小家鼠（Mus musculus）屬嚙齒目（Rodentia）、鼠科（Muridae）、小家鼠屬（Mus）,是人類伴生種,分布于世界各個(gè)地區(qū)。野生小家鼠及其實(shí)驗(yàn)室品系,在生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中有廣泛應(yīng)用。Y染色體嚴(yán)格遵循父系遺傳,其演化機(jī)制一直是物種演化領(lǐng)域重要的研究課題之一。ZFY基因作為Y染色體上重要的雄性特異性基因,在精子形成及精子發(fā)育過程中起到了重要作用,其基因特征及種群遺傳結(jié)構(gòu)對于我們了解雄性特異基因的演化機(jī)制有重要價(jià)值。本論文中,我們對來自全國21個(gè)地區(qū)的野生小家鼠Zfy1/Zfy2基因進(jìn)行序列擴(kuò)增、測序及序列特征和種群遺傳結(jié)構(gòu)分析。實(shí)驗(yàn)中共得到來自21個(gè)地區(qū)的251條長度為561bp的Zfy1序列和來自21個(gè)地區(qū)的251條長度為583bp的Zfy2序列。針對序列進(jìn)行的后續(xù)分析顯示:1)Zfy1/Zfy2序列片段的堿基組成平均為A25.1%/28.2%、T 39.6%/36.1%、G 20.7%/20.6%、C 14.6%/15.1%,兩個(gè)基因序列堿基含量有微小差異;Zfy1/Zfy2序列共檢出變異位點(diǎn)（V）25/24個(gè),將序列定義為29/28個(gè)單倍型（H）;2)不同地理種... 

【文章來源】：魯東大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Y染色體結(jié)構(gòu)（BachtrogD.2013）

魯東大學(xué)碩士學(xué)位論文152.1.2DNA提取實(shí)驗(yàn)前先提前將采集的樣品從超低溫冰箱中取出進(jìn)行解凍，防止DNA的降解及取及用避免在室溫下放置時(shí)間過長。DNA提取主要為粉碎，消化，提取，清洗等步驟。使用上海生工所售的Promega試劑盒。具體過程見表2.2。2.1.3PCR擴(kuò)增使用的引物由上海生工生物公司設(shè)計(jì)并由其合成。合成引物呈粉末狀，使用時(shí)根據(jù)說明進(jìn)行稀釋，并在總樣品中吸取10μL置于潔凈離心管中進(jìn)行備用，其余引物防止降解置于冰箱保存。在正式PCR擴(kuò)增前通過梯度PCR選定Zfy1/Zfy2引物最適退火溫度及時(shí)間。表2.3為本次實(shí)驗(yàn)中是用的兩組引物序列。圖2.1小家鼠樣品各采集地區(qū)分布Fig2.1ThecollectionrecordsofM.musculus

中國小家鼠Y染色體特異性基因（Zfy1,Zfy2）的遺傳多樣性分析18圖2.2部分小家鼠DNA提取產(chǎn)物電泳圖Fig2.2TheresultsofgenomicDNAextraction圖2.3部分小家鼠PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖Fig2.3PCRamplificationproductselectrophoresisbasedonZFYgene注：M:DNAMarkerDL2000,K:空白對照樣品選出寄送至上海生工進(jìn)行純化和測序，測序結(jié)果的峰圖如圖所示。圖2.4ZFY基因擴(kuò)增產(chǎn)物測序圖片段Fig2.4ZFYgeneDNAsequencingresults2.2數(shù)據(jù)處理與分析2.2.1序列處理將測序結(jié)果通過Chromas軟件查看峰圖結(jié)果。注意檢查序列中是否有雙峰現(xiàn)

【參考文獻(xiàn)】：
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[3]團(tuán)頭魴Toll樣受體基因序列分析及其表達(dá)研究[D]. 賴瑞芳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
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本文編號：3368902