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擬南芥CtBP/BARs增強(qiáng)子的篩選與基因克隆

發(fā)布時(shí)間:2021-07-16 13:02
  細(xì)胞是構(gòu)成器官形態(tài)的基本單位,植物器官的形成需要經(jīng)過(guò)細(xì)胞增殖、組織分化等過(guò)程。擬南芥花瓣具有調(diào)節(jié)授粉和光反射等功能,在生殖器官中扮演著重要的角色,然而相對(duì)根、下胚軸和子葉來(lái)說(shuō),花瓣形態(tài)建成的機(jī)制研究極為少見(jiàn)。擬南芥ANGUSTIFOLIA(AN)是與哺乳動(dòng)物中C-末端結(jié)合蛋白/蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑A-ADP核糖基化底物(CtBP/BARs)同源的蛋白,同時(shí)AN的工作機(jī)制目前尚不清晰。擬南芥中AN的突變體an-2,具有子葉變厚、變窄,毛狀體分枝減少,根螺旋生長(zhǎng)等性狀。但至今,對(duì)于AN怎么去調(diào)控花瓣的形態(tài)建成尚不清楚。本研究利用甲基磺酸乙酯(EMS)對(duì)的種子進(jìn)行誘變,篩選獲得突變體ocean1/an-2(OCEAN1,Organ Control Enhancer of an-2),并分離得到單突變體ocean1。相對(duì)野生型Col-0,ocean1子葉變窄且有卷曲,花瓣變得狹長(zhǎng)。ocean1/an-2進(jìn)一步增強(qiáng)了an-2的表型,子葉和花瓣都變得更加窄長(zhǎng)、肥厚。細(xì)胞水平上,Col-0和ocean1子葉表皮鋪板細(xì)胞之間具有明顯的鋸齒嵌合結(jié)構(gòu),an-2子葉表皮鋪板細(xì)胞邊緣鋸齒狀明顯減少。相對(duì)單突變體oc... 

【文章來(lái)源】:福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】:78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

擬南芥CtBP/BARs增強(qiáng)子的篩選與基因克隆


擬南芥花瓣[2]

示意圖,圖位克隆,過(guò)程,示意圖


圖 1-5 圖位克隆過(guò)程示意圖[76]Figure 1-5 Schematic of the map-based cloning process[76].1.4 本課題的研究?jī)?nèi)容和擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題1.4.1 研究?jī)?nèi)容(1) ANGUSTIFOLIA 功能缺失突變體的化學(xué)誘變(甲基磺酸乙酯 EMS 誘變);(2) 花瓣發(fā)育增強(qiáng)子篩選及表型分析;(3) 候選增強(qiáng)子基因的圖位克。唬4) 在分子生物學(xué)水平上確定突變位點(diǎn)的真實(shí)性并構(gòu)建載體進(jìn)行互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)。1.4.2 擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題

參數(shù)統(tǒng)計(jì),表型,擬南芥,子葉


三 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析析圖。分析發(fā)現(xiàn)野生型 Col-0 子葉較為圓潤(rùn);an-2 突變體子葉變厚,較為狹長(zhǎng);ocean1/an-2 增強(qiáng)了 an-2 的表型,子葉長(zhǎng)寬相對(duì)于 an-2 都具有顯著差異,變得更長(zhǎng)更窄;而去除掉 an-2 背景的單突變體 ocean1,子葉長(zhǎng)度和寬度都有所恢復(fù),但是子葉末端微微向下卷曲。其中野生型 Col-0 子葉各向同性生長(zhǎng)。突變體 an-2、ocean1、ocean1/an-2 子葉的生長(zhǎng)存在各向異性。根據(jù)以上表型,推測(cè) OCEAN1和 AN 可能具有共同調(diào)節(jié)子葉形態(tài)的作用。


本文編號(hào):3287063

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