發(fā)布時(shí)間：2021-07-11 03:48

　　組蛋白去乙�；福╤istone deacetylase,HDAC）在植物生長、發(fā)育和脅迫應(yīng)答反應(yīng)中具有重要的作用。HDAC催化組蛋白去乙酰化,能夠影響染色質(zhì)的結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄。目前,有關(guān)木本植物HDAC在鹽脅迫應(yīng)答反應(yīng)中的功能研究鮮有報(bào)道。本研究從毛果楊中克隆了 HDAC的RPD3/HDA1亞家族基因HDA903,研究了其蛋白質(zhì)序列、基因的表達(dá)與功能。（1）毛果楊HDA903基因的ORF序列長度為1506 bp,其編碼的蛋白質(zhì)含有501個(gè)氨基酸,該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為5.26,屬于穩(wěn)定、親水性蛋白質(zhì)。在該蛋白質(zhì)的N端存在一個(gè)HDAC結(jié)構(gòu)域,系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明毛果楊HDA903蛋白與胡楊HDA19親緣關(guān)系較近。（2）利用熒光定量PCR方法分析HDA903基因的表達(dá)。HDA903基因能夠在毛果楊不同器官中表達(dá),但不具有組織特異性。對(duì)HDA903基因在ABA、鹽和低溫脅迫下的表達(dá)進(jìn)行分析,表明鹽脅迫抑制HDA903的表達(dá),低溫誘導(dǎo)HDA903的表達(dá),ABA也能夠調(diào)節(jié)HDA903的表達(dá)。（3）通過構(gòu)建HDA903-GFP載體,利用基因槍轟擊法將融合基因?qū)胙笫[表皮細(xì)胞中,觀察熒光信號(hào)。結(jié)果顯... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?基因片段的ＰＣＲ擴(kuò)增??注：Ｍ：?ＤＬ?２０００?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?／／ＤＪ９０５編碼區(qū)片段擴(kuò)增結(jié)果??

殘基數(shù)目（Ａｓｐ＋Ｇｌｕ）為７７，正電氨基酸殘基數(shù)目??（Ａｒｇ＋Ｌｙｓ）為５３，不穩(wěn)定指數(shù)是３５．２９，此值不超過４０，即為穩(wěn)定蛋白質(zhì)。綜上結(jié)果??表明，ＨＤＡ９０３蛋白為穩(wěn)定親水性蛋白。??ＰｒｏｔＳｃａｌｓ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ??３?＇?Ｉ?？?Ｕｐｈｏｂ．?／?Ｋｙｔｅ?Ｇ．?Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?——￣??Ｋ卿鴨議．??－４????????????０?１００?２００?３００?４００?５００??Ｐｏｓｉｔｉｏｎ??圖３?ＨＤＡ９０３蛋白的親／疏水性分析??２＿３．３＿２?ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜區(qū)及磷酸化位點(diǎn)分析??利用?ＴＭＨＭＭ?Ｓｅｒｖｅｒ?ｖ．?２．０?（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＴＭＨＭＭ／）在線軟件，??對(duì)ＨＤＡ９０３蛋白進(jìn)行跨膜分析。結(jié)果表明，ＨＤＡ９０３蛋白的跨膜螺旋個(gè)數(shù)為０，因此推??測(cè)ＨＤＡ９０３蛋白不存在跨膜區(qū)（圖４）。利用ＫｉｎａｓｅＰｈｏｓ?２．０??（ｈｔｔｐ：／／ｋｉｎａｓｅｐｈｏｓ．ｍｂｃ．ｎｃｔｕ．ｅｄｕ．ｔｗ／ｐｒｅｄｉｃｔ．ｐｈｐ）預(yù)測(cè)?ＨＤＡ９０３?蛋白可能發(fā)生憐酸化的位??點(diǎn)，結(jié)果顯示，ＨＤＡ９０３蛋白有６４個(gè)磷酸化位點(diǎn)，其中絲氨酸２７個(gè)，酪氨酸２３個(gè)，??蘇氨酸１４個(gè)。預(yù)測(cè)ＨＤＡ９０３蛋白受磷酸化調(diào)節(jié)。??ＴＭＨＭＭ?ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ?ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｆｏｒ?ＰｔＨＤＡ９０３??１．２????■?■?．???１?????０．８?■??＞＞??０．６?■??ｏ??Ｃｉ??０．４?■?．??０．２?■??０??１???１?１??

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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