目的觀察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝臟中Toll樣受體4（TLR4）基因的表達及其甲基化水平的變化,并探討兩者在NASH發(fā)病中的相關性。方法將20只大鼠采用隨機數(shù)字表法分為正常組與模型組,每組10只。正常組與模型組大鼠分別飼喂普通飼料和高脂高糖飼料,于24周后處死。測量大鼠體質量及肝質量,并取各組大鼠血清及肝臟組織,于低溫保存。通過病理染色觀察肝細胞的形態(tài)變化、脂肪變性及炎性細胞浸潤程度。采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測血清中丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、三酰甘油（TG）及總膽固醇（TC）水平;采用免疫組織化學染色法檢測肝臟CD68蛋白的表達;采用蛋白免疫印跡法檢測肝臟TLR4蛋白的表達;實時熒光定量PCR檢測肝臟TLR4基因mRNA的表達;亞硫酸氫測序PCR（BSP）檢測肝臟TLR4基因甲基化水平。結果與正常組相比,模型組肝細胞體積增大,出現(xiàn)大量脂肪空泡,炎性細胞浸潤明顯;肝指數(shù)升高,血清中ALT、AST、TC及TG明顯升高（P<0.01）;CD68蛋白的表達含量明顯升高;TLR4蛋白、m RNA表達明顯升高（P<0.01）;甲基化水平... 

【文章來源】：天津醫(yī)藥. 2020,48(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

BSP擴增引物及TLR4基因片段中CpG位點

肉眼觀察，正常組大鼠肝臟顏色偏深紅色，肝臟大小、形態(tài)如常，包膜光滑清晰，肝緣角較銳；實驗24周末模型組大鼠肝臟顏色淡黃，肝臟偏大，形態(tài)飽滿，肝緣角變鈍，見圖2。顯微鏡下觀察HE染色的肝臟切片可發(fā)現(xiàn)，正常組肝細胞結構完整，呈放射狀排列。與正常組相比，模型組大鼠肝臟組織結構不明顯，肝細胞內出現(xiàn)大量脂滴，且肝臟內炎性細胞浸潤明顯，見圖3。圖3 正常組與模型組HE染色（×100)

正常組與模型組HE染色（×100)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]逍遙散對非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虛證大鼠TLR-4/TRIF信號轉導通路的影響[J]. 劉楊,李明磊,賈飛,李若瑜,關偉,劉晉芳,苗宇船.  中國實驗方劑學雜志. 2018(17)
[2]Toll-like receptors in pathophysiology of liver diseases[J]. Safak Kiziltas.  World Journal of Hepatology. 2016(32)
[3]世界胃腸病學會全球指南:非酒精性脂肪性肝病及非酒精性脂肪性肝炎[J]. 朱鵬,徐宗,王宇明.  臨床肝膽病雜志. 2014(09)
[4]2型糖尿病脂肪肝與脂代謝、胰島素抵抗的關系[J]. 宋淑萍.  天津醫(yī)藥. 2006(06)

碩士論文
[1]基于TLR4/TRIF信號通路探討逍遙散治療NASH肝郁脾虛證的機制[D]. 張冉冉.山西中醫(yī)藥大學 2019



本文編號：3286108