發(fā)布時(shí)間：2021-08-01 23:40

　　配子母細(xì)胞特異因子1（Gtsf1）屬UPF0224蛋白家族,含一個(gè)保守的CHHC鋅指結(jié)構(gòu)域,對(duì)生殖細(xì)胞的發(fā)育至關(guān)重要.小鼠（Mus musculus）和果蠅（Drosophila melanogaster）中Gtsf1的缺失分別導(dǎo)致雄性和雌性不育,高不育風(fēng)險(xiǎn)（HIR）隱睪癥患者的睪丸中GTSF1的mRNA和蛋白表達(dá)均顯著下調(diào),但gtsf1在精子發(fā)生中的功能機(jī)制尚不完全清楚.利用類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶（TALEN）技術(shù),首次在斑馬魚(yú)（Danio rerio）中成功制備了gtsf1突變體.觀察發(fā)現(xiàn),突變體的生長(zhǎng)、表型正常,但gtsf1純合突變體（gtsf1-/-）成魚(yú)全為雄性.進(jìn)一步的組織學(xué)觀察表明,gtsf1-/-成魚(yú)精巢中初級(jí)精母細(xì)胞數(shù)量基本正常,次級(jí)精母細(xì)胞顯著減少,精細(xì)管管腔中精子極少或缺失.提示gtsf1在脊椎動(dòng)物的精子發(fā)生過(guò)程中有保守的作用.本研究為闡明gtsf1在精子發(fā)育中的作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ). 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2016,46(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

斑馬伯以.力-TA,.RN左右臂及靶價(jià)點(diǎn)示煮圖

4C所示.2.5斑馬魚(yú)gtsf1/性腺中g(shù)tsf1mRNA基本不表達(dá)為了證實(shí)TALEN敲除后純合突變體的gtsf1的功能缺失,用原位雜交的方法對(duì)WT和gtsf1/精巢中g(shù)tsf1基因在mRNA表達(dá)水平進(jìn)行了驗(yàn)證,結(jié)果如圖5所示,WT精巢中g(shù)tsf1在精原細(xì)胞,初級(jí)精母細(xì)胞和次級(jí)精母細(xì)胞中有較高的表達(dá),而在gtsf1/精巢中g(shù)tsf1基本不表達(dá),因此,gtsf1功能已缺失.2.6斑馬魚(yú)gtsf1/的表型和育性觀察發(fā)現(xiàn),篩選出的gtsf1/與WT及gtsf1/相比生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差異,表型也似正常(圖6),然而gtsf1/成魚(yú)全部為雄性,且gtsf1/的數(shù)量多于預(yù)期圖2Gtsf1蛋白CHHC鋅指結(jié)構(gòu)域在部分物種中的同源性分析斑馬魚(yú)與人類、家鼠、原雞、美洲鱷和非洲爪蛙Gtsf1蛋白CHHC鋅指結(jié)構(gòu)域的同源性比對(duì).可見(jiàn)斑馬魚(yú)與上述物種的CHHC鋅指結(jié)構(gòu)域具有較高的同源性,斑馬魚(yú)與它們的序列相似度分別為68.9%,67.2%,63.9%,62.3%,62.3%.氨基酸顏色的深淺根據(jù)同源型高低由軟件GeneDoc做出:黑色(100%相同)、灰色(80%相同)、淺灰色(60%相同).顯示gtsf1基因進(jìn)化保守性

刁奄瓦也.‘力聳田魏路睛翻的百待翻右圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TALEN構(gòu)建與斑馬魚(yú)基因組定點(diǎn)突變的實(shí)驗(yàn)方法與流程[J]. 沈延,黃鵬,張博.  遺傳. 2013(04)
[2]類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶（TALEN）介導(dǎo)的基因組定點(diǎn)修飾技術(shù)[J]. 沈延,肖安,黃鵬,王唯曄,朱作言,張博.  遺傳. 2013(04)
[3]Efficient and Specific Modifications of the Drosophila Genome by Means of an Easy TALEN Strategy[J]. Jiyong Liu~a,Changqing Li~a,Zhongsheng Yu~a,Peng Huang~b,Honggang Wu~a,Chuanxian Wei~a, Nannan Zhu~a,Yan Shen~b,Yixu Chen~a,Bo Zhang~b,Wu-Min Deng~(c,*),Renjie Jiao~(a,*) a State Key Laboratory of Brain and Cognitive Science,Institute of Biophysics,The Chinese Academy of Sciences,Datun Road 15,Beijing 100101,China b Key Laboratory of Cell Proliferation and Differentiation of Ministry of Education,College of Life Sciences,Peking University,Beijing 100871,China c Department of Biological Science,Florida State University,Tallahassee,Florida 32304-4295,USA.  遺傳學(xué)報(bào). 2012(05)



本文編號(hào)：3316454