目的紅細胞是哺乳動物體內含量最多的造血細胞。紅細胞的形成過程起始于造血干細胞定向增殖分化形成紅系祖細胞,接著進入到紅系終末分化階段,經(jīng)數(shù)次有絲分裂依次分化為原幼紅細胞、早幼紅細胞、中幼紅細胞和晚幼紅細胞,隨后晚幼紅細胞會脫核形成網(wǎng)織紅細胞,最后發(fā)育分化為成熟的紅細胞。伴隨著這個紅系發(fā)育過程會發(fā)生細胞凋亡的現(xiàn)象,被稱為eryptosis。有研究表明,在病理性和生理性條件下,細胞凋亡的發(fā)生都對成熟紅細胞的產(chǎn)生有一定的作用。而凋亡基因RTN3是介導真核細胞三大凋亡通路的關鍵基因,通過對RTN3的研究,初步探索其在紅系發(fā)育過程中的作用。方法為了研究RTN3在紅系發(fā)育過程中的功能影響,我們首先構建RTN3敲低和過表達載體,通過慢病毒轉導的方法分別得到RTN3敲低和過表達的K562和HEL細胞,從RNA水平和蛋白水平分別驗證了RTN3的表達情況。其次用氯化高鐵血紅素誘導RTN3敲低型和過表達型的K562和HEL細胞向紅系分化,與對照組相比,檢測RTN3敲低和過表達對細胞增殖、分化和凋亡的改變。最后利用臍帶血CD34⁺細胞進行體外定向紅系分化的探究,以慢病毒轉導的方法敲低和過表... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

紅細胞的正常發(fā)育過程(引自文獻[13]

圖 1.2 哺乳動物細胞動物三條凋亡通路(引自文獻[41]).2.3.1 線粒體通路細胞合成 ATP 的主要場所是線粒體，它也被稱為能量工廠。細胞程中的多個生物學事件都和線粒體這個細胞器存在一定的關系[42-44]

提前配制好 0.8%的瓊脂糖膠，PCR 和酶切分別結束之后，開始跑凝膠電泳，120V，25min； 跑膠完成用照膠儀進行曝光得到跑膠圖 2.2A 和 2.2B，在紫外光下切相應的條帶并按膠回收試劑盒說明書完成膠回收，最終得到酶切的線性過表達載體和 PCR 膠回收產(chǎn)物；

【參考文獻】：
期刊論文
[1]紅細胞衰老及程序性死亡機制[J]. 王瑜,劉興順.  中國實驗血液學雜志. 2014(04)
[2]細胞凋亡途徑及其機制[J]. 李敏,林俊.  國際婦產(chǎn)科學雜志. 2014(02)
[3]JNK信號通路介導的凋亡在疾病中的作用[J]. 侯炳旭,馮麗英.  世界華人消化雜志. 2011(17)
[4]基于內質網(wǎng)應激途徑的細胞保護策略的研究進展[J]. 劉春蕾,何昆侖,王莉莉.  中國藥理學通報. 2011(04)
[5]CHOP在內質網(wǎng)應激介導凋亡中的作用[J]. 李劍,羅子國.  檢驗醫(yī)學與臨床. 2011(02)
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[7]失巢凋亡在As斑塊破裂中的作用及機制[J]. 劉娜,劉俊田.  中國藥理學通報. 2007(03)
[8]Fas系統(tǒng)在冠心病和慢性心力衰竭中的變化及意義[J]. 胡司淦,蔡鑫.  蚌埠醫(yī)學院學報. 2006(04)
[9]細胞凋亡及其生理與病理學意義[J]. 劉純杰.  動物醫(yī)學進展. 1997(04)

碩士論文
[1]內質網(wǎng)蛋白3參與自噬并影響膽固醇流出機制初探[D]. 梁龍.中南大學 2014



本文編號：3320522