發(fā)布時(shí)間：2021-05-16 18:27

　　目的觀察肺癌細(xì)胞中PIK3AP1基因的表達(dá)情況,分析其表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系,以及PIK3AP1基因過表達(dá)對肺癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力的影響。方法體外培養(yǎng)正常支氣管上皮細(xì)胞系HBEC,非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、HCC827、H358,小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系H69、H526、H82。采用RT-PCR法檢測上述細(xì)胞中PIK3AP1 m RNA的表達(dá)。利用Kaplan-Meier plotter在線生存分析數(shù)據(jù)庫,對肺癌組織中PIK3AP1 m RNA表達(dá)與患者預(yù)后的相關(guān)性進(jìn)行分析。取不表達(dá)PIK3AP1的肺癌細(xì)胞,將其分為觀察組和對照組,以慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)分別轉(zhuǎn)染PIK3AP1過表達(dá)載體和空載體,采用Brd U法觀察細(xì)胞增殖能力,Transwell實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞侵襲能力,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移能力,Western blotting法檢測AKT、p-AKT蛋白表達(dá)。結(jié)果 PIK3AP1基因在小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系H69、H526、H82中高表達(dá),在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、HCC827、H358中低表達(dá)或不表達(dá),在正常支氣管上皮細(xì)胞中不表達(dá)。PIK3AP1基因高表達(dá)和低表達(dá)肺癌患者的中位生存期分別為6... 

【文章來源】：山東醫(yī)藥. 2020,60(26)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 不同類型肺癌細(xì)胞中PIK3AP1 m RNA表達(dá)檢測
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞PIK3AP1 m RNA表達(dá)檢測
    1.3 肺癌組織中PIK3AP1 m RNA表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系分析
    1.4 PIK3AP1過表達(dá)對肺癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力的影響觀察
        1.4.1 305-PIK3AP1質(zhì)粒的構(gòu)建
        1.4.2 病毒制備與感染
        1.4.3 細(xì)胞分組與感染
        1.4.4 細(xì)胞增殖能力觀察
        1.4.5 細(xì)胞侵襲能力觀察
        1.4.6 細(xì)胞遷移能力觀察
        1.4.7 細(xì)胞PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白AKT、p-AKT蛋白檢測
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同類型肺癌細(xì)胞中PIK3AP1 m RNA表達(dá)比較
    2.2 肺癌組織中PIK3AP1 m RNA表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系
    2.3 PIK3AP1過表達(dá)對A549細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力的影響觀察結(jié)果
        2.3.1 兩組細(xì)胞增殖能力比較
        2.3.2 兩組細(xì)胞侵襲能力比較
        2.3.3 兩組細(xì)胞遷移能力比較
        2.3.4 兩組AKT、p-AKT蛋白表達(dá)比較
3 討論



本文編號：3190182