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互花米草耐鹽基因MDH和BADH的克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-07-07 11:55
  全球經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展,人口飛速增長(zhǎng),人類迫切需要更多的土地滿足生產(chǎn)生活需要。人類不合理地使用土地,導(dǎo)致土地鹽漬化已成為制約農(nóng)業(yè)發(fā)展的重要非生物脅迫因素。高鹽和干旱損傷植物膜系統(tǒng)的完整性、破壞葉綠體的結(jié)構(gòu)和功能、抑制酶的活性等。通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù),從耐鹽植物中克隆耐鹽相關(guān)基因,培育轉(zhuǎn)基因作物或植物,可以提高農(nóng)作物的產(chǎn)量和對(duì)鹽堿地、干旱地的利用率;セ撞荩⊿partina alterniflora)是泌鹽鹽生植物,在植物分類學(xué)上屬于禾本科米草屬,一般生長(zhǎng)在沿海灘涂地;セ撞萑~片上生有鹽腺,且互花米草具有一定的抵抗風(fēng)浪和鹽堿脅迫的能力,是可以用于耐鹽基因挖掘的非常好的植物材料。本實(shí)驗(yàn)首先以互花米草為材料,克隆了單脫氫抗壞血酸還原酶(Monodehydroascorbate reductase,MDHAR)基因SaMDH1、SaMDH2和甜菜堿醛脫氫酶(Bataine aldehyde dehydrogenase,BADH)基因SaBADH。其次分析了互花米草在600 mmol/L NaCl、20%PEG脅迫處理下,SaMDH1、SaMDH2和SaBADH基因的表達(dá)量變化。最后構(gòu)建SaMDH和Sa... 

【文章來(lái)源】:煙臺(tái)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】:85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

互花米草耐鹽基因MDH和BADH的克隆及功能分析


植物中抗壞血酸主要合成和再生途徑Fig.1Majorsynthesisandregenerationpathwaysofascorbateacidinplants

瓊脂糖凝膠電泳,轉(zhuǎn)錄組,米草,產(chǎn)物


米草葉片總 RNA 的瓊脂糖凝horesis of total RNA from SparH 和 SaBADH 基因草轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果,進(jìn)行引E 和 5′RACE 擴(kuò)增(見(jiàn)圖二次 RACE 的瓊脂糖凝膠電泳DH2 3′-RACE 產(chǎn)物;C:SaMD 產(chǎn)物;E:SaBADH 5′-RACEecond RACE agarose gel electr

瓊脂糖凝膠電泳,第二次,互花米草,轉(zhuǎn)錄組


RNA 的提取結(jié)果通過(guò) 1% 的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。互花米草總 RNA 的提取質(zhì)量如下圖所示,三條帶顯示清晰,表明 RNA 較完整,可以用于合成 cDNA 的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。圖 2 互花米草葉片總 RNA 的瓊脂糖凝膠電泳圖Fig.2Agarose gel electrophoresis of total RNA from Spartina alterniflora leaves2.3.2 克隆互花米草 SaMDH 和 SaBADH 基因利用本實(shí)驗(yàn)室中的互花米草轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果,進(jìn)行引物設(shè)計(jì),利用 RACE 技術(shù),以 cDNA 為模板,進(jìn)行 3′RACE 和 5′RACE 擴(kuò)增(見(jiàn)圖 3)。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3269587

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