背景葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏癥是人類最常見的遺傳性酶缺陷疾病之一。我國南方地區(qū)被列為致病突變位點(diǎn)頻率較高的地區(qū)。酶缺乏可導(dǎo)致新生兒高膽紅素血癥、急性溶血性貧血（AHA）和慢性非球形細(xì)胞溶血性貧血。G6PD缺乏癥的新生兒膽紅素腦病的發(fā)病率高,并可造成永久的神經(jīng)損害,預(yù)后不良。目前診斷手段常為斑點(diǎn)雜交法或熒光定量分析法進(jìn)行酶活性篩查,但對(duì)女性雜合子的診斷效能有限�；�?qū)用娴臋z測主要有一代測序法、新一代測序法以及熒光定量熔解曲線法等,但無法兼顧高準(zhǔn)確性、高通量和低成本。目的本研究使用了一種建立在基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）技術(shù)平臺(tái)的檢測G6PD缺乏癥的方法,旨在研究中國人群常見的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥致病位點(diǎn),并為建立新的快速檢測方法提供基礎(chǔ)研究及驗(yàn)證。方法本文根據(jù)現(xiàn)有的中國流行病學(xué)研究,包括專家共識(shí)及診治指南等,選取了中國人群常見的16種葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥致病突變位點(diǎn),檢測了共411例臨床診斷為“葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥”患者的血樣標(biāo)本。提取核酸后,按照本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的16個(gè)突變位點(diǎn)的對(duì)應(yīng)引物,進(jìn)行多重PCR以及單堿基延伸反應(yīng),通... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１全球Ｇ６ＰＤｄ等位基因地理分布圖（來自Ｈｏｗｅｓ，２０１２）??Ｆｉｇ?１－１?Ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ?ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｍａｐ?ｏｆ?Ｇ６ＰＤｄ?（ｆｒｏｍ?Ｈｏｗｅｓ，?２０１２）??ｌ??

?碩士學(xué)位論文???基情況。Ａｓｓａｙ為檢測位點(diǎn)名稱，Ｃａｌｌ即是檢測出的堿基情況，Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ則代??表分析結(jié)果是否可靠，由Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ組成，依次是Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ、Ｍｏｄｅｒａｔｅ、??Ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅ、Ｌｏｗ?Ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ，如點(diǎn)樣操作失敗或ＰＣＲ過程出現(xiàn)問題，則出現(xiàn)Ｉ．??Ｂａｄ?Ｓｐｅｃｔｒｕｍ。如果未能讀取到位點(diǎn)情況，則顯示ｎｏ?ｃａｌｌ。圖４－１中，位點(diǎn)ｃ．１３８８??被機(jī)器判讀為檢測到Ｇ?（Ｇｕａｎｉｎｅ，鳥嘌呤）和Ａ?（Ａｄｅｎｉｎｅ，腺嘌呤）兩個(gè)堿基，??根據(jù)資料ｃ．１３８８處堿基為Ｇ，該例樣本中同時(shí)存在Ｇ和Ａ，則可以判定該樣本??ｃ．１３８８位點(diǎn)為Ｇ＞Ａ雜合突變。??Ａｓｓａｙ?Ｃａｌｌ?Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ??ｃｉＳ０４?Ｃ?ＡＸｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??ｃ．１８２４?Ｃ?＾Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??Ｃ１３３９?Ｇ?ＡＣｏｎｓｅｒｖａｔ＾ｅ??ｃ．１３６０?Ｃ?Ａ，Ｃｏｎｓｅｎ？ａｔｌｖｅ??ｃ．１３７６?Ｇ?ＡｖＣｏｎｓｅｒｖａｔｔｖｅ??ｃ．１３８７?Ｃ?Ａ．Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??ｃ．１３?＆８?ＧＡ?／＾Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??Ｃ１４６６?Ｃ?Ａ．Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｈ／ｅ??ｃ．２０２?Ｇ?＾Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??Ｔ?Ａ．?Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??Ｃ３９２?Ｇ?Ａ，Ｃ＿ｅｒｖａ＿??ｃ４７３?Ｇ?ＡＣｏｎｓｅｒｖａｔｔ＾ｅ??ｃ．４８７?Ｇ?九?Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??ｃＡ９３?Ａ?Ａ．Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ??ｃ５９２?Ｃ?Ａ．Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｈ？ｅ??ｃ８７ｌ?Ｇ?Ａ．?Ｃ

位點(diǎn)情況??男女??６９?ｃｉ?ｃｉ３７６?■■■■■■■■■■■■■■?ｓ〇??８９?Ｃ１３８８?Ｃｌ?３８８?５７??２６?Ｃ９５?Ｃ９５?■■Ｍ?２２??９?■陰性?陰性■■■?１８??１５?■■?Ｃ８７１?Ｃ８７１?■?７??８?■?Ｃ１０２４?Ｃｌ０２４?Ｉ?５??９?■?Ｃ３９２?Ｃ３９２?｜?４??７?＿?Ｃ１３６０?Ｃ１３６０?１??２?Ｃ１００４?Ｃ１００４?〇??１?Ｃ２０２?Ｃ２０２?０??１?Ｃ５９２?Ｃ５９２?０??圖４－３位點(diǎn)檢出情況??Ｆｉｇ?４－３?Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｍｕｔａｔｉｏｎｓ??（２）純合突變??共檢出２７９例純合突變，詳見表４－２，占比例最高的是ｃ．１３８８，共有１０４例，??占總數(shù)的３７．３％，其次是ｃ．?１３７６，共有９６例，占３４．４％，而ｃ．９５排在第三位，??檢出３２例純合突變，占１１．５％。前三個(gè)位點(diǎn)占總純合突變的８３．２％，其他位點(diǎn)??突變具體為?ｃ．８７１，共?１４?例（５．０％），?ｃ．１０２４，?１３?例（４．７％）；?ｃ．３９２，共?１１?例??（３．９％）；?ｃ．１３６０，?６例（２．１％）；其余位點(diǎn)除ｃ．１００４和ｃ．２０２分別檢出２例和１??例外，余位點(diǎn)均未能檢出純合突變。??（３）雜合突變??雜合位點(diǎn)的情況如表４－３。雜合突變最多的是ｃ．１３７６，有４０例，占總雜合突??變的４６．５％，?ｃ．１３８８位點(diǎn)共有２７例（３１．４％），?ｃ．９５位點(diǎn)共１０例（１１．６％），其余??檢出雜合突變位點(diǎn)的有ｃ．８７１，６例（７．０％），ｃ．３９２、ｃ．１３６０、ｃ．５９２則均為１例??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3249266