目的體外應(yīng)用慢病毒載體轉(zhuǎn)染構(gòu)建TTF-1基因過(guò)表達(dá)的A549細(xì)胞系,然后實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)測(cè)試肺腺癌A549細(xì)胞的增殖能力、遷移和侵襲能力,以明確TTF-1基因?qū)Ψ蜗侔┘?xì)胞增殖能力、遷移和侵襲能力的影響。方法分析TTF-1基因序列,設(shè)計(jì)單鏈Oligo序列,應(yīng)用PCR法將TTF-1的cDNA的Oligo序列進(jìn)行拼接,然后連入pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro,轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)胞DH-5α,測(cè)序鑒定;將攜帶TTF-1基因的慢病毒過(guò)表達(dá)重組載體轉(zhuǎn)染至293T細(xì)胞,包裝產(chǎn)生慢病毒,測(cè)定病毒滴度并應(yīng)用最佳病毒滴度去感染人肺腺癌A549細(xì)胞株,構(gòu)建過(guò)表達(dá)的TTF-1基因的肺腺癌細(xì)胞系,體外繼續(xù)培養(yǎng)TTF-1基因過(guò)表達(dá)的A549細(xì)胞系,應(yīng)用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)了解過(guò)表達(dá)TTF-1基因?qū)Ψ蜗侔┘?xì)胞增殖能力、遷移和侵襲能力的影響。結(jié)果測(cè)序結(jié)果顯示,TTF-1基因過(guò)表達(dá)慢病毒載體pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro構(gòu)建成功,基因序列測(cè)序結(jié)果正確;經(jīng)慢病毒包裝所得病毒上清液經(jīng)計(jì)算病毒滴度為6×10⁷TU/ml;穩(wěn)定轉(zhuǎn)染... 

【文章來(lái)源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
材料
方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
個(gè)人簡(jiǎn)歷
開題、中期及學(xué)位論文答辯委員成員


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肺腺癌靶向治療藥物的應(yīng)用及耐藥機(jī)制[J]. 杜鳳華,閔旭紅,梅曉冬.  臨床肺科雜志. 2018(01)
[2]Ⅰ期非小細(xì)胞肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移影響因素分析[J]. 紀(jì)永棋,榮振華,魏煜程.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2017(87)
[3]循環(huán)腫瘤細(xì)胞在早期肺癌診療中的研究進(jìn)展[J]. 段新春,劉志東,許紹發(fā).  中國(guó)肺癌雜志. 2017(10)
[4]肺腺癌中預(yù)后多維轉(zhuǎn)錄組分子標(biāo)簽的構(gòu)建[J]. 鄭鴻軒,張建.  中國(guó)腫瘤. 2017(10)
[5]TTF-1、NapsinA、P63和CK5/6在肺癌組織的表達(dá)與分型診斷的價(jià)值[J]. 余何,李鐳,劉丹,李為民.  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(03)
[6]淺論對(duì)非小細(xì)胞肺癌進(jìn)行手術(shù)治療的研究進(jìn)展[J]. 陳秀科.  當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2017(10)
[7]Arterial complication of irreversible electroporation procedure for locally advanced pancreatic cancer[J]. Yahya Ekici,Tugan Tezcaner,Hüseyin Onur Ayd?n,Fatih Boyvat,G?khan Moray.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(10)
[8]原代培養(yǎng)神經(jīng)元的轉(zhuǎn)染技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 李諾,呂中明,王民生.  江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué). 2016(03)
[9]腺病毒對(duì)原代枯否細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率及增殖活性的影響[J]. 朱彤,涂文娟,談志麗,劉亮明.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2016(06)
[10]TTF-1蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 毛燕青.  解放軍醫(yī)藥雜志. 2015(12)



本文編號(hào)：3459932