MYB轉(zhuǎn)錄因子存在于所有真核生物中,是最具代表的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,廣泛參與植物發(fā)育、苯丙烷代謝、生物與非生物脅迫響應(yīng)、激素響應(yīng)以及細(xì)胞形態(tài)建成等過(guò)程。本研究以馬鈴薯‘青薯9號(hào)’的塊莖為實(shí)驗(yàn)材料,克隆了St MYB44、St MYB44b基因,并對(duì)其表達(dá)模式進(jìn)行分析,將構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化至同屬茄科的模式植物煙草中,分析不同蔗糖濃度下轉(zhuǎn)基因煙草的生長(zhǎng)情況,對(duì)St MYB44、St MYB44b基因進(jìn)行功能初探。主要結(jié)果如下:1、以馬鈴薯‘青薯9號(hào)’塊莖的c DNA為模板,克隆了St MYB44基因。St MYB44有2種類(lèi)型,CDS長(zhǎng)度為962 bp和953 bp,分別編碼320和317個(gè)氨基酸,為不穩(wěn)定的親水性蛋白;亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn),St MYB44定位于細(xì)胞核;系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)和多序列比對(duì)分析發(fā)現(xiàn),St MYB44與番茄MYB44的親緣關(guān)系最近,與橡膠樹(shù)的親緣關(guān)系較遠(yuǎn);啟動(dòng)子分析發(fā)現(xiàn),St MYB44含有多種調(diào)控元件,如光照、激素、脅迫響應(yīng)等;q RT-PCR分析發(fā)現(xiàn),St MYB44在花中表達(dá)最高,匍匐莖中最低;St MYB44在Me JA處理下,表達(dá)量先降低后升高,在8 h表達(dá)量最低;... 

【文章來(lái)源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

馬鈴薯塊莖的RNA

青海大學(xué)碩士學(xué)位論文第二章馬鈴薯StMYB44、StMYB44b的克隆及表達(dá)分析24圖2.1馬鈴薯塊莖的RNAM：DL2000；1-2為塊莖RNAFig.2.1RNAofPotatoTuberM:DL2000;1-2asTuberRNA2）CDS的克隆以馬鈴薯‘青薯9號(hào)’塊莖的cDNA為模板，進(jìn)行特異性擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其片段的大小，結(jié)果如圖2.2所示，獲得一條約1000bp的條帶，與預(yù)期的StMYB44片段大小基本一致。將條帶切下，經(jīng)過(guò)回收、連接、轉(zhuǎn)化、篩菌并送生工測(cè)序后，將測(cè)序結(jié)果與NCBI中的原基因序列使用DNAMAN進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，StMYB44存在2種類(lèi)型，分別命名為StMYB44-1和StMYB44-2。圖2.2StMYB44基因的CDS克隆M：DL2000；1：StMYB44

青海大學(xué)碩士學(xué)位論文第二章馬鈴薯StMYB44、StMYB44b的克隆及表達(dá)分析25Fig2.2StMYB44geneCDScloningM：DL2000；1：StMYB442.4.1.2馬鈴薯StMYB44的生物信息學(xué)分析1）馬鈴薯StMYB44基因的序列分析如圖2.3所示，StMYB44-1與原序列（XM_006367359.2）一樣，CDS長(zhǎng)度為962bp，編碼的蛋白質(zhì)含有320個(gè)氨基酸，而StMYB44-2發(fā)生了11處堿基改變和9處堿基缺失，CDS長(zhǎng)度為953bp，編碼的蛋白質(zhì)含有317個(gè)氨基酸。StMYB44-1和StMYB44-2均含有兩個(gè)保守的MYB結(jié)構(gòu)域，為典型的R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子。圖2.3-1StMYB44基因的序列比對(duì)圖Fig2.3-1SequencealignmentofStMYB44gene

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3113799