發(fā)布時間：2021-09-15 13:22

　　目的研究異種肝細胞或肝移植中,活化的人外周血單個核細胞（h-PBMC）分泌的細胞因子對α-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因敲除豬肝細胞（GalT-KO-hep）的作用。方法利用永生化GalT-KO-hep,與經(jīng)脂多糖+聚肌胞苷酸激活的h-PBMC共培養(yǎng)。生化分析檢測共培養(yǎng)上清中白蛋白、ALT、AST和尿素水平,采用流式細胞術(shù)檢測GalT-KO-hep凋亡,采用蛋白質(zhì)印跡法檢測GalT-KO-hep中Caspase-3剪切體表達以及c-Jun氨基末端激酶（JNK）、核因子κB（NF-κB）、P38絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）、信號傳導(dǎo)與活化轉(zhuǎn)錄因子3（STAT3）和蛋白激酶B（AKT）通路相關(guān)分子的表達變化。采用方差分析比較不同刺激時間h-PBMC分泌的細胞因子mRNA相對表達量、共培養(yǎng)模型不同時間點上清液生化指標含量、GalT-KO-hep中Caspase 3剪切體表達量和細胞凋亡率,進一步兩兩比較采用LSD法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果 GalT-KO-hep與活化h-PBMC共培養(yǎng)6 h組上清液中ALT含量高于共培養(yǎng)24 h和48 h組,差... 

【文章來源】：中華移植雜志(電子版). 2020,14(03)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同刺激時間h- PBMC分泌的細胞因子mRNA相對表達量

GalT- KO- hep與活化h- PBMC 共培養(yǎng)6 h組上清液中ALT含量高于共培養(yǎng)24 h和48 h組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05);共培養(yǎng)48 h組AST含量高于共培養(yǎng)6 h和24 h組;共培養(yǎng)24 h和48 h組尿素含量均高于共培養(yǎng)6 h組;白蛋白各時間點含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(見圖2)。GalT- KO- hep與活化h- PBMC共培養(yǎng)24 h和48 h后,蛋白質(zhì)印跡法檢測細胞中Caspase 3剪切體表達增加,與對照組(只用含20%人血清的HM培養(yǎng)基培養(yǎng)的GalT- KO- hep)相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05),表明GalT- KO- hep在共培養(yǎng)因素刺激下凋亡增多(見圖3)。流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示,GalT- KO- hep凋亡程度逐漸增加(見圖4)。

與活化h- PBMC共培養(yǎng)不同時間的GalT- KO- hep中

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner.  World Journal of Gastroenterology. 2016(18)



本文編號：3396157