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五個(gè)家蠶絲蛋白基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)基因表達(dá)特征研究

發(fā)布時(shí)間:2021-06-01 01:32
  家蠶(Bombyx mori)是具有5000多年飼養(yǎng)馴化歷史的重要產(chǎn)絲昆蟲。絲腺是家蠶合成和分泌蠶絲蛋白的專一器官,通常分為前部絲腺、中部絲腺和后部絲腺三個(gè)形態(tài)功能各異的部分,其中中部絲腺和后部絲腺分別合成并分泌絲膠(約占25%)和絲素(約占75%),二者是蠶絲的主要成分。絲腺對(duì)蠶絲產(chǎn)量和品質(zhì)具有決定性作用,是蠶絲業(yè)的生物學(xué)基礎(chǔ)。絲素蛋白由三個(gè)亞單元即絲素重鏈(fibH)、絲素輕鏈(fib L)和糖蛋白P25組成,三者以6:6:1的比例組裝形成一個(gè)基本結(jié)構(gòu)單元。絲膠蛋白的組分較為復(fù)雜,至少包括絲膠1(Ser1)、絲膠2(Ser2)、絲膠3(Ser3)等幾種蛋白組分。據(jù)早期線索,絲蛋白合成調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平,即激素信號(hào)首先傳導(dǎo)至轉(zhuǎn)錄因子,再由轉(zhuǎn)錄因子直接調(diào)控絲素和絲膠蛋白編碼基因(主要作用于啟動(dòng)子區(qū),亦可作用于內(nèi)含子區(qū)),對(duì)這些基因進(jìn)行時(shí)空特異的“開啟”或“關(guān)閉”,從而指導(dǎo)蠶絲蛋白高效受控合成,該調(diào)控過(guò)程錯(cuò)綜復(fù)雜。近幾十年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者圍繞絲蛋白的合成調(diào)控開展了大量研究并有豐富進(jìn)展,但至今仍未探明其詳細(xì)機(jī)制。啟動(dòng)子是基因受控表達(dá)的核心功能元件。研究絲素和絲膠蛋白編碼基因啟動(dòng)子的表達(dá)調(diào)... 

【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

五個(gè)家蠶絲蛋白基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)基因表達(dá)特征研究


fibH基因結(jié)構(gòu)示意圖

示意圖,外顯子,示意圖,啟動(dòng)子


第一章文獻(xiàn)綜述3圖1.2fibH第二外顯子結(jié)構(gòu)示意圖[11]Figure1.2ThestructureofthesecondexonoffibHA:第二外顯子中包含的12個(gè)重復(fù)區(qū)域,Ua序列(紅色)Ub序列(藍(lán)色)。B:A圖中框內(nèi)放大。C:B圖中框內(nèi)序列A:The12repeatregionscontainedinthesecondexon,Uasequence(red)andUbsequence(blue).B:ZoomintheframeinA.C:SequenceintheboxinB圖1.3fibH啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)示意圖[14]Figure1.3SchematicdiagramoffibHpromoter5’-flanking:第二外顯子的5’側(cè)翼序列,E1:第一外顯子,Intron:內(nèi)含子,5’-E2:第二外顯子的5"末端序列。5"-flanking:5"flankingsequenceofthesecondexon,E1:firstexon,Intron:intron,5"-E2:5"terminalsequenceofthesecondexon.(2)fibL基因fibL基因位于家蠶第14號(hào)染色體上,全長(zhǎng)13472bp,包括7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子[24],其CDS長(zhǎng)度為262bp,編碼蛋白分子量約25kDa。fibL基因含有一個(gè)最大的第1內(nèi)含子(8145bp),約占該基因的60.5%[24]。絲素蛋白輕鏈包含了三個(gè)Cys殘基,其中兩個(gè)形成分子內(nèi)二硫鍵,而第三個(gè)殘基位于C端,且在相對(duì)親水的區(qū)域中,與絲素蛋白重鏈形成二硫鍵[25]。2003年,Tomita等[26]首次利用fibL啟動(dòng)子在家蠶后部絲腺中表達(dá)重組蛋白,最終表達(dá)是重組蛋白可達(dá)到8.4μg/mg。該fibL啟動(dòng)子大小為1370bp,由fibL的5’側(cè)翼序列和部分cDNA序列組成(圖1.4)[14]。轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)控fibL啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄表達(dá),已有相關(guān)研究報(bào)道,SGF-1[15],

示意圖,啟動(dòng)子,示意圖,外顯子


第一章文獻(xiàn)綜述3圖1.2fibH第二外顯子結(jié)構(gòu)示意圖[11]Figure1.2ThestructureofthesecondexonoffibHA:第二外顯子中包含的12個(gè)重復(fù)區(qū)域,Ua序列(紅色)Ub序列(藍(lán)色)。B:A圖中框內(nèi)放大。C:B圖中框內(nèi)序列A:The12repeatregionscontainedinthesecondexon,Uasequence(red)andUbsequence(blue).B:ZoomintheframeinA.C:SequenceintheboxinB圖1.3fibH啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)示意圖[14]Figure1.3SchematicdiagramoffibHpromoter5’-flanking:第二外顯子的5’側(cè)翼序列,E1:第一外顯子,Intron:內(nèi)含子,5’-E2:第二外顯子的5"末端序列。5"-flanking:5"flankingsequenceofthesecondexon,E1:firstexon,Intron:intron,5"-E2:5"terminalsequenceofthesecondexon.(2)fibL基因fibL基因位于家蠶第14號(hào)染色體上,全長(zhǎng)13472bp,包括7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子[24],其CDS長(zhǎng)度為262bp,編碼蛋白分子量約25kDa。fibL基因含有一個(gè)最大的第1內(nèi)含子(8145bp),約占該基因的60.5%[24]。絲素蛋白輕鏈包含了三個(gè)Cys殘基,其中兩個(gè)形成分子內(nèi)二硫鍵,而第三個(gè)殘基位于C端,且在相對(duì)親水的區(qū)域中,與絲素蛋白重鏈形成二硫鍵[25]。2003年,Tomita等[26]首次利用fibL啟動(dòng)子在家蠶后部絲腺中表達(dá)重組蛋白,最終表達(dá)是重組蛋白可達(dá)到8.4μg/mg。該fibL啟動(dòng)子大小為1370bp,由fibL的5’側(cè)翼序列和部分cDNA序列組成(圖1.4)[14]。轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)控fibL啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄表達(dá),已有相關(guān)研究報(bào)道,SGF-1[15],


本文編號(hào):3209391

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