低溫脅迫下福壽螺的生理反應(yīng)和差異表達(dá)基因的篩選及功能研究
發(fā)布時間:2021-04-15 13:47
福壽螺是一種外來入侵生物,原產(chǎn)于南美洲亞馬遜流域,現(xiàn)遍布于我國長江以南15個省(直轄市、自治區(qū))的各個作物區(qū),對水生作物危害嚴(yán)重。福壽螺對逆境的適應(yīng)能力極強(qiáng),對高溫、低溫和寄主等能較快地作出適應(yīng),尤其是對低溫的適應(yīng)是福壽螺向北擴(kuò)散的生物學(xué)基礎(chǔ)。因此,福壽螺低溫適應(yīng)性機(jī)理的研究已成為生物學(xué)界關(guān)注的熱點(diǎn),但目前對福壽螺低溫適應(yīng)性以及入侵?jǐn)U散的分子機(jī)理研究較少,因此對其擴(kuò)散和危害的預(yù)防還缺少理論和實(shí)踐依據(jù)。本論文以福壽螺主要入侵危害種類Pomacea canaliculata為研究對象,采用抑制消減雜交(SSH:suppression subtractive hybridization)、斑點(diǎn)雜交(dot blot hybridization),熒光定量PCR(qPCR)和RNA干擾(RNAi:RNA interference)等技術(shù)手段,從生理生化和分子生物學(xué)角度研究福壽螺對低溫脅迫的響應(yīng),為預(yù)測和有效控制該有害生物的擴(kuò)散奠定了理論基礎(chǔ)。主要結(jié)果和結(jié)論如下:1.福壽螺越冬幼螺過冷卻點(diǎn)(supercooling points,SCP)和低溫脅迫研究表明,福壽螺越冬幼螺SCP與樣本采集時的環(huán)境...
【文章來源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】:138 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-3月平均最高、最低環(huán)境溫度??Fig?2-3?Month?average?minimum?and?maximum?air?temperature??
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第二章福壽螺過冷卻點(diǎn)及耐寒性研究??福壽螺越冬幼螺低溫死亡率測定結(jié)果表明,隨著脅迫溫度的降低,福壽螺越??冬幼螺低溫脅迫后的存活率逐漸降低(圖2-4)。不同螺高幼螺在低溫環(huán)境下的存??活率具有差異。5°C處理2d,四組幼螺的存活率都在80%以上,差異不顯著;3°C??低溫處理2d,隨著幼螺螺高的增加,福壽螺幼螺的存活率逐漸升高;0°C低溫脅??迫2天,幼螺存活率隨著螺高增加而增加,H3組幼螺存活率顯著高于其他幾組幼??螺(P<0.05);在-3°C和更低的-5°C處理組,沒有福壽螺存活。??100?-1?_??9〇?-?jri?a?HI:5-10.5mm??80?-?-:?Ij.?t?QH2:?10.6-12.5mm??_?70?-?-;U:?faH3:12.6-20mm??ill??5°C?3°C?0°C?-3°C?-5°C??Incubation?lempern(urc??圖2-4不同螺高幼螺存活率??Fig?2-4.?Survivorships?oi'P.?canaliculata?juveniles?of?different?sizes?exposed?to?low??temperatures?at?various?days??2.13.2低溫馴化福壽螺幼螺死亡率??結(jié)采顯隨芥脅迫時間的延長,未經(jīng)冷馴化的福壽螺幼螺和l〇°C冷馴化??10周的福券螺幼螺(均采叱r?2013年10?U?)?/r:不丨rij低溫(5°C,?3〇C,?0°C,?-3°C??和-5。0處理卜―的存沾率逐漸卜'降(圖2-5)?i提示,經(jīng)冷馴化的福壽螺幼螺的介??活率高,a低溫耐受能力更為突
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第三章福壽螺在低溫脅迫下的抗氧化反應(yīng)研宄??3.3J.3?GPX?活性??低溫脅迫后福壽螺肝臟GPX活性變化見圖3-5。結(jié)果表明,隨著脅迫時間??的延長,福壽螺肝臟GPX活性(F=2.46xl〇2,?d.f.=5,P<0.001)先上升后下降,??再逐漸上升。在脅迫12h時活性最高,隨后降低,72h達(dá)最低,但仍明顯高于對??照(P<0.05)。??70?■??Q?Q0°C?H25°C??t?^60?'?T??3、?T?t??^5〇?■?m??bfl???T??S5?e?T?T?rt??J?40?■兩?兩?_r??^?^?:::::?::::::?:::::?:::::?玉?:::::??p3°_?______?_??雲(yún)?Hi?11?111?111?1111??0d?0.25d?0.5d?Id?3d?5d??Time/d??圖3-5低溫脅迫對福壽螺肝臟中GPX酶活力的影響??Fig.3-5?Effects?of?cold?treatment?on?the?activity?of?GPX?in?liver?of?P.canaliculata??3.3.3.4總抗氧化能力(T-AOC)????低溫脅迫對福壽螺肝臟總抗氧化能力(T-AOC)的影響見圖3-6。結(jié)果表明,隨??著脅迫時間的延長,福壽螺肝臟T-AOC水平先上升后下降,再逐漸上升。在脅??迫Id時水平最高,隨后降低,但仍明顯高于對照(P<0.05)。??0.7?■??G?0.6?■?由?E0。。??<?0.5?■?I?b25°C??0.4-?I?*??鐲?5?0.3?.?ffe?I?I?1?
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]低溫脅迫對黃姑魚(Nibea albiflora)抗氧化酶、Na+/-K+-ATP酶及Hsp70蛋白含量的影響[J]. 羅勝玉,徐冬冬,樓寶,陳睿毅,詹煒,毛國民. 海洋通報(bào). 2017(02)
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[10]溫度和鹽度對吉富品系尼羅羅非魚幼魚鰓Na+-K+-ATPase活力的聯(lián)合效應(yīng)[J]. 王海貞,王輝,強(qiáng)俊,徐跑,李瑞偉. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(03)
博士論文
[1]華山松大小蠹幼蟲耐寒生化與分子機(jī)制[D]. 王娟.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]長牡蠣免疫系統(tǒng)的發(fā)生和發(fā)育機(jī)制的初步研究[D]. 宋小瑞.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2016
[3]基于RNA-Seq解析小桐子抗冷性形成的分子機(jī)制及其關(guān)鍵基因的克隆與功能分析[D]. 王海波.云南師范大學(xué) 2015
[4]櫛孔扇貝免疫系統(tǒng)發(fā)生及母源免疫的初步研究[D]. 岳峰.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2013
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[6]小麥多子房性狀SSH文庫的構(gòu)建及其相關(guān)基因的克隆與表達(dá)[D]. 栗現(xiàn)芳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011
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[8]高溫?zé)峒は麓菩跙型煙粉虱差異表達(dá)基因的篩選和Hsps基因功能的鑒定[D]. 呂志創(chuàng).中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008
[9]應(yīng)用SSH技術(shù)研究氧化脅迫下細(xì)粒棘球蚴基因的表達(dá)[D]. 侯秋蓮.新疆大學(xué) 2008
[10]雜色鮑(Haliotis diversicolor)響應(yīng)細(xì)菌攻毒血淋巴細(xì)胞差異表達(dá)基因的研究[D]. 任洪林.廈門大學(xué) 2008
碩士論文
[1]金銀花蛀干害蟲咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)基因鑒定及表達(dá)譜分析[D]. 詹文會.貴州師范大學(xué) 2018
[2]轉(zhuǎn)錄組分析雜色鮑在高溫和缺氧應(yīng)激下免疫相關(guān)基因及通路[D]. 孫玉龍.集美大學(xué) 2017
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[6]福壽螺對逆境脅迫的行為反應(yīng)及生理生化反應(yīng)研究[D]. 韓微.廣西大學(xué) 2012
[7]低溫脅迫對斜帶石斑魚生理、生化、脂肪酸的影響[D]. 謝妙.廣東海洋大學(xué) 2012
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[9]低溫脅迫對草魚ZC-7901細(xì)胞系和淡水白鯧CBS細(xì)胞系某些細(xì)胞功能影響的研究[D]. 徐德立.浙江大學(xué) 2002
本文編號:3139454
【文章來源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】:138 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-3月平均最高、最低環(huán)境溫度??Fig?2-3?Month?average?minimum?and?maximum?air?temperature??
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第二章福壽螺過冷卻點(diǎn)及耐寒性研究??福壽螺越冬幼螺低溫死亡率測定結(jié)果表明,隨著脅迫溫度的降低,福壽螺越??冬幼螺低溫脅迫后的存活率逐漸降低(圖2-4)。不同螺高幼螺在低溫環(huán)境下的存??活率具有差異。5°C處理2d,四組幼螺的存活率都在80%以上,差異不顯著;3°C??低溫處理2d,隨著幼螺螺高的增加,福壽螺幼螺的存活率逐漸升高;0°C低溫脅??迫2天,幼螺存活率隨著螺高增加而增加,H3組幼螺存活率顯著高于其他幾組幼??螺(P<0.05);在-3°C和更低的-5°C處理組,沒有福壽螺存活。??100?-1?_??9〇?-?jri?a?HI:5-10.5mm??80?-?-:?Ij.?t?QH2:?10.6-12.5mm??_?70?-?-;U:?faH3:12.6-20mm??ill??5°C?3°C?0°C?-3°C?-5°C??Incubation?lempern(urc??圖2-4不同螺高幼螺存活率??Fig?2-4.?Survivorships?oi'P.?canaliculata?juveniles?of?different?sizes?exposed?to?low??temperatures?at?various?days??2.13.2低溫馴化福壽螺幼螺死亡率??結(jié)采顯隨芥脅迫時間的延長,未經(jīng)冷馴化的福壽螺幼螺和l〇°C冷馴化??10周的福券螺幼螺(均采叱r?2013年10?U?)?/r:不丨rij低溫(5°C,?3〇C,?0°C,?-3°C??和-5。0處理卜―的存沾率逐漸卜'降(圖2-5)?i提示,經(jīng)冷馴化的福壽螺幼螺的介??活率高,a低溫耐受能力更為突
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第三章福壽螺在低溫脅迫下的抗氧化反應(yīng)研宄??3.3J.3?GPX?活性??低溫脅迫后福壽螺肝臟GPX活性變化見圖3-5。結(jié)果表明,隨著脅迫時間??的延長,福壽螺肝臟GPX活性(F=2.46xl〇2,?d.f.=5,P<0.001)先上升后下降,??再逐漸上升。在脅迫12h時活性最高,隨后降低,72h達(dá)最低,但仍明顯高于對??照(P<0.05)。??70?■??Q?Q0°C?H25°C??t?^60?'?T??3、?T?t??^5〇?■?m??bfl???T??S5?e?T?T?rt??J?40?■兩?兩?_r??^?^?:::::?::::::?:::::?:::::?玉?:::::??p3°_?______?_??雲(yún)?Hi?11?111?111?1111??0d?0.25d?0.5d?Id?3d?5d??Time/d??圖3-5低溫脅迫對福壽螺肝臟中GPX酶活力的影響??Fig.3-5?Effects?of?cold?treatment?on?the?activity?of?GPX?in?liver?of?P.canaliculata??3.3.3.4總抗氧化能力(T-AOC)????低溫脅迫對福壽螺肝臟總抗氧化能力(T-AOC)的影響見圖3-6。結(jié)果表明,隨??著脅迫時間的延長,福壽螺肝臟T-AOC水平先上升后下降,再逐漸上升。在脅??迫Id時水平最高,隨后降低,但仍明顯高于對照(P<0.05)。??0.7?■??G?0.6?■?由?E0。。??<?0.5?■?I?b25°C??0.4-?I?*??鐲?5?0.3?.?ffe?I?I?1?
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]低溫脅迫對黃姑魚(Nibea albiflora)抗氧化酶、Na+/-K+-ATP酶及Hsp70蛋白含量的影響[J]. 羅勝玉,徐冬冬,樓寶,陳睿毅,詹煒,毛國民. 海洋通報(bào). 2017(02)
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[6]福壽螺入侵機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 郭靖,章家恩. 生態(tài)學(xué)雜志. 2014(03)
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[2]長牡蠣免疫系統(tǒng)的發(fā)生和發(fā)育機(jī)制的初步研究[D]. 宋小瑞.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2016
[3]基于RNA-Seq解析小桐子抗冷性形成的分子機(jī)制及其關(guān)鍵基因的克隆與功能分析[D]. 王海波.云南師范大學(xué) 2015
[4]櫛孔扇貝免疫系統(tǒng)發(fā)生及母源免疫的初步研究[D]. 岳峰.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2013
[5]桔小實(shí)蠅抗熱脅迫反應(yīng)的機(jī)制研究[D]. 夾福先.西南大學(xué) 2012
[6]小麥多子房性狀SSH文庫的構(gòu)建及其相關(guān)基因的克隆與表達(dá)[D]. 栗現(xiàn)芳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011
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[8]高溫?zé)峒は麓菩跙型煙粉虱差異表達(dá)基因的篩選和Hsps基因功能的鑒定[D]. 呂志創(chuàng).中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008
[9]應(yīng)用SSH技術(shù)研究氧化脅迫下細(xì)粒棘球蚴基因的表達(dá)[D]. 侯秋蓮.新疆大學(xué) 2008
[10]雜色鮑(Haliotis diversicolor)響應(yīng)細(xì)菌攻毒血淋巴細(xì)胞差異表達(dá)基因的研究[D]. 任洪林.廈門大學(xué) 2008
碩士論文
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[2]轉(zhuǎn)錄組分析雜色鮑在高溫和缺氧應(yīng)激下免疫相關(guān)基因及通路[D]. 孫玉龍.集美大學(xué) 2017
[3]中華蜜蜂抗寒性及其對南瓜授粉的研究[D]. 宋昌云.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]瓜實(shí)蠅對低溫的耐受性及其生理生化機(jī)制研究[D]. 黃娜娜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[5]外來生物福壽螺熱休克蛋白的克隆與其表達(dá)差異的研究[D]. 鄭國灣.中國計(jì)量學(xué)院 2012
[6]福壽螺對逆境脅迫的行為反應(yīng)及生理生化反應(yīng)研究[D]. 韓微.廣西大學(xué) 2012
[7]低溫脅迫對斜帶石斑魚生理、生化、脂肪酸的影響[D]. 謝妙.廣東海洋大學(xué) 2012
[8]二化螟越冬幼蟲耐寒性及其機(jī)理研究[D]. 張擁軍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[9]低溫脅迫對草魚ZC-7901細(xì)胞系和淡水白鯧CBS細(xì)胞系某些細(xì)胞功能影響的研究[D]. 徐德立.浙江大學(xué) 2002
本文編號:3139454
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