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水稻低溫敏感葉片白化基因OsLCD1的圖位克隆

發(fā)布時(shí)間:2021-05-17 17:48
  葉片是農(nóng)作物最重要的源器官,葉綠體是光合作用的場(chǎng)所,其發(fā)育的好壞直接影響植株生長(zhǎng)發(fā)育,最終影響生物量、產(chǎn)量與品質(zhì)。水稻葉色變異是一類易于鑒定的突變性狀,該性狀不僅可作為形態(tài)標(biāo)記應(yīng)用于水稻分子育種,同時(shí)該類突變體也是研究水稻功能基因組,尤其是光系統(tǒng)、葉綠素合成代謝以及葉綠體的遺傳分化及發(fā)育的重要材料。本課題組前期利用EMS誘變秈稻恢復(fù)系華占,從后代篩選得到低溫敏感的葉片白化突變體oslcd1(Oryza sativa low-temperature-sensitive chlorophyll-deficient 1)。本研究以oslcd1為材料,從生理、細(xì)胞、分子等角度解析葉片白化的根本原因。主要結(jié)果如下:1.大田條件下,突變體oslcd1的葉片始終呈白綠相間性狀白化性,導(dǎo)致其葉綠素含量及凈光合速率顯著低于對(duì)照,最終導(dǎo)致突變體株高、分蘗數(shù)及每穗總粒數(shù)均極顯著低于對(duì)照。利用SEM觀察突變體發(fā)現(xiàn)葉表面刺毛、纖細(xì)毛、鋸齒毛都多于野生型;進(jìn)一步利用TEM觀察突變體,結(jié)果顯示,突變體葉肉細(xì)胞中很多葉綠體呈液泡化狀態(tài)。2.人工控溫條件下處理突變體oslcd1及其野生型對(duì)照,結(jié)果顯示20℃低溫條件下突... 

【文章來(lái)源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 影響植物葉綠體發(fā)育的因素
        1.1.1 核質(zhì)互作
        1.1.2 類囊體膜
        1.1.3 光
        1.1.4 溫度
    1.2 葉色突變體的研究進(jìn)展
        1.2.1 葉色突變體的研究進(jìn)展
        1.2.2 葉色突變體在育種上的應(yīng)用
    1.3 2OGD蛋白超級(jí)家族的研究進(jìn)展
    1.4 本研究的意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與田間種植
    2.2 人工控溫條件下及自然光溫下的突變體表型鑒定
    2.3 葉綠素含量測(cè)定
    2.4 葉肉細(xì)胞透射電鏡觀察
    2.5 葉片掃描電鏡觀察
    2.6 凈光合速率測(cè)定
    2.7 葉片基因組總DNA的提取
    2.8 基因遺傳分析及精細(xì)定位
    2.9 候選基因的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證分析
    2.10 基因遺傳互補(bǔ)及敲除載體構(gòu)建
    2.11 水稻遺傳轉(zhuǎn)化
    2.12 滲透及鹽脅迫處理
    2.13 葉綠素?zé)晒鈪?shù)測(cè)定
    2.14 RNA-seq分析
    2.15 總RNA提取
    2.16 RNA反轉(zhuǎn)錄
    2.17 qRT-PCR分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 oslcd1的田間表型及主要農(nóng)藝性狀
    3.2 大田條件下突變體oslcd1葉片的掃描電鏡觀察
    3.3 突變體oslcd1葉片對(duì)低溫敏感
    3.4 oslcd1對(duì)氯化鈉和甘露醇的響應(yīng)
    3.5 遺傳分析及基因定位
    3.6 20℃和28℃條件下突變體oslcd1葉綠體相關(guān)基因的差異表達(dá)分析
4 討論
    4.1 OsLCD1基因是低溫條件下影響水稻葉綠體發(fā)育及形成的關(guān)鍵的基因
    4.2 OsLCD1基因在兩系雜交育種中的應(yīng)用
5 結(jié)論與展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[7]不同濃度5-氨基乙酰丙酸(ALA)浸種對(duì)NaCl脅迫下番茄種子發(fā)芽率及芽苗生長(zhǎng)的影響[J]. 趙艷艷,胡曉輝,鄒志榮,燕飛.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2013(01)
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[9]幼苗期帶白化轉(zhuǎn)綠葉色標(biāo)記的水稻光溫敏核不育系楠豐8S的選育[J]. 盧華金,楊文清,樓玨,林恭松,阮柏苗,周海平,鄭國(guó)楚.  雜交水稻. 2012(01)
[10]水稻葉緣白化葉色標(biāo)記三系不育系云豐88A的選育[J]. 李小林,鄧安鳳,徐雨然,鄧君浪,谷安宇,年偉,史勝利,吳殿星,董陽(yáng)均,李健強(qiáng),張錦文.  種子. 2011(12)

碩士論文
[1]水稻不同品種對(duì)褐飛虱Nilaparvata lugens(St(?)l)的抗性水平鑒定及抗性因子初探[D]. 丁識(shí)伯.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào):3192179

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