發(fā)布時(shí)間：2021-04-15 14:05

　　隨著農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化進(jìn)程的加快和和土地利用率的增高,全世界土壤鹽漬化現(xiàn)象愈加嚴(yán)重,農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)與環(huán)境安全正面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。我國(guó)境內(nèi)土壤的鹽漬化問(wèn)題嚴(yán)重,同時(shí)耕地鹽漬問(wèn)題也隨之嚴(yán)峻。目前,種植耐鹽植物被認(rèn)為是改良鹽堿地最經(jīng)濟(jì)且可持續(xù)的方法。對(duì)于多樣的的土壤和氣候類型,葡萄具有較強(qiáng)的適應(yīng)性。同時(shí),葡萄耐鹽堿能力較強(qiáng)。因此,針對(duì)葡萄耐鹽的內(nèi)在生理機(jī)制進(jìn)行研究,培育高耐鹽的砧木,對(duì)國(guó)內(nèi)鹽堿地的開發(fā)和利用有重要價(jià)值。葡萄的根系可以限制有毒離子,這也是葡萄抗鹽的一個(gè)重要原因。但毒害離子如何被限制的機(jī)理尚未研究清楚。本實(shí)驗(yàn)利用耐鹽葡萄品種Crimson Seedless和鹽敏感葡萄品種1103P進(jìn)行耐鹽的機(jī)理探究。通過(guò)對(duì)該基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析以及鹽脅迫下該基因過(guò)表達(dá)植株和野生型植株在萌發(fā)期、苗期的各項(xiàng)生理指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定和比較,分析其在植物抗鹽中的作用。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1. 通過(guò)葡萄根部栓質(zhì)層特異性染色觀察確定了根部栓質(zhì)層參與葡萄拒鹽對(duì)50 m M Na Cl處理前后的Crimson Seedless和1103P根部距根尖20、30、40mm處進(jìn)行徒手切片,然后進(jìn)行染色。對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行觀察,栓質(zhì)層經(jīng)Na C... 

【文章來(lái)源】：齊魯工業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

本研究的技術(shù)路線

第二章栓質(zhì)層與葡萄耐鹽的研究8(6)將切片放到載玻片上，將其置于水的濕潤(rùn)環(huán)境，備用。2.2.3.2.染色觀察FY088對(duì)栓質(zhì)層進(jìn)行染色，在365nm激發(fā)出黃色熒光，方法參考Krishnamurthy（2009）[14]。將FY088染料加至飽和的乳酸中，在70℃水浴中溶解1h，配置成0.01%（w/v）的FY088染液。將染料滴到切片上，1小時(shí)的染色（避光）。蒸餾水沖洗3遍，使用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。2.3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.3.1.鹽脅迫對(duì)CrimsonSeedless和1103P栓質(zhì)的作用切片經(jīng)染色后發(fā)現(xiàn)，CrimsonSeedless和1103P根中均出現(xiàn)不同程度的黃色熒光，且鹽處理前后差異顯著（圖2.１和圖2.２）。在CrimsonSeedless的對(duì)照組中，距根尖20mm處切片染色觀察沒(méi)有栓質(zhì)層的熒光（圖2.１A），距根尖30mm處在外皮層開始出現(xiàn)輕微的栓質(zhì)層熒光（圖2.１C），距根尖40mm仍呈現(xiàn)較弱熒光（圖2.１E）。在50mMNaCl處理組中，距根尖20mm處切片染色觀察即出到明顯的栓質(zhì)層的熒光，且整個(gè)外皮層區(qū)域幾乎都有栓質(zhì)層的覆蓋（圖2.１B）。隨著距根尖距離的加大，該熒光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)（圖2.１D,F）。圖2.１0mM、50mMNaCl處理對(duì)葡萄品種CrimsonSeedless栓質(zhì)作用。A、C、E分別為20mm、30mm、40mm對(duì)照組切片；B、D、F分別為20mm、30mm、40mm處理組切片。

齊魯工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文9Fig2.1Effectof0mMand50mMNaCltreatmentonCrimsonSeedlesssuberinlamellaeofgrapevarietiesA,CandEwere20mm,30mmand40mmsectionsrespectively,andB,DandFwere20mm,30mmand40mmsectionsrespectively.鹽敏感品種1103P對(duì)照組根距根尖20mm即可觀察到少量栓質(zhì)層熒光（圖2.２A）。隨著距根尖距離的加大，更多外皮層細(xì)胞中檢測(cè)到栓質(zhì)層熒光（圖2.２C,E）。經(jīng)50mMNaCl處理后，栓質(zhì)層出現(xiàn)位置提前，且熒光較對(duì)照組加強(qiáng)，但這種增強(qiáng)作用遠(yuǎn)不如CrimsonSeedless中顯著（圖2.２）。以上結(jié)果表明鹽脅迫誘導(dǎo)了葡萄根外皮層栓質(zhì)層的出現(xiàn)及加厚，該誘導(dǎo)作用在CrimsonSeedless中十分明顯，而在1103P中該作用較弱。葡萄根部的栓質(zhì)層增厚現(xiàn)象可能由鹽脅迫誘發(fā)，且在CrimsonSeedless中的作用增厚更為明顯，而在1103P中熒光更弱，表明鹽脅迫后，NaCl處理確實(shí)加厚了葡萄根部栓質(zhì)層。圖2.20mM、50mMNaCl處理對(duì)葡萄品種1103P栓質(zhì)層的作用。A、C、E分別為20mm、30mm、40mm對(duì)照組切片；B、D、F分別為20mm、30mm、40mm處理組切片。Fig2.2Effectof0mMand50mMNaCltreatmenton1103PsuberinlamellaeofgrapevarietiesA,CandEwere20mm,30mmand40mmsectionsrespectively,andB,DandFwere20mm,30mmand40mmsectionsrespectively.

【參考文獻(xiàn)】：
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