目的:肝纖維化（hepatic fibrosis）是慢性肝損傷的組織代償性反應(yīng),若不及時(shí)去除潛在致病因素將會(huì)進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cells,HSCs）在腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）等細(xì)胞因子刺激下,其增殖、活化表型發(fā)生改變是肝纖維化發(fā)生、發(fā)展過程中的中心事件。研究發(fā)現(xiàn)TNF-αA94T（rs1800620）和TNF-αP84L（rs4645843）單核苷酸基因多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）,會(huì)影響TNF-α蛋白氨基酸之間的氫鍵網(wǎng)絡(luò)和相互作用力,減小TNF-α蛋白結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,進(jìn)而下調(diào)TNF-α水平。本實(shí)驗(yàn)旨在通過構(gòu)建TNF-α野生型、TNF-αA94T/P84L突變型的HSCs穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株模型,研究TNF-αSNPs對(duì)人肝星狀細(xì)胞系LX-2增殖、活化、凋亡和遷移等生物學(xué)功能的影響及潛在分子機(jī)制。方法:PCR擴(kuò)增合成TNF-αc DNA,以此為模版點(diǎn)突變合成TNF-αA94T和TNF-αP84L。與線性化載體重組后,在DH5α感受... 

【文章來源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文名詞對(duì)照
引言
第1章 TNF-α重組質(zhì)粒及LX-2 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建
    1.1 材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.4 討論
第2章 TNF-α基因多態(tài)性對(duì)LX-2 生物學(xué)功能的影響
    2.1 材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
第3章 TNF-α基因多態(tài)性對(duì)NF-κB信號(hào)通路的影響
    3.1 材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文目錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Tumor necrosis factor-α-G308A polymorphism is associated with liver pathological changes in hepatitis C virus patients[J]. Noha G Bader El Din,Sally Farouk,Reem El-Shenawy,Marwa K Ibrahim,Reham M Dawood,Mostafa M Elhady,Ahmed M Salem,Naglaa Zayed,Ahmed Khairy,Mostafa K El Awady.  World Journal of Gastroenterology. 2016(34)
[2]Association between hepatocellular carcinoma and tumor necrosis factor alpha polymorphisms in South Korea[J]. Suk Pyo Shin,Nam Keun Kim,Ju Hwan Kim,Ju Ho Lee,Jung Oh Kim,Sung Hwan Cho,Hana Park,Mi Na Kim,Kyu Sung Rim,Seong Gyu Hwang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(46)



本文編號(hào)：3194168