目的:建立軟骨細(xì)胞（HC-α）SHOX基因過(guò)/低表達(dá)模型,篩選與未處理組差異表達(dá)miRNA并予以驗(yàn)證,同時(shí)尋找差異miRNA可能調(diào)控的靶基因,為SHOX異常乃至生長(zhǎng)板異常疾病探尋新的治療靶點(diǎn)并提供新的理論依據(jù)。方法:（1）用SHOX過(guò)表達(dá)慢病毒、含有shRNA序列的SHOX干擾慢病毒、過(guò)表達(dá)空載慢病毒和干擾空載慢病毒分別感染HC-a細(xì)胞,并經(jīng)過(guò)嘌呤霉素篩選陽(yáng)性感染成功HC-a細(xì)胞。（2）Real-time PCR檢測(cè)SHOX mRNA在各組的相對(duì)表達(dá)量。（3）用miRNA芯片分析SHOX過(guò)表達(dá)組、SHOX低表達(dá)與未處理組的差異表達(dá)miRNA。（4）選取處理組中表達(dá)趨勢(shì)相反的差異miRNA作為研究對(duì)象,用Real-time PCR驗(yàn)證差異表達(dá)mi RNA與芯片結(jié)果的一致性。（5）通過(guò)Target Scan預(yù)測(cè)具有顯著差異的miRNA的靶基因,并在HC-a細(xì)胞中轉(zhuǎn)染差異miRNA的類似物（mimic）,檢測(cè)靶基因表達(dá)量的變化。結(jié)果:（1）成功篩選出各組已感染慢病毒的陽(yáng)性HC-a細(xì)胞。（2）Real-time PCR測(cè)定SHOX mRNA表達(dá)情況與未處理組相比,過(guò)表達(dá)組SHOX mRNA表達(dá)... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀研究生期間的研究成果及發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]特發(fā)性矮身材兒童循環(huán)microRNA表達(dá)水平的研究[J]. 趙莎,鐘燕,蔣耀輝,易著文.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2013(12)



本文編號(hào)：3191939