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玉米開(kāi)花基因ZmCOL3啟動(dòng)子的克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-05-25 10:47
  玉米光周期敏感是調(diào)控其開(kāi)花期的一個(gè)重要因素,光周期敏感性的存在嚴(yán)重限制了熱帶、亞熱帶玉米種質(zhì)在溫帶地區(qū)的利用。近期有研究者發(fā)現(xiàn)ZmCOL3是玉米開(kāi)花期光周期調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中一個(gè)重要的功能基因,自然群體中該基因編碼區(qū)無(wú)顯著差異,但在啟動(dòng)子區(qū)存在兩種等位基因的遺傳變異,推測(cè)啟動(dòng)子區(qū)域的大片段變異是影響ZmCOL3生物學(xué)功能重要選擇性靶點(diǎn)之一。為此本研究從熱帶血緣玉米材料CIMBL119和溫帶血緣玉米材料B73中克隆得到ZmCOL3啟動(dòng)子1717bp和2000bp序列,分別命名為ZmCOL3pro217和ZmCOL3pro551,并通過(guò)生物信息學(xué)分析、植物表達(dá)載體構(gòu)建、熒光定量PCR、酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定以及GUS組織化學(xué)染色等研究方法評(píng)估兩種啟動(dòng)子的啟動(dòng)效率和啟動(dòng)基因表達(dá)的時(shí)空特異性。具體研究結(jié)果如下:1.克隆ZmCOL3pro217和ZmCOL3pro551兩種啟動(dòng)子,序列比對(duì)表明:啟動(dòng)子區(qū)域存在217bp/551bp的堿基差異;生物信息學(xué)分析表明:兩種啟動(dòng)子均含有分生組織特異性、光響應(yīng)和脅迫響應(yīng)等多個(gè)順式作... 

【文章來(lái)源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 玉米開(kāi)花基因的相關(guān)研究
    1.2 啟動(dòng)子與開(kāi)花的關(guān)系
        1.2.1 啟動(dòng)子與植物開(kāi)花的關(guān)系
        1.2.2 啟動(dòng)子與玉米開(kāi)花的關(guān)系
    1.3 啟動(dòng)子的概述
        1.3.1 啟動(dòng)子的基本結(jié)構(gòu)和特征
        1.3.2 啟動(dòng)子的類型
        1.3.3 啟動(dòng)子功能分析方法
第二章 研究?jī)?nèi)容
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 試劑和藥品
        2.1.3 儀器
        2.1.4 引物列表
        2.1.5 溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)的克隆以及生物信息學(xué)分析
        2.2.2 自交系中ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)驅(qū)動(dòng)ZmCOL3相對(duì)表達(dá)量比較
        2.2.3 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)驅(qū)動(dòng)gus報(bào)告基因植物表達(dá)載體構(gòu)建
        2.2.4 轉(zhuǎn)基因玉米新材料創(chuàng)制
        2.2.5 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)長(zhǎng)短日照下組織特異性比較分析
        2.2.6 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)長(zhǎng)短日照下光周期節(jié)律性分析
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 結(jié)果
        3.1.1 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)的克隆以及生物信息學(xué)分析
        3.1.2 自交系中ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)驅(qū)動(dòng)ZmCOL3相對(duì)表達(dá)量比較
        3.1.3 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)驅(qū)動(dòng)gus報(bào)告基因植物表達(dá)載體構(gòu)建
        3.1.4 轉(zhuǎn)基因玉米新材料創(chuàng)制
        3.1.5 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)長(zhǎng)短日照下組織特異性比較分析
        3.1.6 ZmCOL3_(pro217)和ZmCOL3_(pro551)長(zhǎng)短日照下光周期節(jié)律性比較分析..323.2 討論
    3.2 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]抑制ZmCol3基因表達(dá)調(diào)控玉米開(kāi)花期[J]. 賈偉,尹悅佳,柳青,劉洋,李楠,果天宇,郝東云,劉相國(guó).  玉米科學(xué). 2017(06)
[2]利用酵母單雜交篩選擬南芥AtSTK基因表達(dá)調(diào)控蛋白的研究[J]. 楊歌,惠穎,趙翠,田夢(mèng)涵,任媛媛,黃占景,葛榮朝.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2017(04)
[3]玉米淀粉合成酶SSⅡa啟動(dòng)子的克隆及功能分析[J]. 陳展宇,王闊,王曉梅,劉相國(guó),崔喜艷.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[4]玉米淀粉分支酶基因SBEⅡ b高效沉默表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化表達(dá)[J]. 李楠,趙吉元,尹悅佳,柳青,郭嘉,王云鵬,劉相國(guó),郝東云,賀紅霞.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2015(02)
[5]植物啟動(dòng)子研究進(jìn)展[J]. 李田,孫景寬,劉京濤.  生物技術(shù)通報(bào). 2015(02)
[6]棉花種子特異表達(dá)的LEA啟動(dòng)子克隆及功能驗(yàn)證[J]. 劉峰,汪小東,趙彥鵬,孫杰.  棉花學(xué)報(bào). 2014(04)
[7]植物MADS-box基因的研究進(jìn)展[J]. 王力娜,范術(shù)麗,宋美珍,龐朝友,喻樹(shù)迅.  生物技術(shù)通報(bào). 2010(08)
[8]煙草rbcS啟動(dòng)子的克隆與活性鑒定[J]. 孫家利,閆曉紅,王力軍,時(shí)向東,魏文輝.  中國(guó)煙草學(xué)報(bào). 2010(03)
[9]家蠶新基因Bmsop2結(jié)構(gòu)及近端啟動(dòng)子的生物信息學(xué)分析[J]. 徐家萍,魏國(guó)清,周武松.  安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(01)
[10]葡萄LEAFY基因啟動(dòng)子的克隆與序列分析[J]. 宗成文,章鎮(zhèn),房經(jīng)貴,陶建敏,趙密珍.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(04)

博士論文
[1]玉米泛轉(zhuǎn)錄組的構(gòu)建及玉米開(kāi)花抑制因子ZmCOL3的功能解析[D]. 金敏亮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]玉米抗禾谷鐮刀菌莖腐病主效QTL基因ZmCCT的克隆、功能分析及表觀調(diào)控研究[D]. 王超.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]水稻多效性基因Ghd7的克隆和功能分析[D]. 翁小煜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]玉米光周期敏感基因ZmCOL3的功能解析[D]. 賈偉.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]玉米LEG基因啟動(dòng)子克隆與功能分析[D]. 董慶.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號(hào):3205204

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