【目的】分析不同顏色草莓果實(shí)中花色苷合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因與FaMYB10的表達(dá)差異,以及FaMYB10轉(zhuǎn)錄調(diào)控的功能驗(yàn)證�！痉椒ā恳栽耘嗖葺t顏‘’小白’和‘白雪公主’為試材,利用RNA-seq技術(shù)篩選花色苷合成差異表達(dá)基因并進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證,利用同源重組法構(gòu)建35S::FaMYB10過表達(dá)載體,通過離體果實(shí)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化驗(yàn)證其在果實(shí)花色苷合成調(diào)控中的作用�！窘Y(jié)果】從3個(gè)品種不同時(shí)期果實(shí)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中篩選到8個(gè)參與果實(shí)花色苷合成的候選基因,包括FaPAL、FaCHI、FaCHS、FaDFR、FaANS、FaUFGT、Fa3GT和FaGST,這8個(gè)候選基因在‘紅顏’和‘小白’成熟過程中表達(dá)量逐漸升高,且均顯著高于‘白雪公主’,基因表達(dá)模式與3個(gè)品種果實(shí)花色苷的合成積累模式相一致。qRT-PCR結(jié)果表明,果實(shí)發(fā)育成熟期FaMYB10在‘白雪公主’和‘小白’果實(shí)中的表達(dá)量均顯著高于‘紅顏’,其表達(dá)模式與轉(zhuǎn)錄水平變化一致�！“住疐aMYB10-XB基因編碼區(qū)序列存在2種類型,其中FaMYB10-XB-2插入序列GA‘;白雪公主’FaMYB10-SW編碼區(qū)序列具有ACTTATAC插入。果實(shí)瞬時(shí)過表... 

【文章來源】：果樹學(xué)報(bào). 2020,37(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 總花色苷含量測定（1）樣品預(yù)處理：選取草
        1.2.2 RNA提取、c DNA文庫構(gòu)建及RNA測序
        1.2.3 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
        1.2.4 q RT-PCR表達(dá)模式分析
        1.2.5 Fa MYB10基因克隆
        1.2.6 Fa MYB10表達(dá)載體構(gòu)建和草莓果實(shí)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化
        1.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期總花色苷含量的變化
    2.2 花色苷合成前期結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)分析
    2.3 花色苷合成后期結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)分析
    2.4 果實(shí)發(fā)育時(shí)期花色苷合成關(guān)鍵基因表達(dá)分析
    2.5 Fa MYB10基因克隆及序列分析
    2.6 Fa MYB10基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)化草莓果實(shí)表型分析
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]利用VIGS技術(shù)研究草莓FaMYB5的功能[J]. 王玲,湯浩茹,王小蓉,陳清,江雷雨,林源秀.  園藝學(xué)報(bào). 2017(01)
[2]花青素代謝途徑與植物顏色變異[J]. 祝志欣,魯迎青.  植物學(xué)報(bào). 2016(01)
[3]RNAi沉默F(xiàn)a4CL基因?qū)Σ葺麑?shí)花色苷代謝的影響[J]. 張蕾,林曉,羅赟,汪佳易,徐川,王紅清.  果樹學(xué)報(bào). 2015(03)
[4]植物花青素苷轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 王璐,戴思蘭,金雪花,黃河,洪艷.  生物工程學(xué)報(bào). 2014(06)
[5]草莓果實(shí)基因表達(dá)與花色苷代謝的關(guān)系[J]. 肖敏,汪佳易,李皓,羅赟,林曉,陳宗玲,王紅清.  中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(01)
[6]一個(gè)調(diào)控葡萄花和果實(shí)色素形成的基因家族——MYB相關(guān)基因家族[J]. 張傳義,曹秋芬,孟玉平,周慧.  分子植物育種. 2007(S1)

博士論文
[1]森林草莓黃果表型形成機(jī)制研究[D]. 張?jiān)コ?沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]‘早紅考密斯’梨果皮色澤變異相關(guān)基因的克隆表達(dá)及PcMYB2基因功能的初步研究[D]. 楊雅楠.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3187324