一氧化氮（nitric oxide,NO）是介導(dǎo)植物生長(zhǎng)發(fā)育、次生代謝物調(diào)控和抗逆等方面的關(guān)鍵信號(hào)分子。蛋白質(zhì)巰基亞硝基化是NO發(fā)揮其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用的重要途徑。本實(shí)驗(yàn)室前期發(fā)現(xiàn),NO及其蛋白質(zhì)巰基亞硝基化促進(jìn)了白樺懸浮細(xì)胞中白樺酯醇等三萜物質(zhì)的累積。NO、蛋白質(zhì)巰基亞硝基化和白樺酯醇等次生代謝物均是植物適應(yīng)不良環(huán)境的作用因子,三者間的關(guān)系如何,特別是NO和蛋白質(zhì)巰基亞硝基化促進(jìn)產(chǎn)生的白樺酯醇等三萜物質(zhì)是否反過(guò)來(lái)影響白樺懸浮細(xì)胞生長(zhǎng)和NO代謝還未見(jiàn)報(bào)道。另外,蛋白質(zhì)巰基亞硝基化促進(jìn)白樺酯醇等三萜物質(zhì)累積的靶蛋白還未明確。因此,本論文在查閱文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上,以產(chǎn)白樺酯醇等三萜物質(zhì)的白樺懸浮細(xì)胞和白樺組培幼苗為試材,分析外源添加白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞生長(zhǎng)和NO代謝的影響;利用三代全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)和報(bào)道的樺木屬基因組數(shù)據(jù)鑒定白樺bZIP基因家族,篩選響應(yīng)NO的白樺bZIP基因;在此基礎(chǔ)上,通過(guò)相關(guān)性分析進(jìn)一步篩選與白樺酯醇等三萜物質(zhì)相關(guān)的bZIP基因。主要結(jié)果如下:1、外源白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞生長(zhǎng)和NO代謝的影響將0.1μmol/L～5μmol/L白樺酯醇分別添加到培養(yǎng)7d的白樺懸浮細(xì)胞體系中處理1... 

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圖３－２白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞細(xì)胞活力的影響??

?東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文???和?１６５．７０％。??２．〇ｉ?＾?ＣＫ??ｉ?０．１?ｐＭ?ａ?ａ?ａ??０．５ｍＭ?ａ?ａ?ｔ?ｆ?Ｉ????１?ｐＭ?ｒｉｂ?－?ｈ?Ｍ??Ｌ５－?ＥＳＩ?５｜ｊＭ?ｇ??１２ｈ?７ｄ?１４ｄ??處理時(shí)間??圖３－２白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞細(xì)胞活力的影響??３．１．１．３白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞生長(zhǎng)量的影響??如圖３－３所不，將０．１｜ｉｍｏｌ／Ｌ、０．５［ｉｍｏｌ／Ｌ、ｌｕｍｏｌ／Ｌ和５ｊｉｍｏｌ／Ｌ的白樺醋醇分別添加??到白樺懸浮體系中處理１２ｈ、７ｄ和１４ｄ后，各組內(nèi)處理間及處理與對(duì)照間白樺懸浮細(xì)胞??鮮重?zé)o顯著差異。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加細(xì)胞鮮重整體呈增加趨勢(shì)，并在處理１４ｄ時(shí)達(dá)最??大值。其中，處理７ｄ比處理１２ｈ的細(xì)胞鮮重平均提高了?９１．８４％，處理１４ｄ比處理１２ｈ??的細(xì)胞鮮重平均提高了?２８３．３°／〇。??５〇ｎ?■■?ＣＫ??－：ｉ?０．１?ｍＭ??？Ｉ?０．５｜ｊＭ?ａ?ａ??：隨：?Ｉ，?ＩＩ?Ｔ??Ｉ?Ｉ?；ｌ??ｙｎＵ??１２ｈ?７ｄ?１４ｄ??處理時(shí)間??圖３－３白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞鮮重的影響??－１６－??

?３結(jié)果與分析???３．１．１．４白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液ｐＨ和電導(dǎo)率的影響??如圖３－４所示，將Ｏ．ｌｎ＿ｍｏｌ／Ｌ、Ｏ．５ｐｍｏｌ／Ｌ、ｌ＾ｉｍｏｌ／Ｌ和５ｐ＿ｍｏｌ／Ｌ的白樺酷醇分別添加??到培養(yǎng)７ｄ的白樺懸浮培養(yǎng)體系中處理１２ｈ、７ｄ和１４ｄ后，白樺懸浮培養(yǎng)液的ｐＨ值隨著??培養(yǎng)時(shí)間的增加整體呈升高趨勢(shì)。其中處理７ｄ后的培養(yǎng)液ｐＨ值比處理１２ｈ平均提高了??８．４５％，處理１４ｄ后的培養(yǎng)液ｐＨ值比處理１２ｈ平均提高了?２０．９２％；而各組內(nèi)處理間及處??理與對(duì)照間培養(yǎng)液的ｐＨ無(wú)顯著差異。??如圖３－５所示，不同濃度的白樺酯醇分別添加到白樺懸浮培養(yǎng)體系中處理１２ｈ、７ｄ??和１４ｄ后，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加白樺懸浮培養(yǎng)液的電導(dǎo)率整體呈降低趨勢(shì)，其中處理７ｄ??后的電導(dǎo)率比處理１２ｈ平均降低了?１１６７％，處理１４ｄ后的電導(dǎo)率比處理１２ｈ平均降低了??１８．８５％。而各組內(nèi)處理間及處理與對(duì)照間培養(yǎng)液的電導(dǎo)率無(wú)顯著差異。??１〇－｜?ｃｋ??０．１ｐＭ??■■Ｉ?０．５ｍＭ??８－?＿＿?ａ?ａ?ａ?ａ?ａ??ｍｌ??１２ｈ?７ｄ?１４ｄ??處理時(shí)間??圖３－４白樺酯醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液ｐＨ的影響??６〇ｃｋ??０．１?ｐＭ??ＭＳ?０．５ｍＭ??１ｐＭ??ｌｉｉｌｉｉｌ??１２ｈ?７ｄ?１４ｄ??處理時(shí)間??圖３－５白樺酷醇對(duì)白樺懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液電導(dǎo)率的影響??－１７－??

【參考文獻(xiàn)】：
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