F-KpnⅠ/49R-XbaⅠ進(jìn)行PCR擴增,得到960 bp的BrCML49目的基因片段,雙酶切后與pCAMBIA2300-GFP載體進(jìn)行連接,構(gòu)建亞細(xì)胞定位的重組載體。經(jīng)雙酶切驗證表明重組載體構(gòu)建成功(圖9,A),將亞細(xì)胞定位的融合表達(dá)載體命名為35S-BrCML49-GFP(圖9,B)。圖9 大白菜BrCML49蛋白的亞細(xì)胞定位

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]大白菜噴施NaCl克服自交不親和性的研究[J]. 宋尚偉,王蘭菊,張曉偉,毛光志.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2003(05)

博士論文
[1]甘藍(lán)花粉管鈣感受蛋白編碼基因CML49的克隆及功能鑒定研究[D]. 許俊強.西南大學(xué) 2014



本文編號：3475029