蒺藜苜蓿（Medicago truncatula）是一種重要的豆科牧草植物,也是研究豆科植物的模式植物。目前關(guān)于植物細(xì)胞分裂素的響應(yīng)應(yīng)答機(jī)制,主要在擬南芥、水稻等傳統(tǒng)模式植物中開展,蒺藜苜蓿對(duì)細(xì)胞分裂素的響應(yīng)機(jī)制未知;相關(guān)研究集中在細(xì)胞分裂素直接誘導(dǎo)方面,關(guān)于細(xì)胞分裂素抑制劑對(duì)植物的影響未知;同時(shí)相關(guān)研究主要集中在短期誘導(dǎo)上,關(guān)于長(zhǎng)期使用細(xì)胞分裂素對(duì)植物的影響,無相關(guān)研究報(bào)道。本研究主要是分析蒺藜苜蓿對(duì)細(xì)胞分裂素及細(xì)胞分裂素抑制劑長(zhǎng)期應(yīng)答機(jī)制。通過使用兩種化合物,6-芐氨基嘌呤（6-benzylaminopurine,6-BA）與洛伐他�。╨ovastatin）分別行使細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo)和抑制作用,對(duì)蒺藜苜蓿幼苗進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間處理。通過高通量測(cè)序技術(shù),進(jìn)行差異表達(dá)基因篩選和分析;并對(duì)1個(gè)細(xì)胞分裂素合成關(guān)鍵調(diào)控基因IPT進(jìn)行了深入的功能研究,主要結(jié)果如下:1.對(duì)蒺藜苜蓿進(jìn)行6-BA處理及l(fā)ovastatin處理,進(jìn)行高通量測(cè)序。共構(gòu)建了9個(gè)測(cè)序文庫(kù),測(cè)序和數(shù)據(jù)處理共獲得了67.3Gb clean data;經(jīng)過數(shù)據(jù)拼裝,總共鑒定出33,782個(gè)基因和55,558條轉(zhuǎn)錄本,通過進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),存... 

【文章來源】：北京林業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

三種生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿表型A：三種生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿整株表型；B：三種生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿小葉表型；Bar=1mm

蒺藜苜蓿細(xì)胞分裂素響應(yīng)轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)構(gòu)建及測(cè)序20圖3.2不同生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿激素測(cè)定A：不同生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿zeatin水平；B：不同生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿6-BA水平。*，代表與未處理蒺藜苜蓿相比，差異極顯著（p<0.01）；**，代表細(xì)胞分離素抑制劑處理蒺藜苜蓿與未處理蒺藜苜蓿相比，差異極顯著（p<0.01）。Ctrl：未處理蒺藜苜蓿；Cyto：6-BA處理蒺藜苜蓿；Inh：lovastatin處理蒺藜苜蓿Figure3.2PlanthormonemeasurementsofMedicagotruncatulaunderdifferenttreatmentsA:ZeatinlevlesofMedicagotruncatulaatdifferentgrowingconditions.B:The6-BAlevelsofMedicagotruncatulaatdifferentgrowingconditions.*,indicatessignificantdifferencesofthemeansatp<0.01betweencytokininorlovastatintreatedsamplesandun-treatedsamplesforplanthormonemeasurements(n=3).**,indicatessignificantdifferencesofthemeansatp<0.01betweenplantsoflovastatintreatmentandun-treatmentforplanthormonemeasurements(n=3).Ctrl:Medicagotruncatulawithun-treatment;Cyto:Medicagotruncatulawith6-BAtreatment;Inh:Medicagotruncatulawithlovastatintreatment.3.3.2RNA質(zhì)檢分析提取總RNA經(jīng)0.9%瓊脂糖凝膠電泳分析，結(jié)果顯示：所有的RNA條帶清晰，無蛋白質(zhì)污染、不存在明顯的降解，滿足進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)和分析的要求（圖3.3）。圖3.3RNA瓊脂糖凝膠電泳分析Figure3.3RNAanalysisofMedicagotruncatula使用Agilent2100對(duì)經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)合格的RNA樣品，進(jìn)行進(jìn)一步分析，主要是分析其RIN值，檢測(cè)樣品的完整度。結(jié)果顯示：所有的樣品RIN值均大于8.5，

蒺藜苜蓿細(xì)胞分裂素響應(yīng)轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)構(gòu)建及測(cè)序20圖3.2不同生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿激素測(cè)定A：不同生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿zeatin水平；B：不同生長(zhǎng)條件下蒺藜苜蓿6-BA水平。*，代表與未處理蒺藜苜蓿相比，差異極顯著（p<0.01）；**，代表細(xì)胞分離素抑制劑處理蒺藜苜蓿與未處理蒺藜苜蓿相比，差異極顯著（p<0.01）。Ctrl：未處理蒺藜苜蓿；Cyto：6-BA處理蒺藜苜蓿；Inh：lovastatin處理蒺藜苜蓿Figure3.2PlanthormonemeasurementsofMedicagotruncatulaunderdifferenttreatmentsA:ZeatinlevlesofMedicagotruncatulaatdifferentgrowingconditions.B:The6-BAlevelsofMedicagotruncatulaatdifferentgrowingconditions.*,indicatessignificantdifferencesofthemeansatp<0.01betweencytokininorlovastatintreatedsamplesandun-treatedsamplesforplanthormonemeasurements(n=3).**,indicatessignificantdifferencesofthemeansatp<0.01betweenplantsoflovastatintreatmentandun-treatmentforplanthormonemeasurements(n=3).Ctrl:Medicagotruncatulawithun-treatment;Cyto:Medicagotruncatulawith6-BAtreatment;Inh:Medicagotruncatulawithlovastatintreatment.3.3.2RNA質(zhì)檢分析提取總RNA經(jīng)0.9%瓊脂糖凝膠電泳分析，結(jié)果顯示：所有的RNA條帶清晰，無蛋白質(zhì)污染、不存在明顯的降解，滿足進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)和分析的要求（圖3.3）。圖3.3RNA瓊脂糖凝膠電泳分析Figure3.3RNAanalysisofMedicagotruncatula使用Agilent2100對(duì)經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)合格的RNA樣品，進(jìn)行進(jìn)一步分析，主要是分析其RIN值，檢測(cè)樣品的完整度。結(jié)果顯示：所有的樣品RIN值均大于8.5，

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3391411