縮短甘藍型油菜的生育期具有重要的戰(zhàn)略意義和經(jīng)濟價值,使得早熟油菜育種的研究成為重點,由于油菜的開花期與成熟期關(guān)系密切,所以油菜開花的分子機制也成為了研究的熱點。開花關(guān)鍵基因FT（FLOWERING LOCUS T）是光周期途徑、春化途徑、自主途徑的信號整合因子,但是目前關(guān)于甘藍型油菜FT基因的表達調(diào)控研究不完善。由于甘藍型油菜FT基因具有多個拷貝,本文針對A7-FT基因開展研究。1.利用實時熒光定量技術(shù)（RT-qPCR）研究FT基因在不同品種（品系）不同時期的表達規(guī)律,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同品種（品系）甘藍型油菜FT基因表達模式基本一致,呈先上升后下降趨勢,且在花期FT基因表達量最大;在苗期、花芽分化期、蕾薹期、花期弱冬性材料103、104、1358的FT基因表達量均高于冬性較強的湘油15號和中雙11號,角果FT基因的表達量與甘藍型油菜的生態(tài)型無明顯規(guī)律。2.通過PCR技術(shù)從甘藍型油菜湘油15號基因DNA中獲得A7-FT基因啟動子序列。利用PLACE和PlantCARE在線工具對該段序列的順式作用元件進行預測,結(jié)果表明,A7-FT基因啟動子除了存在啟動子核心元件TATA-box、CAAT-box... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 植物開花的分子機理
        1.1.1 光周期途徑
        1.1.2 春化途徑
        1.1.3 赤霉素途徑
        1.1.4 自主途徑
    1.2 開花關(guān)鍵基因FT的研究進展
        1.2.1 開花關(guān)鍵基因FT的發(fā)現(xiàn)及發(fā)展
        1.2.2 開花關(guān)鍵基因FT作用模式
    1.3 植物開花信號途徑整合因子FT
        1.3.1 光周期途徑對FT基因的調(diào)控
        1.3.2 春化途徑和自主途徑對FT基因的調(diào)控
    1.4 植物啟動子研究現(xiàn)狀
        1.4.1 啟動子的概述
        1.4.2 啟動子的克隆方法
        1.4.3 啟動子的生物信息學分析
    1.5 目的與意義
第2章 甘藍型油菜FT基因表達分析
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物材料
    2.2 試劑和儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 設(shè)計熒光定量中使用的引物
    2.3 實驗方法
        2.3.1 FT基因表達量檢測
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 總RNA的提取
        2.4.4 FT基因表達結(jié)果分析
第3章 A7-FT基因啟動子的克隆、序列分析及缺失載體構(gòu)建
    3.1 實驗材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 實驗菌株
    3.2 試劑和儀器
        3.2.1 主要試劑
        3.2.2 主要儀器
    3.3 試驗方法
        3.3.1 A7-FT基因啟動子的克隆
        3.3.2 啟動子序列分析及缺失載體構(gòu)建
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 啟動子上順式作用元件預測
        3.4.2 不同片段長度啟動子的克隆及PCR檢測
        3.4.3 啟動子缺失載體的構(gòu)建
        3.4.4 5′端缺失載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌結(jié)果分析
第4章 擬南芥的轉(zhuǎn)化和A7-FT啟動子功能分析
    4.1 實驗材料
    4.2 試劑和儀器
        4.2.1 主要試劑
        4.2.2 儀器設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 擬南芥的培養(yǎng)
        4.3.2 擬南芥轉(zhuǎn)化
        4.3.3 轉(zhuǎn)化子篩選
        4.3.4 GUS活性的組織化學檢測
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 擬南芥轉(zhuǎn)化結(jié)果
        4.4.2 GUS染色結(jié)果檢測
第5章 討論與結(jié)論
    5.1 甘藍型油菜FT基因表達分析
    5.2 A7-FT啟動子具有誘導基因表達的功能
參考文獻
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]真核啟動子研究進展[J]. 湯方,涂慧珍.  林業(yè)科技開發(fā). 2015(02)
[2]“稻—稻—油”三熟制生產(chǎn)模式探討[J]. 周訓華,唐廣心,朱志華,何華元.  作物研究. 2015(01)
[3]植物GI基因生理功能研究進展[J]. 唐維,劉亞菊,張允剛,王欣,后猛,閆會,馬代夫,李強.  分子植物育種. 2014(05)
[4]植物SOC1/AGL20基因研究進展[J]. 馬騰飛,林新春.  浙江農(nóng)林大學學報. 2013(06)
[5]開花整合子SOC1花期調(diào)控的分子機制[J]. 鮮登宇,江為,趙夏云,湯青林,宋明,王志敏.  中國蔬菜. 2013(06)
[6]LEAFY（LFY）基因在花發(fā)育網(wǎng)絡(luò)調(diào)控中的研究進展[J]. 張亞萍,習珺珺,于麗霞,李斌,高則睿,鄢波.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2012(09)
[7]高等植物CO基因研究進展[J]. 付建新,王翊,戴思蘭.  分子植物育種. 2010(05)
[8]光周期途徑植物開花決定關(guān)鍵基因FT[J]. 郭春曉,田素波,鄭成淑,王文莉,孫憲芝.  基因組學與應(yīng)用生物學. 2009(03)
[9]植物LFY基因的研究進展[J]. 蘭樹斌,李建國.  廣西農(nóng)業(yè)生物科學. 2007(S1)
[10]植物開花光周期反應(yīng)的分子調(diào)控機制[J]. 沙愛華,王英,劉志文,蔡銘,袁平該,陳憲成.  華北農(nóng)學報. 2006(S1)

博士論文
[1]甘藍型油菜3D基因組學的初步研究與應(yīng)用[D]. 謝婷.華中農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]甘藍型油菜花序生長調(diào)節(jié)因子基因BnTFL1的功能分析及遺傳轉(zhuǎn)化的優(yōu)化[D]. 廖志強.湖南農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]春性甘藍型油菜遺傳連鎖圖譜構(gòu)建及開花時間的QTL定位分析[D]. 柳海東.青海大學 2015
[4]甘藍型油菜開花調(diào)控基因BnFLC.A10和BnFTs的功能分析[D]. 代書桃.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[5]大豆生育期新基因E9的發(fā)現(xiàn)及FT/TFL互作蛋白的功能研究[D]. 南海洋.中國科學院研究生院（東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所） 2014
[6]植物開花基因FT的遺傳轉(zhuǎn)化及其參與開花調(diào)控的研究[D]. 呂波.山東農(nóng)業(yè)大學 2014
[7]大豆FT/TFL1基因克隆、表達模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中國農(nóng)業(yè)科學院 2009

碩士論文
[1]南方稻田機械起壟栽培對油菜氮素營養(yǎng)特性以及光合特性的影響[D]. 徐江林.湖南農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]甘藍型油菜“丙409”光周期敏感性QTLs定位及轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 崔艷科.華中農(nóng)業(yè)大學 2017
[3]桑樹FT基因啟動子的克隆和功能分析[D]. 姚璐.西北農(nóng)林科技大學 2016
[4]VRN1及Ppd-D1等位變異對小麥光合效率的效應(yīng)及引進冬小麥種質(zhì)的光合效率評價[D]. 劉政.西北農(nóng)林科技大學 2016
[5]甘藍型油菜BnFAD2-C5基因的表達及調(diào)控序列的功能分析[D]. 劉芳.湖南農(nóng)業(yè)大學 2015
[6]小麥VRN2基因功能分析及長日照促進開花早期反應(yīng)基因的鑒定[D]. 劉誠誠.山東農(nóng)業(yè)大學 2014
[7]不同桑樹品種的FT基因時空表達分析[D]. 朱大鵬.西北農(nóng)林科技大學 2014
[8]普通小麥春化基因VRN1、VRN3過表達及RNA干擾載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 朱燦燦.河南農(nóng)業(yè)大學 2014
[9]甘藍型油菜早熟相關(guān)性狀QTL定位及開花基因BnGI的克隆[D]. 周曉晨.上海交通大學 2014
[10]蘋果Flowering locus T （FT）基因及其啟動子的克隆及表達分析[D]. 鄭小一.南京農(nóng)業(yè)大學 2010



本文編號：3474507