發(fā)布時間：2021-10-23 15:51

　　芥菜在我國長江中下游地區(qū)廣泛栽植,其產(chǎn)品器官的產(chǎn)量與品質(zhì)受開花時間影響。適期開花是保證芥菜正常生長和繁育的關(guān)鍵因素。外在環(huán)境條件（如光照和溫度）及內(nèi)在生長狀況（如發(fā)育階段和遺傳因素）都會影響芥菜開花。開花調(diào)控基因分布于光周期途徑、春化途徑、溫敏途徑、年齡途徑、自主途徑和赤霉素途徑等六條開花調(diào)控途徑,并最終整合到關(guān)鍵的開花信號整合子,調(diào)控開花時間。通過對擬南芥的分子遺傳學(xué)研究已鑒定多個參與開花轉(zhuǎn)變的調(diào)節(jié)因子,其中MADS盒轉(zhuǎn)錄因子在開花正調(diào)和負(fù)調(diào)中起著非常重要的作用,如SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1（SOC1）、AGAMOUS-LIKE24（AGL24）。DNAJ HOMOLOG3（J3）蛋白是一個新的開花調(diào)控因子,直接與核內(nèi)的SVP相互作用并阻止體內(nèi)SVP與SOC1和FT的結(jié)合,通過減弱SVP與SOC1和FT的結(jié)合直接上調(diào)成花轉(zhuǎn)變期間他們的基因表達。但是J3是否可直接作用于開花整合子SOC1和AGL24調(diào)節(jié)開花時間,目前并不清楚。本研究擬克隆芥菜J3（BjuJ3）基因,轉(zhuǎn)基因研究其對開花的影響,并通過酵母雙雜、pull-down以及酵... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實時熒光定量PCR原理示意圖

白質(zhì)與 DNA 互作有酵母單雜交、雙熒光素酶、免疫共沉淀相結(jié)合等很多方法驗證。本文主要以。系統(tǒng)交技術(shù)的原理系統(tǒng)（Yeast one-hybrid system，Y1H）是在酵母雙來。與酵母雙雜系統(tǒng)不同的是當(dāng) cDNA 文庫構(gòu)建質(zhì)由 GAL4AD 和文庫蛋白質(zhì)組成，這相當(dāng)于用文L4 BD，如該文庫蛋白能與 DNA 之間相互作用，達就能驗證其相互作用[102, 103]。本實驗的主要步驟粒轉(zhuǎn)入到酵母細(xì)胞中，通過挑斑檢測篩選出帶有表達文庫中的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入到酵母細(xì)胞中；最

雜交技術(shù)的應(yīng)用可以分為兩類：一是發(fā)現(xiàn)可能與目的蛋白因，并可進一步鑒定 DNA 作用位點。這是主要應(yīng)用方面就運用該技術(shù)篩選出能與大鼠基因 GPE1 核心序列相互作用生物信息學(xué)分析 DNA 的結(jié)構(gòu)域，得到結(jié)構(gòu)信息之后再利用構(gòu)進行分析。1993 年，Wilson 等[105, 106]用該技術(shù)分析了兩用結(jié)構(gòu)域。素酶報告基因系統(tǒng)光素酶報告基因檢測的原理素酶報告基因系統(tǒng)的基本原理就是將重新編碼的測試序列光素酶報道基因之間，隨后在同一管中測量兩種熒光素酶化比率與核糖體“讀取”記錄信號的效率成正比，從而使換到下一個閱讀框。新鮮制備熒光素酶測定緩沖液和海腎螢火蟲熒光素酶與固定量的海腎熒光素酶混合，并測定其判斷蛋白與 DNA 是否有相互作用。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]模式植物擬南芥開花時間分子調(diào)控研究進展[J]. 舒黃英,郝園園,蔡慶澤,王振,朱國鵬,成善漢,周媛,汪志偉.  植物科學(xué)學(xué)報. 2017(04)
[2]芥菜AGL18家族成員與開花整合子SOC1的互作分析[J]. 李朝闖,馬關(guān)鵬,謝婷,陳嬌,王志敏,宋明,湯青林.  園藝學(xué)報. 2017(03)
[3]實時熒光定量PCR技術(shù)研究進展及其應(yīng)用[J]. 王玉倩,薛秀花.  生物學(xué)通報. 2016(02)
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[5]芥菜開花整合子SOC1與AGL24蛋白K結(jié)構(gòu)域的互作位點鑒定[J]. 謝婷,谷慧英,江為,馬關(guān)鵬,陳嬌,王志敏,宋明,湯青林.  園藝學(xué)報. 2015(03)
[6]芥菜開花相關(guān)基因AGL24的表達及與SOC1、SVP和FLC蛋白的互作[J]. 江為,楊修勤,谷慧英,鮮登宇,趙夏云,王志敏,宋明,湯青林.  園藝學(xué)報. 2014(10)
[7]開花整合子SOC1花期調(diào)控的分子機制[J]. 鮮登宇,江為,趙夏云,湯青林,宋明,王志敏.  中國蔬菜. 2013(06)
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[9]植物開花時間:自然變異與遺傳分化[J]. 羅睿,郭建軍.  植物學(xué)報. 2010(01)
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碩士論文
[1]甘藍(lán)TT8及WD40轉(zhuǎn)錄因子影響花青素合成及開花時間的研究[D]. 周雯.西南大學(xué) 2017
[2]芥菜AGL6、AGL15與SOC1、AGL24、SVP蛋白的互作研究[D]. 馬關(guān)鵬.西南大學(xué) 2016
[3]芥菜AGL24基因的啟動子克隆與其互作因子SOC1遺傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 陳嬌.西南大學(xué) 2016
[4]芥菜開花整合子SOC1與開花抑制因子SVP、FLC蛋白相互作用[D]. 谷慧英.西南大學(xué) 2015
[5]芥菜開花調(diào)控基因SVP和AGL24的克隆及其表達分析[D]. 楊修勤.西南大學(xué) 2014
[6]芥菜開花整合子SOC1的克隆和表達分析[D]. 鄒晨輝.西南大學(xué) 2014



本文編號：3453465