發(fā)布時間：2021-09-03 18:45

　　嗜堿鹽單胞菌（Halomonas alkaliphila）DSM 16354T是一株可生長在10%的NaCl及p H 9.0堿性環(huán)境中的一種中度嗜鹽和嗜堿菌。中度嗜鹽菌指的是在0.1%-32.5%Na Cl環(huán)境中能夠正常生長,代謝的微生物類群。它作為細(xì)菌耐鹽堿機制的重要研究對象,基因的類別有很多且耐鹽機制也很復(fù)雜。對中度嗜鹽菌的耐鹽堿基因資源進行挖掘,是深入研究微生物鹽適應(yīng)機制和開發(fā)利用微生物資源的重要前提。它與一般的非嗜鹽菌相比,具有相對獨特的生理生化結(jié)構(gòu)、代謝途徑、以及遺傳學(xué)特性等。本研究利用基因文庫與大腸桿菌（Escherichia coli）鈉/氫逆向轉(zhuǎn)運蛋白缺陷株KNabc（Δnha A、Δnha B、Δcha A）功能互補相結(jié)合的方法,從Halomonas alkaliphila DSM 16354T中克隆獲得一個重組質(zhì)粒p UC-SN11。它編碼鈉/氫逆向轉(zhuǎn)運蛋白（Na⁺/H⁺antiporter）。耐鹽堿實驗表明,KNabc/p UC-SN11能在含0.2 M Na Cl的LBK培養(yǎng)基中生長。并初步預(yù)測該質(zhì)粒包含的序列可能編碼... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)菌中初級鈉/氫泵圖

Table 1-1 The sources and characteristics of Na+coupled decarboxylasesDecarboxylase Bacterium Subunit compositionOxaloacetate decarboxylase K.pneumonia α (63.4)a, β (44.9), γ (8.9) Methylmalonyl-CoAdecarboxylase V.parvulaα α (55), β (38.7), ε(5.8) γ(12.9), δ (11.9),Glutaconyl-CoA decarboxylase A.fermentansα α (64.3), β (36), γ(24), δ(14)Malonate decarboxylase M.rubra MadB (43), MadC (31.8), MadF(7.4) (34.9), MadD1.2.1.2 ATP 酶ATP 酶可將 ATP 水解產(chǎn)生 ADP 和磷酸�？缒� ATP 酶可為細(xì)胞運輸營養(yǎng)物質(zhì)同時排出代謝廢物及毒害細(xì)胞的物質(zhì)等。例如，鈉/鉀離子。ATP 酶，為了維持細(xì)胞靜息電位平衡，來控制細(xì)胞內(nèi)鈉/鉀離子的濃度，氫鉀 ATP 酶可以使胃內(nèi)保持在酸化環(huán)境中。（見圖 1-2 左）。ATP酶有兩種分別 F1F0-ATP 酶與 V-ATP 酶。F1F0-ATP 酶由兩個亞基（F1和 F0）組成，F(xiàn)1亞基負(fù)責(zé) ATP 的合成，F(xiàn)0亞基負(fù)責(zé)運輸鈉離子[19,20]（見圖 1-2 右）。V-ATP 酶在小腸腸球菌中發(fā)現(xiàn)，由于該菌的細(xì)胞膜沒有呼吸鏈，所以能量的供應(yīng)則由 V-ATP 酶來完成。在中性 pH 時，Na+的輸出靠鈉/氫逆向轉(zhuǎn)運蛋白來實現(xiàn)。當(dāng) pH 過高時（9.5 以上）細(xì)胞膜上則不能夠形成質(zhì)子濃度梯度，所以只能依靠 V-ATP 酶來控制 Na+輸出[21,22]。

圖 1-3 依賴于 NADH 泛醌氧化還原酶的 Na+輸出途徑Figure 1-3 NADH-ubiquinone oxidoreductase dependented sodium extrusion system1.2.1.4 CH3-H4MPT 輔酶 M 甲基轉(zhuǎn)移酶CH3-H4MPT 輔酶 M 甲基轉(zhuǎn)移酶是一種初級鈉泵，最早發(fā)現(xiàn)存在細(xì)菌甲烷古菌中，與鈉離子的輸出有關(guān)。轉(zhuǎn)移過程為 CH3-H4MPT 將甲基轉(zhuǎn)移到輔酶 M 上，并將細(xì)胞內(nèi)的鈉離子排出到細(xì)胞的外部[19]（見圖 1-4）。通過轉(zhuǎn)移過程發(fā)現(xiàn)，鈉離子的排出量的多少是與底物甲基多少有關(guān)[23,24]。


本文編號：3381656