目的研究異種肝細(xì)胞或肝移植中,活化的人外周血單個(gè)核細(xì)胞（h-PBMC）分泌的細(xì)胞因子對(duì)α-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因敲除豬肝細(xì)胞（GalT-KO-hep）的作用。方法利用永生化GalT-KO-hep,與經(jīng)脂多糖+聚肌胞苷酸激活的h-PBMC共培養(yǎng)。生化分析檢測(cè)共培養(yǎng)上清中白蛋白、ALT、AST和尿素水平,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)GalT-KO-hep凋亡,采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)GalT-KO-hep中Caspase-3剪切體表達(dá)以及c-Jun氨基末端激酶（JNK）、核因子κB（NF-κB）、P38絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）、信號(hào)傳導(dǎo)與活化轉(zhuǎn)錄因子3（STAT3）和蛋白激酶B（AKT）通路相關(guān)分子的表達(dá)變化。采用方差分析比較不同刺激時(shí)間h-PBMC分泌的細(xì)胞因子mRNA相對(duì)表達(dá)量、共培養(yǎng)模型不同時(shí)間點(diǎn)上清液生化指標(biāo)含量、GalT-KO-hep中Caspase 3剪切體表達(dá)量和細(xì)胞凋亡率,進(jìn)一步兩兩比較采用LSD法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 GalT-KO-hep與活化h-PBMC共培養(yǎng)6 h組上清液中ALT含量高于共培養(yǎng)24 h和48 h組,差... 

【文章來(lái)源】：中華移植雜志(電子版). 2020,14(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

不同刺激時(shí)間h- PBMC分泌的細(xì)胞因子mRNA相對(duì)表達(dá)量

GalT- KO- hep與活化h- PBMC 共培養(yǎng)6 h組上清液中ALT含量高于共培養(yǎng)24 h和48 h組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05);共培養(yǎng)48 h組AST含量高于共培養(yǎng)6 h和24 h組;共培養(yǎng)24 h和48 h組尿素含量均高于共培養(yǎng)6 h組;白蛋白各時(shí)間點(diǎn)含量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見圖2)。GalT- KO- hep與活化h- PBMC共培養(yǎng)24 h和48 h后,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)細(xì)胞中Caspase 3剪切體表達(dá)增加,與對(duì)照組(只用含20%人血清的HM培養(yǎng)基培養(yǎng)的GalT- KO- hep)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05),表明GalT- KO- hep在共培養(yǎng)因素刺激下凋亡增多(見圖3)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,GalT- KO- hep凋亡程度逐漸增加(見圖4)。

與活化h- PBMC共培養(yǎng)不同時(shí)間的GalT- KO- hep中

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner.  World Journal of Gastroenterology. 2016(18)



本文編號(hào)：3396157