發(fā)布時(shí)間：2021-05-11 21:52

　　為探討油菜尿卟啉原Ⅲ合成酶基因Bn Hemd的功能及其與葉綠素合成的關(guān)系,促進(jìn)光合效率和產(chǎn)量的提升,利用基因編輯技術(shù)對(duì)甘藍(lán)型油菜中雙11號(hào)中該基因在A9和C8染色體上的兩個(gè)拷貝進(jìn)行編輯。從中雙11號(hào)中克隆到基因Bn A09.Hemd和Bn C08.Hemd,CDS序列分別為885 bp和876 bp,均由9個(gè)外顯子構(gòu)成,各編碼294和291個(gè)氨基酸殘基。Bn Hemd蛋白性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明,甘藍(lán)型油菜中基因Bn Hemd的兩個(gè)拷貝的蛋白理化性質(zhì)十分相似,均為不穩(wěn)定蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量分別為31.97 k D和31.40 k D。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明,Bn A09.Hemd和Bn C08.Hemd分別與白菜和甘藍(lán)中的同源基因親緣關(guān)系最近。熒光定量PCR結(jié)果表明,Bn Hemd在中雙11號(hào)的根、莖、葉、花蕾、種子和角果皮中均有表達(dá),在角果皮和花蕾中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于根、莖、葉。初步的功能分析結(jié)果表明,中雙11號(hào)中該基因兩個(gè)拷貝同時(shí)編輯的植株表現(xiàn)為:葉綠素含量顯著減少、光合速率降低、生長(zhǎng)遲緩,表明甘藍(lán)型油菜BnHemd對(duì)葉綠素合成起重要作用,同時(shí)影響光合效率和生長(zhǎng)發(fā)育。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2020,42(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 甘藍(lán)型油菜BnHemd基因CDS序列的克隆
    1.3 氨基酸序列分析及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建
    1.4 基因編輯載體的構(gòu)建
    1.5 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的油菜遺傳轉(zhuǎn)化
    1.6 轉(zhuǎn)基因植株的種植
    1.7 轉(zhuǎn)基因植株的葉綠素相對(duì)含量與光合速率的測(cè)定
    1.8 實(shí)時(shí)熒光定量（qRT-PCR)
2 結(jié)果與分析
    2.1 甘藍(lán)型油菜BnHemd基因的克隆
    2.2 BnHemd蛋白性質(zhì)與結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
    2.3 BnHemd蛋白同源性比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析
    2.4 BnHemd基因的表達(dá)分析
    2.5 BnHemd初步功能分析
        2.5.1 轉(zhuǎn)化苗編輯情況檢測(cè)
        2.5.2 編輯植株的初步表型分析
3 討論與結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]菜籽油與不同食用植物油營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的比較——兼論油菜品質(zhì)的遺傳改良[J]. 熊秋芳,張效明,文靜,李興華,傅廷棟,沈金雄.  中國(guó)糧油學(xué)報(bào). 2014(06)
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[9]自主原料基地建設(shè)對(duì)保障我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的思考[J]. 殷艷,陳兆波,余健,王漢中.  生態(tài)經(jīng)濟(jì). 2010(08)
[10]我國(guó)油菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的歷史回顧與展望[J]. 王漢中.  中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2010(02)

碩士論文
[1]低溫條件下小麥返白系中尿卟啉原Ⅲ合成酶基因的表達(dá)模式與分子特征分析[D]. 梁廣旺.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3182170