目的觀察組蛋白乙酰化/去乙�；Ш鈱�(duì)胎鼠心臟的致畸作用及對(duì)H9C2心肌細(xì)胞平面細(xì)胞極性（PCP）途徑關(guān)鍵基因Vangl2、Scrib、Rac1表達(dá)的影響。方法將40只C57/B6孕小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組（n=10）、溶劑對(duì)照組（n=10）和丙戊酸（VPA）組（n=20）;應(yīng)用組蛋白去乙�；福℉DAC）抑制劑VPA單次劑量700 mg/kg腹腔注射妊娠第10.5天（E10.5 d）VPA組孕鼠,溶劑對(duì)照組孕鼠腹腔注射等量生理鹽水,空白對(duì)照組不做任何處理。于E15.5 d處死孕鼠,統(tǒng)計(jì)死胎率;取活胎鼠心臟行蘇木精-伊紅（HE）染色,觀察VPA對(duì)胎鼠心臟的致畸作用。培養(yǎng)H9C2心肌細(xì)胞并將其分為空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組和VPA組,VPA組以不同濃度（2.0、4.0、8.0 mmol/L）作用于H9C2心肌細(xì)胞,溶劑對(duì)照組加入等量生理鹽水,空白對(duì)照組不進(jìn)行任何處理。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)HDAC1³及Vangl2、Scrib、Rac1基因在VPA干預(yù)后24、48、72 h mRNA及其蛋白表達(dá)水平;比色法測(cè)定總HDAC活性變化。結(jié)果 VPA組胎鼠... 

【文章來源】：中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2017,19(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

VPA致胎鼠心臟發(fā)育異常（蘇木精-伊紅染色）[LA]左心房；RA[右心房]；[LV]左心室；[RV]右心室；[IVS]室間隔；[VSD]室間隔缺損；[AO]主動(dòng)脈；[PA]肺動(dòng)脈；[TV]三尖瓣；[MV]二尖瓣

第19卷第4期2017年4月中國(guó)當(dāng)代兒科雜志ChinJContempPediatrVol.19No.4Apr.2017·480·1.51.00.501.51.00.502.01.51.00.50圖2各組HDACsmRNA及蛋白表達(dá)水平比較（n=3）A~C：VPA干預(yù)對(duì)HDAC1mRNA及蛋白水平的影響；D~F：VPA干預(yù)對(duì)HDAC2mRNA及蛋白水平的影響；G~I：VPA干預(yù)對(duì)HDAC3mRNA及蛋白水平的影響。a示與空白及溶劑對(duì)照組比較，P<0.05。2.3VPA對(duì)H9C2細(xì)胞PCP關(guān)鍵分子mRNA及蛋白表達(dá)水平的影響與空白及溶劑對(duì)照組相比，Vangl2及ScribmRNA表達(dá)水平于不同濃度VPA干預(yù)后48h及72h均顯著下降（P<0.05）；Vangl2蛋白表達(dá)水平于干預(yù)后72h顯著下降（P<0.05）；Scrib蛋白表達(dá)水平于干預(yù)后48h及72h均顯著下調(diào)（P<0.05）。Rac1mRNA及蛋白表達(dá)水平與空白及溶劑對(duì)照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。不同濃度VPA干預(yù)組間，于各時(shí)間點(diǎn)分別比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見圖3。2.4VPA對(duì)H9C2細(xì)胞總HDAC活性的影響與空白及溶劑對(duì)照組比較，VPA4.0、8.0mmol/L干預(yù)后24h，總HDAC活性顯著降低（P<0.05），而2.0mmol/LVPA干預(yù)組較空白及溶劑對(duì)照組總HDAC活性無顯著變化（P>0.05）；干預(yù)后48h及72h，3個(gè)劑量VPA干預(yù)組總HDAC活性均顯著低于空白及溶劑對(duì)照組（P<0.05）。不同濃度VPA干預(yù)組間，于各時(shí)間點(diǎn)分別比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見圖4。ABCEFGHID8.06.04.02.002.01.51.00.508.06.04.02.00/DAC1HGAPDHRNAm/DAC2HGAPDHRNAm/DAC3HGAPDHRNAm/DAC1HGAPDH/DAC2HGAPDH/DAC3HGAPDHaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa24h48h72h24h48h72h24h48h72h24h48h72h24h

第19卷第4期2017年4月中國(guó)當(dāng)代兒科雜志ChinJContempPediatrVol.19No.4Apr.2017·481·3討論胚胎心臟正常發(fā)育需要眾多基因在不同時(shí)間和空間順次精確表達(dá)，如果這些關(guān)鍵基因表達(dá)圖3各組PCP關(guān)鍵分子mRNA及蛋白表達(dá)水平比較（n=3）A~C：VPA干預(yù)對(duì)Vangl2mRNA及蛋白水平的影響；D~F：VPA干預(yù)對(duì)ScribmRNA及蛋白水平的影響；G~I：VPA干預(yù)對(duì)Rac1mRNA及蛋白水平的影響。a示與空白及溶劑對(duì)照組比較，P<0.05。圖4各組總HDAC活性比較（n=3）a示與空白及溶劑對(duì)照組比較，P<0.05。異常，將不同程度干擾胚胎心臟的分子調(diào)控程序化進(jìn)程，最終導(dǎo)致CHD的發(fā)生。PCP途徑中的Vangl2、Scrib及Rac1是與心臟早期發(fā)育密切相關(guān)的3種關(guān)鍵蛋白，其表達(dá)缺失將干擾“心肌化”過程，引起心臟發(fā)育異常：Vangl2參與心室肌與流出道的發(fā)育，基因突變致胎鼠心肌細(xì)胞分化異常，不能伸出板狀和絲狀偽足，細(xì)胞極化、遷移受抑制[8]；Scrib與心肌細(xì)胞間黏附有關(guān)，表達(dá)缺失可致心臟袢化異常、VSD、心室壁變薄及心肌致密化不全[9]；Rac1缺失可導(dǎo)致心肌細(xì)胞變?yōu)榍蛐�、心室小梁化異常、�?xì)胞凋亡增加[10]。因此，進(jìn)一步研究PCP關(guān)鍵分子的表達(dá)及調(diào)控，成為CHD病因探討中的關(guān)鍵問題。近年研究顯示，表觀遺傳學(xué)修飾調(diào)控著不同環(huán)境下基因的表達(dá)模式，是外界環(huán)境改變致疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制。表觀遺傳學(xué)修飾所致的ABCEFGHID2.01.51.00.508.06.04.02.002.01.51.00.501.51.00.501.00.80.60.40.200.80.60.40.201.51.00.50/ang12VGAPDHRNAm/cribSGAPDHRNAmGac1/RAPDHRNAmDACH性活[μol/（Lm·μg白）蛋]ac1/GAPRHD/cribSGAPDH/ang12VGAPDHaaa

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]組蛋白乙�；�/去乙�；Ш鈱�(duì)C2C12肌原細(xì)胞成肌分化的影響[J]. 李一飛,華益民,方婕,王川,詹雅蘭,朱琦,母得志,周開宇.  中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志(電子版). 2014(05)
[2]HDACs,histone deacetylation and gene transcription: from molecular biology to cancer therapeutics[J]. PaolaGallinari,StefaniaDiMarco,PhillipJones,MichelePallaoro,ChristianSteinkühler.  Cell Research. 2007(03)



本文編號(hào)：3311566