在我國的主要糧食作物中,大豆含有多種的氨基酸和維生素,營養(yǎng)豐富且種植不難,已成為了人們不可或缺的重要食材。但近些年來,大豆蟲害卻給我國的大豆產(chǎn)量造成了不小的影響,通常的化學(xué)防治技術(shù)不僅增加成本,而且也造成了環(huán)境污染,也威脅到大豆的食品安全。而通過植物基因工程技術(shù)來選育產(chǎn)量高的抗蟲大豆品種逐漸成為了一條有效的解決途徑。在目前的基因工程技術(shù)中,BT（Bacillus thuringiensis,BT）基因被首先應(yīng)用于作物育種中,并在抗蟲效果上取得了良好表現(xiàn)。通過研究轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)現(xiàn),當(dāng)作物中被導(dǎo)入BT基因后可使該作物充分表現(xiàn)出良好的抗蟲性。本試驗就是將抗蟲基因Cry1Iem的180株株系、抗蟲基因Cry8-like的120株株系以及抗蟲基因Cry1AB13-2的90株株系作為研究對象。通過使用常規(guī)PCR檢測分析、Southern雜交、熒光定量PCR技術(shù)對其轉(zhuǎn)抗蟲基因的株系分別進(jìn)行分子鑒定,再對這三種轉(zhuǎn)抗蟲基因的陽性植株株系進(jìn)行室內(nèi)外接蟲,選育農(nóng)藝性狀從而鑒定不同的抗蟲基因所具備的抗蟲功能。分別將已轉(zhuǎn)化的株系與受體品種“吉農(nóng)28”大豆植株進(jìn)行抗蟲能力的比較,從而驗證出該三種抗蟲基因所具備的抗蟲... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

T6轉(zhuǎn)基因大豆的PCR基因檢測Cry1Iem

吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文第三章結(jié)果與分析22552bp1971bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp207bp從圖3-2檢測結(jié)果可以看出，由于RSP是大豆內(nèi)源基因,所以在收獲的T5代轉(zhuǎn)基因植株中均檢測到了目的條帶Cry8-like（1971bp），篩選標(biāo)記Bar（552bp）,終止子NOS（207bp）,這表明轉(zhuǎn)化的標(biāo)記基因和功能片段都已被成功整合到了受體“吉農(nóng)28”大豆中。MPNK12345MPNK12345B1B2MPNK12345B3圖3-2：T5轉(zhuǎn)基因大豆Cry8-like（B1）、Bar（B2）、NOS（B3）基因的PCR檢測M:DL2000DNAmarkerP:陽性對照N:非轉(zhuǎn)基因植株K:空白對照1～5：轉(zhuǎn)基因植株Fig.3-2:PCRdetectionofgenesofCry8-like(B1),Bar(B2)andNOS(B3)inT5transgenicsoybeansM:DL2000DNAmarkerP:positivecontrolN:non-transgenicplantK:blankcontrol1～5:transgenicplant3.1.3轉(zhuǎn)Cry1AB13-2基因株系PCR檢測從圖3-3檢測結(jié)果可以看出，在收獲的T4代轉(zhuǎn)基因植株中均檢測到了目的條帶Cry1AB13-2（2018bp），篩選標(biāo)記抗除草劑Bar（552bp）,啟動子35S（500bp）,終止子NOS（250bp）,這說明轉(zhuǎn)化的標(biāo)記基因和功能片段都已被成功整合到了受體“吉農(nóng)28”大豆中。

T4轉(zhuǎn)基因大豆Cry1AB13-2（C1）、Bar（

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3220890