玉米是重要的糧食、飼料和工業(yè)原料。我國玉米的種植面積占世界玉米種植總面積的25%,玉米產(chǎn)量和品質(zhì)對于我國農(nóng)業(yè)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展具有重要意義。影響玉米產(chǎn)量和品質(zhì)的因素有很多種,其中,玉米真菌性病害是影響玉米產(chǎn)量和品質(zhì)的重要因素之一。玉米穗粒腐病是一種世界上普遍發(fā)生、危害比較嚴(yán)重的真菌性病害,嚴(yán)重影響玉米的產(chǎn)量和品質(zhì),對人畜安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅。玉米穗粒腐病的主要病原菌是擬輪枝鐮孢菌。選育抗病品種是解決擬輪枝鐮孢菌危害的根本方法,而這需要對抗病遺傳機(jī)制及抗病基因進(jìn)行深入了解。本研究通過玉米對擬輪枝鐮孢菌全基因組關(guān)聯(lián)分析、轉(zhuǎn)錄組和QTL定位區(qū)間等數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,挑選了兩個與玉米擬輪枝鐮孢菌抗性相關(guān)的基因,分別是 GRA4ZM2G108133（ZmBGLU）和GRA4ZAM2G1-54628（ZmPIP2d）。通過同源克隆,克隆了兩個候選基因,構(gòu)建兩個基因的載體進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,對候選基因進(jìn)行功能分析。研究結(jié)果如下:（1）克隆了高抗玉米自交系BT-1及感病自交系N6中ZmBGLU和ZmPIP2d基因的全長。構(gòu)建ZmBGLU基因和ZmPIP2d基因的瞬時表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化洋蔥,結(jié)果表明:兩個基因均定位在細(xì)胞質(zhì)膜上。（... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

圖２－１植物表達(dá)載體ｐＣＡＭＢＩＡ２３０１－ＧＷ－ＲＮＡｉ質(zhì)粒圖譜??Ｆｉｇ．２－１?Ｐｌａｓｍｉｄ?ｍａｐ?ｏｆ?ｐＣＡＭＢＩＡ２３０１－ＧＷ－ＲＮＡｉ?ｖｅｃｔｏｒ??

４結(jié)果與分析??４．１?ＲＮＡ提取與檢測??Ａ?Ｂ?Ｃ?Ｄ?ＥＦＧＨ??．（＇一?Ｕ——她Ａ??圖４－１玉米Ｎ６和ＢＴ－１的ＲＮＡ??Ｆｉｇ．４－１?ＲＮＡ?ｏｆＮ６ａｎｄ?ＢＴ－１??泳道Ａ－Ｄ是玉米Ｎ６的ＲＮＡ電泳圖；泳道Ｅ－Ｈ為玉米ＢＴ－１的ＲＮＡ電泳圖。??泳道Ｃ和泳道Ｆ，ＲＮＡ的條帶比較清晰。２８Ｓ條帶的亮度大約是１８Ｓ的二倍。核酸濃度測??定結(jié)果表明：泳道Ｃ的Ａ２６０／Ａ２８０比值為２．１，泳道Ｆ的Ａ２６０／Ａ２８０比值為２．０。ＲＮＡ提取質(zhì)??量良好，可以用于反轉(zhuǎn)錄。??４．２?基因全長克隆??ＭＡＢＣＤＥＦＧＨＩ?Ｍ?ＬＭＮ?Ｏ?Ｐ?Ｑ?Ｒ?Ｓ?Ｔ??Ａ?Ｂ??圖４－２?Ｎ６和ＢＴ－１的ＺｗＢＧｉＬ＇基因全長擴(kuò)增??Ｆｉｇ．４－２?Ｆｕｌｌ－ｌｅｎｇｔｈ?Ｚｍ５ＧＺ＿ｉ７?ｇｅｎｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｎ６?ａｎｄ?ＢＴ－１??泳道Ｍ是ＤＬ２Ｋ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ。Ａ圖：Ａ－Ｉ是玉米Ｎ６中擴(kuò)增基因的電泳結(jié)果。Ｂ圖中：Ｌ－Ｔ是玉??米ＢＴ－Ｉ擴(kuò)增Ｚｍ／ＶＰ２ｄ的電泳結(jié)果。??電泳和測序結(jié)果表明：Ａ圖中，泳道Ｅ和Ｆ是Ｎ６－Ｚｗ５ＧＺＣ７基因的片段；Ｂ圖中泳道Ｑ和??Ｒ是ＢＴ－］－Ｚｗ５Ｇｉｔ／基因的片段。Ｎ６－Ｚｗ５ＧＺｔ／和堿基序列相同。??４．３?ＺｗＳＧｉＵ基因序列分析??４．３＿］?Ｚｗ似＂基因同源基因物種分析??３０??

４結(jié)果與分析??４．１?ＲＮＡ提取與檢測??Ａ?Ｂ?Ｃ?Ｄ?ＥＦＧＨ??．（＇一?Ｕ——她Ａ??圖４－１玉米Ｎ６和ＢＴ－１的ＲＮＡ??Ｆｉｇ．４－１?ＲＮＡ?ｏｆＮ６ａｎｄ?ＢＴ－１??泳道Ａ－Ｄ是玉米Ｎ６的ＲＮＡ電泳圖；泳道Ｅ－Ｈ為玉米ＢＴ－１的ＲＮＡ電泳圖。??泳道Ｃ和泳道Ｆ，ＲＮＡ的條帶比較清晰。２８Ｓ條帶的亮度大約是１８Ｓ的二倍。核酸濃度測??定結(jié)果表明：泳道Ｃ的Ａ２６０／Ａ２８０比值為２．１，泳道Ｆ的Ａ２６０／Ａ２８０比值為２．０。ＲＮＡ提取質(zhì)??量良好，可以用于反轉(zhuǎn)錄。??４．２?基因全長克隆??ＭＡＢＣＤＥＦＧＨＩ?Ｍ?ＬＭＮ?Ｏ?Ｐ?Ｑ?Ｒ?Ｓ?Ｔ??Ａ?Ｂ??圖４－２?Ｎ６和ＢＴ－１的ＺｗＢＧｉＬ＇基因全長擴(kuò)增??Ｆｉｇ．４－２?Ｆｕｌｌ－ｌｅｎｇｔｈ?Ｚｍ５ＧＺ＿ｉ７?ｇｅｎｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｎ６?ａｎｄ?ＢＴ－１??泳道Ｍ是ＤＬ２Ｋ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ。Ａ圖：Ａ－Ｉ是玉米Ｎ６中擴(kuò)增基因的電泳結(jié)果。Ｂ圖中：Ｌ－Ｔ是玉??米ＢＴ－Ｉ擴(kuò)增Ｚｍ／ＶＰ２ｄ的電泳結(jié)果。??電泳和測序結(jié)果表明：Ａ圖中，泳道Ｅ和Ｆ是Ｎ６－Ｚｗ５ＧＺＣ７基因的片段；Ｂ圖中泳道Ｑ和??Ｒ是ＢＴ－］－Ｚｗ５Ｇｉｔ／基因的片段。Ｎ６－Ｚｗ５ＧＺｔ／和堿基序列相同。??４．３?ＺｗＳＧｉＵ基因序列分析??４．３＿］?Ｚｗ似＂基因同源基因物種分析??３０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]蛋白質(zhì)甲基化修飾的蛋白質(zhì)組學(xué)分析方法新進(jìn)展[J]. 王科云,葉明亮,鄒漢法.  色譜. 2016(12)
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碩士論文
[1]擬南芥AtDOF1基因的克隆及其轉(zhuǎn)基因玉米的功能驗證[D]. 張雪.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3414638