雄性不育突變體是研究植物雄配子發(fā)育調(diào)控機(jī)制的寶貴試材。在前期研究中,本實(shí)驗(yàn)室對(duì)大白菜雄性不育甲型兩用系‘AB01’的不育株和可育株花蕾分別進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,鑒別出系列差異表達(dá)基因,其中Bra036581和Bra040503在可育株花蕾正常表達(dá),而在不育株花蕾中無(wú)表達(dá)信號(hào),暗示以上2個(gè)基因在大白菜雄蕊發(fā)育中可能行使一定的功能。本文進(jìn)一步克隆了Bra036581和Bra040503的全長(zhǎng)序列,明確其表達(dá)模式,為后期功能鑒定奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.克隆了Bra036581和Bra040503的全長(zhǎng)DNA和cDNA序列。序列研究發(fā)現(xiàn),Bra036581和Bra040503功能未知。Bra036581無(wú)內(nèi)含子,CDS全長(zhǎng)237bp,所翻譯蛋白含有78個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)為分泌蛋白,蛋白質(zhì)相對(duì)質(zhì)量8.27KD,等電點(diǎn)為7.45,信號(hào)肽酶切位點(diǎn)位于第24個(gè)氨基酸處;Bra040503同樣不包含內(nèi)含子,CDS全長(zhǎng)384bp,編碼蛋白含有128個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)為分泌蛋白,蛋白質(zhì)相對(duì)質(zhì)量14.31KD,等電點(diǎn)為9.70,信號(hào)肽酶切位點(diǎn)位于第23個(gè)氨基酸處。2.選取‘AB01’不育株和可育株的不同組織和花器官... 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Bra036581和Bra040503基因的結(jié)構(gòu)分析

圖 2-3 兩個(gè)目的基因 DNA 和 cDNA 的擴(kuò)增條帶2-3 The amplified bands of two target genes DNA and cDNADL237Marker；1-2：Bra036581 的 DNA 和 cDNA 的擴(kuò)增DL387Marker；3-4：Bra040503 的 DNA 和 cDNA 的擴(kuò)增DL387Marker；1-2：The amplified bands of DNA and cDNDL387Marker；3-4：The amplified bands of DNA and cD析質(zhì)的分析 ProtParam 軟件分析蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)得到，Br為 C341H566N96O111S15，相對(duì)分子質(zhì)量為 8.27KD6 個(gè)氨基酸 Asp 和 Glu 帶有正電荷，7 個(gè)氨基酸 A出酸性氨基酸個(gè)數(shù)少于堿性氨基酸的個(gè)數(shù)，所以穩(wěn)定系數(shù)為 80.31，脂肪系數(shù)為 58.85，親水性平不穩(wěn)定的親水蛋白。通過(guò) ProtScal（ehttps://web.e36581 蛋白的疏水性質(zhì)，由圖分析可知，組成 Bra的 56.4％，疏水氨基酸為 43.6％，疏水氨基酸區(qū)

圖 2-4 Bra036581 蛋白的親水性預(yù)測(cè)Fig. 2-4 Hydrophilic prediction of the Bra036581 protein.503 共有 128 個(gè)氨基酸組成，分子式為 C641H1074N174O189S2，相對(duì)分子論等電點(diǎn)（pI）為 9.70。該蛋白有 17 個(gè)氨基酸 Asp 和 Glu 帶有正電rg 和 Lys 帶有負(fù)電荷，由此數(shù)據(jù)可以看出酸性氨基酸個(gè)數(shù)比堿性氨基所以推斷 Bra040503 蛋白呈堿性。該蛋白不穩(wěn)定系數(shù)為 18.74，脂肪性平均值為-0.536，由此可以推斷該蛋白為穩(wěn)定的親水蛋白。通過(guò) Prb.expasy.org/protscale/）在線(xiàn)工具分析 Bra040503 蛋白的疏水性質(zhì)，由ra040503 蛋白質(zhì)中親水氨基酸占總氨基酸的 65.1％，疏水氨基酸為 34區(qū)域較小于親水氨基酸，從而進(jìn)一步說(shuō)明了該蛋白為親水蛋白，與 Pro結(jié)果一致，如圖 2-5：

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3280207