重金屬轉(zhuǎn)運P型ATP酶HMAs（heavy metal P1B-ATPases）已被證實參與植物體內(nèi)的重金屬運輸,HMA7（也稱RAN1）可將銅離子傳遞給乙烯受體,乙烯在銅離子的存在下與受體結(jié)合,從而啟動乙烯通路的表達(dá)。相關(guān)研究表明,乙烯對豆科植物共生結(jié)瘤起抑制作用,但HMA7在其中的功能尚不為人知。為了探究重金屬轉(zhuǎn)運P型ATP酶基因HMA7對共生結(jié)瘤的影響,通過對全基因組已測序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因組進(jìn)行篩查,得到兩個HMA7類候選基因MTR₂g035840和MTR₄g094695,在對其表達(dá)模式分析的基礎(chǔ)上,對MTR₂g035840進(jìn)行亞細(xì)胞和組織定位,并對兩個目的基因進(jìn)行RNA干擾及對MTR₂g035840進(jìn)行過表達(dá)研究,以分析其在根瘤形成中的作用。1、兩個目的基因的表達(dá)模式分析共生條件下檢測兩個目的基因的表達(dá)顯示,MTR₂g035840和MTR₄g094695在共生后期表達(dá)量上調(diào),推測其在根瘤成熟晚期發(fā)揮作用。組織表達(dá)分析表明,MTR

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

植物體內(nèi)乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程示意圖(張存立和郭紅衛(wèi)2012)

Forward Primer (10um) 0.6Reverse Primer (10um) 0.6Template DNA VariableNuclease-free H2O To 20ul程采用兩步法，程序為 95℃,10min，一個循環(huán)，95℃，15s，6溶解曲線從 60℃到 90℃，0.5℃/s。所有的實驗樣品設(shè)置三個機(jī)的顯著性分析采用標(biāo)準(zhǔn)誤進(jìn)行分析，相對定量（2-△△CT）的方法析，表達(dá)量的數(shù)據(jù)使用蒺藜苜蓿持家基因 Actin 的表達(dá)量進(jìn)行標(biāo)分析蓿 HMA7 基因的篩選與序列分析 HMA7 基因(At5G44790)為參考，比對蒺藜苜�；蚪M數(shù)據(jù)庫他植物來源的 HMA7 氨基酸序列，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果如圖以看出，MTR_2g035840 和 MTR_4g094695 與其他物種的 HM測這兩個基因?qū)儆谳疝架俎?HMA7 家族。

圖 2-2 總 RNA 電泳圖譜Fig.2-2 The electrophoretogram of total RNA與不接菌條件下的表達(dá)情況基因 Actin 作為內(nèi)參基因，取接菌后 5，10，菌的根作為對照，提取總 RNA 進(jìn)行 qRT-PC后 5d 時無論接種根還是未接種根中的表達(dá) 28d 的接種根中顯著上調(diào)。MTR_4g094695 的接菌后 5d 表達(dá)下調(diào)，接菌后 28d 明顯上調(diào)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物-根瘤菌共生固氮[J]. 王二濤.  中國基礎(chǔ)科學(xué). 2016(01)
[2]Classical Ethylene Insensitive Mutants of the Arabidopsis EIN2 Orthologue Lack the Expected‘hypernodulation’ Response in Lotus japonicus[J]. Pick Kuen Chan,Bandana Biswas,Peter M. Gresshoff.  Journal of Integrative Plant Biology. 2013(04)
[3]乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究[J]. 張存立,郭紅衛(wèi).  自然雜志. 2012(04)



本文編號：3228116