乳腺癌一直以來都是危害女性身體和心理健康甚至危及生命的一種疾病。乳腺癌細胞系根據細胞表面受體的表達量不同而被分為許多亞型,例如Luminal,HER2和三陰性等等,其中三陰性乳腺癌是惡性程度最高的一類。三陰性乳腺癌因為缺乏相關靶向分子藥物而導致該疾病的治愈率低,臨床預后較差,所以開發(fā)一種新型治療方法對三陰性乳腺癌的治療具有重要意義。低溫常壓等離子體是大氣輝光放電的一種等離子體源,近年來因為其在生物醫(yī)學領域的應用而被越來越多的人關注。經研究,低溫常壓等離子體會使細胞中基因表達和信號通路發(fā)生復雜的改變,并且其對癌細胞具有良好的殺傷作用,但是它的治療機理至今并沒有被完整的闡述。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)低溫常壓等離子體可以特異性的抑制三陰性乳腺癌細胞的活性而不改變其他亞型的細胞活性,并結合轉錄組數據分析發(fā)現(xiàn),與其他亞型細胞系相比,經過等離子體處理的三陰性乳腺癌細胞系中,腫瘤干性相關的基因mi RNA-146b-5p與FA2H的表達量有著顯著差異,根據這一現(xiàn)象及分析結果,本文將進一步研究低溫常壓等離子體治療三陰性乳腺癌的相關機理。在本研究中,我們選用三陰性乳腺癌細胞SUM149PT作為研究對象,通過... 

【文章來源】：江南大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

低溫常壓等離子體裝置

胱猶宕?硨蟮謀澩锪勘浠??3.1.1miRNA-146b-5p的轉錄組數據驗證對實驗室前期得到的miRNA-146b-5p基因進行表達量的驗證，圖3-1（a）為該非編碼RNA在轉錄組學實驗中得出的數據，發(fā)現(xiàn)其在三陰性乳腺癌SUM149PT細胞中會受低溫常壓等離子體處理的影響而發(fā)生表達量的升高，但是卻在非三陰性乳腺癌MCF7細胞中不受低溫常壓等離子體處理的影響；圖3-1（b）為利用qRT-PCR實驗驗證該非編碼RNA的表達量變化，結果與轉錄組數據一致，所以我們認為miRNA-146b-5p基因極有可能是低溫常壓等離子體選擇性抑制三陰性乳腺癌活性的關鍵基因。圖3-1miRNA-146b-5p基因mRNA水平相對表達(a)miRNA-146b-5p基因轉錄數據；(b)miRNA-146b-5p基因相對mRNA表達。Fig.3-1ThemRNAexpressionprofileofmiRNA-146b-5p(***P＜0.001)(a)ThetranscriptiondataofmiRNA-146b-5p,(b)themRNAexpressionprofileofmiRNA-146b-5p.3.1.2FA2H的轉錄組數據驗證對實驗室前期得到的FA2H基因進行表達量的驗證，圖3-2（a）為該基因在轉錄組學實驗中得出的數據，發(fā)現(xiàn)其在三陰性乳腺癌SUM149PT細胞中會受低溫常壓等離子體處理的影響而發(fā)生表達量的升高，但是卻在非三陰性乳腺癌MCF7細胞中不受低溫常壓等離子體處理的影響；圖3-1（b）為利用qRT-PCR實驗驗證該基因的表達量變化，結果與轉錄組數據一致，所以我們認為FA2H基因極有可能是低溫常壓等離子體選擇性抑制三陰性乳腺癌活性的關鍵基因。

第三章結果與討論19圖3-2FA2H基因mRNA水平相對表達(a)FA2H基因轉錄數據；(b)FA2H基因相對mRNA表達。Fig.3-2ThemRNAexpressionprofileofFA2H(***P＜0.001)(a)ThetranscriptiondataofmiRNA-146b-5p,(b)themRNAexpressionprofileofFA2H.3.1.3小結根據實驗結果發(fā)現(xiàn)，miRNA-146b-5p和FA2H基因的表達量在三陰性乳腺癌細胞中受到低溫常壓等離子體的調控，而在非三陰性乳腺癌細胞中不受影響，并且這兩個基因同時可以影響下游的干性相關基因表達量的變化，所以我們認為miRNA-146b-5p和FA2H基因極有可能是低溫常壓等離子體影響腫瘤干性并特異性殺傷三陰性乳腺癌細胞的關鍵基因。故在接下來的實驗中，我們選取一株三陰性乳腺癌細胞SUM149PT進一步研究這兩個基因在低溫常壓等離子體處理后所發(fā)生的功能性變化。3.2miRNA-146b-5p的功能研究三陰性乳腺癌是惡性程度最高的乳腺癌，因其缺乏靶向治療而成為難治之癥。在本課題組之前的研究中發(fā)現(xiàn)，低溫常壓等離子體可以特異性殺傷三陰性乳腺癌而不影響其他亞型乳腺癌細胞和正常乳腺細胞，同時我們猜想這種情況似乎和細胞干性有著千絲萬縷的聯(lián)系，而腫瘤干細胞的干性往往又會影響細胞的表型�，F(xiàn)有文獻指出miRNA-146b-5p可以靶向調控IL-6基因[84]，IL-6基因又影響著細胞的干性[85]，這也為我們的猜想提供了強有力的支撐。在本節(jié)研究中，我們會通過在三陰性乳腺癌SUM149PT細胞中過表達和敲降miRNA-146b-5p的實驗方法研究該miRNA與乳腺癌細胞增殖、遷移、凋亡和干性的關系，進而證實該miRNA是否是低溫常壓等離子體影響細胞表型和細胞干性的關鍵因素。3.2.1miRNA-146b-5p在SUM149PT細胞中的過表達和敲降以三陰性乳腺癌細胞SUM149PT為研究對象，利用細胞轉染技術將miRNAmimic和miRNAinhibitor轉染進細胞從而達到?

【參考文獻】：
期刊論文
[1]低溫常壓等離子技術在腫瘤學中的應用[J]. 戚贏,俞夢婕,侯中宇,姚瑜.  中國生物醫(yī)學工程學報. 2019(04)
[2]Glucocorticoid receptor regulates expression of microRNA-22 and downstream signaling pathway in apoptosis of pancreatic acinar cells[J]. Qiang Fu,Chuan-Jiang Liu,Xu Zhang,Zhen-Sheng Zhai,Yu-Zhu Wang,Ming-Xing Hu,Xian-Ling Xu,Hong-Wei Zhang,Tao Qin.  World Journal of Gastroenterology. 2018(45)
[3]阿伐他汀聯(lián)合貝那普利治療早期糖尿病腎病臨床觀察[J]. 武貴群,高翔,梅長林.  中國中西醫(yī)結合腎病雜志. 2013(02)
[4]乳腺癌干細胞研究進展[J]. 白敬超,張瑾.  中國全科醫(yī)學. 2012(35)

博士論文
[1]Wnt/β-catenin信號通路介導的MiRNA-146b-5p對甲狀腺乳頭狀癌細胞侵襲遷移影響的研究[D]. 劉洋.鄭州大學 2017

碩士論文
[1]FA2H作為乳腺癌的治療靶點及預后因子的研究[D]. 趙榮昌.蘇州大學 2019
[2]低溫常壓等離子體對不同亞型乳腺癌細胞的影響及機理研究[D]. 項良劍.江南大學 2018



本文編號：3305227