洋蔥（Allium cepa L.）是全球主要的商業(yè)化蔬菜作物,至少有139個(gè)國(guó)家種植。洋蔥基因組巨大,分子生物學(xué)基礎(chǔ)領(lǐng)域研究相對(duì)薄弱,特別是關(guān)于洋蔥功能性基因的研究甚少。S期激酶蛋白SKP1（S-phase kinase-associated-protein 1）是普遍存在于真核生物中的一類(lèi)小分子量蛋白質(zhì),其主要生物學(xué)功能在于參與了SCF復(fù)合體的形成,通過(guò)26S蛋白酶途徑調(diào)控生物體內(nèi)泛素介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解,參與了包括植物花粉發(fā)育在內(nèi)的多個(gè)生物過(guò)程。本研究主要以洋蔥恢復(fù)系（DH17）和不育系（230）為材料,利用染色體步移、RACE試驗(yàn)、序列比對(duì)分析、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化等分子生物學(xué)方法,初步闡明了洋蔥AcSKP1基因在洋蔥可育系和不育系中存在可變剪接現(xiàn)象,并且初步進(jìn)行了AcSKP1基因啟動(dòng)子的功能驗(yàn)證。在此基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)了一個(gè)穩(wěn)定高效的洋蔥Ms位點(diǎn)的SSR分子標(biāo)記（WH-SSR-1）,已成功的應(yīng)用于育種實(shí)踐。本研究結(jié)果如下:（1）克隆了洋蔥AcSKP1基因的全長(zhǎng)序列,恢復(fù)系材料（DH17）含有5659 bp,不育系材料（230）含有5636 bp,比對(duì)分析發(fā)現(xiàn),恢復(fù)系和不育系材料之間存在大... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

利用WH-SSR-1標(biāo)記直接從OP群體中篩選保持株和不育株Figure1ScreeningofmaintainerandsterileplantsdirectlyfromtheOPpopulationusingtheWH-SSR-1marker

洋蔥 AcSKP1 基因的克隆、轉(zhuǎn)錄特性及其在育種中的應(yīng)用 結(jié)果與分析.1 洋蔥總 DNA 和 RNA 提取的結(jié)果由圖 2 洋蔥總 RNA 電泳條帶可以得出，點(diǎn)樣孔干凈，表示無(wú)蛋白質(zhì)或多糖的殘留 DNA 條帶，表明幾乎沒(méi)有 DNA 殘留；28 S 和 18 S 條帶清晰，并且可以看出 28 S度大約為 18 S 亮度的兩倍，說(shuō)明 RNA 樣本完整性好。有圖中洋蔥總 DNA 電泳可出，洋蔥總 DNA 片段約為 23 kb，條帶較清晰，并未發(fā)現(xiàn)條帶彌散或降解，表示可本試驗(yàn)的需要。

圖 3 AcSKP1 序列基因預(yù)測(cè)的結(jié)果a：恢復(fù)系（DH17）AcSKP1 序列基因；b：不育系（230）AcSKP1 序列基因Figure 3 Results ofAcSKP1 sequence gene predictiona: Restore line (DH17)AcSKP1 sequence gene; b: Sterile line (230)AcSKP1 sequence gene表 18 引物名稱(chēng)及組合Table18 Primer name and combination組合 Exon3-1LP Exon4-1LP Exon6-1LP Exon7-1LP Exon8-1LP Exon9-1LP Exon10-PolyALPExon1-1UP 385 519 738 827 992 1056 ﹥1000Exon2-1UP 285 419 638 727 892 956 ﹥900Exon3-1UP NA 169 388 477 642 706 ～700Exon4-1UP NA NA 245 334 495 559 ～550Exon5-1UP NA NA 138 227 388 452 ～450Exon6-1UP NA NA NA 133 294 358 ～350Exon7-1UP NA NA NA NA 140 204 ～200Exon8-1UP NA NA NA NA NA 131 ～150

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3371102