目的Numb基因是新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞命運決定因素。它與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),在之前的實驗當(dāng)中,我們課題小組在前期的實驗中證明了將SaRNA導(dǎo)入人去勢抵抗性前列腺癌PC-3細(xì)胞,Numb基因高表達后,通過Hedgehog信號通路將人前列腺癌PC-3細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期。本實驗進一步通過將Numb高表達的PC-3細(xì)胞于裸鼠體表成瘤,并應(yīng)用HE染色、RT-qPCR技術(shù)、Western Blot技術(shù)及流式細(xì)胞技術(shù),驗證Numb高表達后對前列腺惡性腫瘤生長的影響,以及其通過Hedgehog信號通路對人前列腺癌PC-3細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響。方法1.將30只裸鼠隨機分成三組,收集生長對數(shù)期的三組PC-3細(xì)胞擴增培養(yǎng),并分別對三組裸鼠進行皮下注射Numb基因高表達的重組人PC-3細(xì)胞（重組PC-3細(xì)胞）作為實驗組、空轉(zhuǎn)染病毒的PC-3細(xì)胞作為對照組和未轉(zhuǎn)染的PC-3細(xì)胞作為空白組,進行皮下成瘤實驗。2.14d后取三組腫瘤組織分別進行HE染色。3.采用Real-time quantitative PCR（RT-qPCR）法檢測三組腫瘤組織中Numb、SHH、GLi及CyclinE的mRNA... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

裸鼠瘤組織HE染色結(jié)果

18而轉(zhuǎn)染組SHh、Gli-1和CyclinE基因表達水平顯著低于空白對照組和空載組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）。而空白對照組與空載組之間無明顯差異（p＞0.05）。（表1）表1裸鼠成瘤組織Numb、SHh、CyclinE和Gli1的RT-qPCR結(jié)果4.裸鼠成瘤組織Numb、SHh、CyclinE和Gli1的蛋白表達水平WesternBlot結(jié)果顯示：裸鼠成瘤組織中，轉(zhuǎn)染組Numb蛋白表達水平顯著高于空白對照組和空載組，而SHh、Gli-1和CyclinE蛋白表達水平顯著低于空白對照組和空載組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）。而空白對照組和空載組之間無顯著差異（p＞0.05）。（圖2）圖2裸鼠瘤組織中Numb、SHh、CyclinE和Gli1的WesternBlot結(jié)果NumbSHhGli-1CyclinEActin空白對照組空載組轉(zhuǎn)染組

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]saRNA激活A(yù)IPC細(xì)胞Numb基因?qū)edgehog信號通路重要因子SHh、GLi和CyclinE表達的影響[D]. 張河淦.福建醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號：3445760