非生物環(huán)境脅迫,如低溫、高鹽等,會嚴(yán)重危害植物生長發(fā)育,降低作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。近年來,與此脅迫相關(guān)的大量MYB基因被克隆及功能鑒定,但在蘋果上相應(yīng)的研究還很少。我國是蘋果生產(chǎn)和育種大國,蘋果砧木與品種的遺傳改良以及抗逆新品種的培育顯得尤為重要。在蘋果遺傳轉(zhuǎn)化方面,雖有遺傳轉(zhuǎn)化體系應(yīng)用的大量報道,但轉(zhuǎn)化效率普遍較低。高再生頻率是高遺傳轉(zhuǎn)化的前提,而蘋果離體再生頻率高低很大程度上依賴于試材基因型。本試驗在前人對153份蘋果種質(zhì)資源再生能力比較研究的基礎(chǔ)上,對已篩選出的高再生材料新疆野蘋果31進(jìn)行系統(tǒng)研究,建立了離體再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系,為后續(xù)蘋果轉(zhuǎn)基因研究及基因功能鑒定提供參考。本研究探討了影響新疆野蘋果31離體再生及遺傳轉(zhuǎn)化的條件,結(jié)果表明,當(dāng)葉片正面接觸培養(yǎng)基、暗培養(yǎng)14天時,再生頻率達(dá)到最高;6-BA 1.0 mg·L-1與NAA0.1 mg·L-1為繼代增殖培養(yǎng)基的最佳激素配比;組培苗在附加1.0 mg·L-1IBA的1/2 MS培養(yǎng)基上生根效果較佳。外植體在OD600=0.5菌液中浸染5 min,共培養(yǎng)2 d,在附加300 mg/L Cef的再生培養(yǎng)基上延遲培養(yǎng)2-4 d后,在附加... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１?ｐＧＢＫＴ７－ＭｄＭＹＢ４／４４表達(dá)載體構(gòu)建流程圖??Ｆ＾ｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｖｅｔｏｒ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐＧＢＫＴ７－ＭｄＭＹＢ４／４４??２．２．６醇母雜交試驗??

中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博上學(xué)位論文?紐果Ｉ?ｊ分析??表３－３放置方式對蘋果葉片離體再生的影響??Ｔａｂｌｅ?３－３?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ｏｎ?ａｐｐｌｅ＇ｓ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ??葉片放腎方乂?ｉｉｊ：生頻率／％?ｆ均ｗ生芽數(shù)／個??葉巧面接觸巧養(yǎng)接?７８．３３±４．４ｌｂ?２．６９±０．０７ｂ??葉巿曲接觸巧養(yǎng)端?９６．６７±Ｉ．６７ａ?９．５６±１．４１ａ??注：哀中數(shù)字為平均ｆｆｔ噸；準(zhǔn)巧（ｎ＝３）；?Ｉ中－列中的字間：代巧Ｐ＜０．０５水平的祖巧性。??Ｎｏｔｅ：?Ｖａｌｕｅｓ?ａｎｄ?ｅｒｒｏｒ?ｂａｒｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｍｅａｎｓ?±?ＳＥ?（ｎ?＝?３）；?Ｔｈｅ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ｃｏｌｕｍｎ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｔｈｅ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ?ａｔ?Ｐ＜０．０５．??

?３??ＯｍｔｕＩ化ｉｃ?ｔｉｍｃ（ｄ）??圖３－４共培養(yǎng)時間對蘋果遺傳轉(zhuǎn)化的影晌??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４?Ｔｈｅ?ｃｉ＇ｌｃｃｌ?〇ｒｃｏ－ｃｕｌｌｕｒｃ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ａｐｐｌｅ?ｇｃｉｉｃｌｉｃ?ｌｒａｎｓｒ〇ｒｎｉａｔｉｏｎ??３．２．２．３延遲培養(yǎng)天數(shù)對轉(zhuǎn)化效率的巧響??不Ｋｉ）站遲巧養(yǎng)乂數(shù)知化化效率的圾響。郵究衣明，延也化養(yǎng)２、３、４ｄ時ＧＵＳ染色效率顯巧??鳥ｒｉｄ?（兇３－５）。鮑將化化巧養(yǎng)的增加，ＧＵＳ瞬Ｍ染色效率逐漸提商，化染色而積增加染??色加深（如閣Ｓ５所�。氵t巧養(yǎng)４?ｄ時，ＧＵＳ染色效率Ｗ達(dá)１００％，網(wǎng)此確立最住延遲培養(yǎng)大??數(shù)為２－４?ｄ。??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]小金海棠轉(zhuǎn)錄因子MxFIT、MxIRO2的克隆及其與啟動子關(guān)系的研究[D]. 殷麗麗.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子家族的生物信息學(xué)分析及MdMYB121和MdSIMYB1在非生物脅迫響應(yīng)中的作用[D]. 曹忠慧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]幾種無融合蘋果砧木離體再生及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[D]. 吳瑞剛.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]平邑甜茶MhCDPK基因克隆、表達(dá)、載體構(gòu)建及其再生體系的建立[D]. 韓小嬌.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[4]蘋果（Malus domestica Borkh）遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及ipt基因的導(dǎo)入[D]. 秦玲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2002



本文編號：3335371