目的Numb基因是新發(fā)現(xiàn)的細胞命運決定因素。它與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關,在之前的實驗當中,我們課題小組在前期的實驗中證明了將SaRNA導入人去勢抵抗性前列腺癌PC-3細胞,Numb基因高表達后,通過Hedgehog信號通路將人前列腺癌PC-3細胞的細胞周期阻滯在G0/G1期。本實驗進一步通過將Numb高表達的PC-3細胞于裸鼠體表成瘤,并應用HE染色、RT-qPCR技術、Western Blot技術及流式細胞技術,驗證Numb高表達后對前列腺惡性腫瘤生長的影響,以及其通過Hedgehog信號通路對人前列腺癌PC-3細胞的細胞周期的影響。方法1.將30只裸鼠隨機分成三組,收集生長對數(shù)期的三組PC-3細胞擴增培養(yǎng),并分別對三組裸鼠進行皮下注射Numb基因高表達的重組人PC-3細胞（重組PC-3細胞）作為實驗組、空轉(zhuǎn)染病毒的PC-3細胞作為對照組和未轉(zhuǎn)染的PC-3細胞作為空白組,進行皮下成瘤實驗。2.14d后取三組腫瘤組織分別進行HE染色。3.采用Real-time quantitative PCR（RT-qPCR）法檢測三組腫瘤組織中Numb、SHH、GLi及CyclinE的mRNA... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

裸鼠瘤組織HE染色結(jié)果

18而轉(zhuǎn)染組SHh、Gli-1和CyclinE基因表達水平顯著低于空白對照組和空載組，且差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。而空白對照組與空載組之間無明顯差異（p＞0.05）。（表1）表1裸鼠成瘤組織Numb、SHh、CyclinE和Gli1的RT-qPCR結(jié)果4.裸鼠成瘤組織Numb、SHh、CyclinE和Gli1的蛋白表達水平WesternBlot結(jié)果顯示：裸鼠成瘤組織中，轉(zhuǎn)染組Numb蛋白表達水平顯著高于空白對照組和空載組，而SHh、Gli-1和CyclinE蛋白表達水平顯著低于空白對照組和空載組，且差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。而空白對照組和空載組之間無顯著差異（p＞0.05）。（圖2）圖2裸鼠瘤組織中Numb、SHh、CyclinE和Gli1的WesternBlot結(jié)果NumbSHhGli-1CyclinEActin空白對照組空載組轉(zhuǎn)染組

【參考文獻】：
期刊論文
[1]靶向抑制Hedgehog信號通路對肝細胞癌增殖、凋亡和轉(zhuǎn)移的影響[J]. 沈依萌,高慶祥,劉曉智,萬喬浩,田孝東,楊尹默,李艷霞,吳問漢.  中華肝膽外科雜志. 2018 (03)
[2]NUMB與SIP1在胃癌組織中的表達水平及其臨床意義[J]. 谷瀚博,蔡相軍,李醫(yī)明,劉洪濤,王曉歡.  疑難病雜志. 2017(04)
[3]阻斷Sonic Hedgehog信號對不同人肝癌細胞生長的影響[J]. 劉愛梅,余功旺,黃莉霞,孫艷,遲作華.  中國病理生理雜志. 2016(02)
[4]saRNA上調(diào)人前列腺癌PC-3細胞中Numb基因表達的研究[J]. 陳金飚,顏醒愚.  重慶醫(yī)學. 2016(04)
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[6]腹膜外入路腹腔鏡下前列腺癌根治術41例[J]. 梁朝朝,周駿,葉元平,劉明,張賢生,郝宗耀,方衛(wèi)華,施浩強,王克孝.  中華腔鏡外科雜志(電子版). 2012(04)

碩士論文
[1]saRNA激活AIPC細胞Numb基因?qū)edgehog信號通路重要因子SHh、GLi和CyclinE表達的影響[D]. 張河淦.福建醫(yī)科大學 2017



本文編號：3445760