目的:以香煙煙霧對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞（BEAS-2B）進(jìn)行長(zhǎng)期染毒,檢測(cè)其整體組蛋白乙�；癄顟B(tài)改變,在染煙細(xì)胞組蛋白H3K9乙酰化狀態(tài)差異改變的基因中篩選并驗(yàn)證其中的FOXO3基因,進(jìn)一步分析FOXO3基因在香煙煙霧引起的細(xì)胞增殖及凋亡改變中的作用機(jī)制。目的是深入探討吸煙致肺癌的發(fā)病機(jī)制,為肺癌的臨床診斷、治療及預(yù)后提供新的理論基礎(chǔ)。方法:利用實(shí)驗(yàn)室前期建立的長(zhǎng)期香煙煙霧暴露細(xì)胞模型,用Western Blot檢測(cè)各染毒組細(xì)胞組蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）及組蛋白H3K9乙�；鞍祝ˋ-H3K9）的表達(dá);生物信息學(xué)分析染煙后組蛋白異常乙酰化基因;熒光實(shí)時(shí)定量PCR和Western Blot檢驗(yàn)染煙及組蛋白去乙�；敢种苿㏕SA對(duì)FOXO3表達(dá)的影響;CCK8方法檢測(cè)細(xì)胞增殖率;流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡;檢測(cè)caspase3/7活性及Bax/Bcl-2比率分析細(xì)胞凋亡通路活化狀態(tài);細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染進(jìn)行FOXO3過(guò)表達(dá),CCK8及caspase3/7活性方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染FOXO3慢病毒后細(xì)胞的增殖及凋亡狀態(tài);Western Blot檢測(cè)染煙及JNK通路抑制劑（JNKi）處理對(duì)FOXO3及... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

對(duì)照組及各染煙組細(xì)胞中HDAC1及A-H3K9蛋白表達(dá)（注：*：P<0.05；）

圖 2 對(duì)照組及各染煙組細(xì)胞 TSA 作用前后 FOXO3 基因表達(dá)情況（A. 對(duì)照組及各染煙組細(xì)胞TSA作用前后FOXO3基因mRNA表達(dá)量； B. 對(duì)照組及各染煙組細(xì)胞FOXO3蛋白表達(dá)及灰度分析；C. TSA處理后對(duì)照組及染煙組細(xì)胞FOXO3蛋白表達(dá)及灰度分析；注：與2B+TSA(-)組比較，*：P <0.05；**：P <0.01；***：P <0.001；與TSA(-)

16圖 3 組蛋白乙�；酒袇⑴c PI3K/AKT 通路的基因通過(guò)生物信息學(xué)分析高通量Chip-seq檢測(cè)到組蛋白異常乙酰化的基因，發(fā)現(xiàn)這些基因主要富集到四條通路上，其中PTEN dependent cell cycle arrest and apoptosis


本文編號(hào)：3448035