目的:現(xiàn)今在社會(huì)、經(jīng)濟(jì)等多種因素的影響下不孕癥是當(dāng)下育齡人群面臨的一大問題。隨著近年來對(duì)非編碼小RNA的深入研究,miRNA在生殖生物學(xué)中的作用逐步被發(fā)現(xiàn)。成功的受孕需要優(yōu)質(zhì)的胚胎與合適的子宮內(nèi)膜共同作用,胚胎是否能夠植入子宮內(nèi)膜決定了妊娠結(jié)局,因此母胎之間的“交流”一直是生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要研究方向之一。已發(fā)現(xiàn)在胚胎著床期,子宮內(nèi)膜miRNA存在差異表達(dá),本文尋找差異表達(dá)的miR-155、miR-146a所調(diào)控的靶基因及其表達(dá)規(guī)律,探討miRNA在子宮內(nèi)膜容受性方面的作用。方法:基于小鼠囊胚在妊娠第4天晚上著床,本實(shí)驗(yàn)建立妊娠鼠模型,分別在種植窗口期（妊娠第4、5天）和種植前期（妊娠第1天）取材;為排除胚胎的影響,建立假孕鼠模型,同樣在種植窗期（假孕第4、5天）和種植前期（假孕第1天）取材。使用Q-PCR方法檢測(cè)小鼠子宮內(nèi)膜組織中miRNA（miR-155、miR-146a）及mRNA（Sirt1、MMP16）的表達(dá)水平,Western blotting方法檢測(cè)小鼠子宮內(nèi)膜組織中Sirt1及MMP16的表達(dá)規(guī)律,免疫組化檢測(cè)MMP16蛋白在子宮內(nèi)膜組織中的定位及相對(duì)表達(dá)量。在進(jìn)行miR... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2 主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        2.1 主要試劑
        2.2 主要儀器
    3 主要實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 早孕小鼠模型建立
        3.2 假孕小鼠模型建立
        3.3 miRNA agomir體內(nèi)注射
        3.4 小鼠子宮組織收集
        3.5 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.6 microRNA合成與轉(zhuǎn)染
        3.7 組織脫水包埋
        3.8 石蠟切片
        3.9 HE染色
        3.10 免疫組化
        3.11 蛋白免疫印跡（Western Blot）
        3.12 Total RNA抽提及質(zhì)檢
        3.13 RNA逆轉(zhuǎn)錄
        3.14 實(shí)時(shí)定量PCR
        3.15 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        1.1 小鼠子宮大體觀以及HE染色
        1.2 小鼠子宮組織中miR-155及miR-146a的變化
        1.3 小鼠子宮中Srit1 以及MMP16 的表達(dá)
        1.4 miRNA agomir宮角注射后Sirt1和MMP16 的表達(dá)變化
        1.5 免疫組化檢測(cè)小鼠子宮內(nèi)膜組織中MMP16 的表達(dá)
        1.6 Q-PCR檢測(cè)小鼠子宮內(nèi)膜組織中Sirt1和MMP16 的表達(dá)
    2 人子宮內(nèi)膜細(xì)胞Sirt1和MMP16 蛋白的表達(dá)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外泌體與自身免疫病的研究進(jìn)展[J]. 于娟,張立平,孫寧,李曉軍.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2018(09)
[2]植入前遺傳學(xué)診斷及篩查技術(shù)的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制體系[J]. 黃錦,加加林,王云,喬杰.  中華生殖與避孕雜志. 2018(08)
[3]植入前遺傳學(xué)篩查在高精子DNA碎片指數(shù)不育夫婦行ICSI中的應(yīng)用[J]. 楊斯桀,李婷,劉雯,李世駿,謝楠,張琛,高選,劉曉丹.  中華男科學(xué)雜志. 2018(01)
[4]胚胎培養(yǎng)液中血管內(nèi)皮生長因子的水平及其與IVF-ET結(jié)局的關(guān)系[J]. 任建枝,蔡嘉力,韓冬梅,李萍,耿潔,馬彩輝,韓艷.  東南國防醫(yī)藥. 2016(05)
[5]MicroRNAs在早期胚胎發(fā)育中的研究進(jìn)展[J]. 江勝林,凌秀鳳,張軍強(qiáng).  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2014(09)
[6]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2011(04)



本文編號(hào)：3116017