目的觀察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝臟中Toll樣受體4（TLR4）基因的表達(dá)及其甲基化水平的變化,并探討兩者在NASH發(fā)病中的相關(guān)性。方法將20只大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組與模型組,每組10只。正常組與模型組大鼠分別飼喂普通飼料和高脂高糖飼料,于24周后處死。測(cè)量大鼠體質(zhì)量及肝質(zhì)量,并取各組大鼠血清及肝臟組織,于低溫保存。通過病理染色觀察肝細(xì)胞的形態(tài)變化、脂肪變性及炎性細(xì)胞浸潤程度。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、三酰甘油（TG）及總膽固醇（TC）水平;采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)肝臟CD68蛋白的表達(dá);采用蛋白免疫印跡法檢測(cè)肝臟TLR4蛋白的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)肝臟TLR4基因mRNA的表達(dá);亞硫酸氫測(cè)序PCR（BSP）檢測(cè)肝臟TLR4基因甲基化水平。結(jié)果與正常組相比,模型組肝細(xì)胞體積增大,出現(xiàn)大量脂肪空泡,炎性細(xì)胞浸潤明顯;肝指數(shù)升高,血清中ALT、AST、TC及TG明顯升高（P<0.01）;CD68蛋白的表達(dá)含量明顯升高;TLR4蛋白、m RNA表達(dá)明顯升高（P<0.01）;甲基化水平... 

【文章來源】：天津醫(yī)藥. 2020,48(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

BSP擴(kuò)增引物及TLR4基因片段中CpG位點(diǎn)

肉眼觀察，正常組大鼠肝臟顏色偏深紅色，肝臟大小、形態(tài)如常，包膜光滑清晰，肝緣角較銳；實(shí)驗(yàn)24周末模型組大鼠肝臟顏色淡黃，肝臟偏大，形態(tài)飽滿，肝緣角變鈍，見圖2。顯微鏡下觀察HE染色的肝臟切片可發(fā)現(xiàn)，正常組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，呈放射狀排列。與正常組相比，模型組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)不明顯，肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴，且肝臟內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤明顯，見圖3。圖3 正常組與模型組HE染色（×100)

正常組與模型組HE染色（×100)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]逍遙散對(duì)非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虛證大鼠TLR-4/TRIF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[J]. 劉楊,李明磊,賈飛,李若瑜,關(guān)偉,劉晉芳,苗宇船.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(17)
[2]Toll-like receptors in pathophysiology of liver diseases[J]. Safak Kiziltas.  World Journal of Hepatology. 2016(32)
[3]世界胃腸病學(xué)會(huì)全球指南:非酒精性脂肪性肝病及非酒精性脂肪性肝炎[J]. 朱鵬,徐宗,王宇明.  臨床肝膽病雜志. 2014(09)
[4]2型糖尿病脂肪肝與脂代謝、胰島素抵抗的關(guān)系[J]. 宋淑萍.  天津醫(yī)藥. 2006(06)

碩士論文
[1]基于TLR4/TRIF信號(hào)通路探討逍遙散治療NASH肝郁脾虛證的機(jī)制[D]. 張冉冉.山西中醫(yī)藥大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3286108