[目的]1、對(duì)RVVC和VVC患者的致病假絲酵母菌進(jìn)行菌種鑒定,分析菌種分布情況;2、對(duì)致病假絲酵母菌進(jìn)行基因分型,分析菌株的基因型分布及與其來源的關(guān)系:3、對(duì)致病假絲酵母菌進(jìn)行3種抗真菌藥物（氟康唑、兩性霉素B、伊曲康唑）的體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn),比較菌株對(duì)3種抗真菌藥物的敏感性差異,分析不同菌株的藥物敏感性與其來源及基因型間的關(guān)系;4、測(cè)定致病假絲酵母菌的分泌型天冬氨酸蛋白酶、細(xì)胞外磷脂酶活性及其Sap-2、PLB-1的表達(dá)量,分析致病假絲酵母菌的侵襲力相關(guān)因子與其來源、基因型及藥敏情況之間的關(guān)系。[方法]1、所有致病菌株均取自我院婦產(chǎn)科門診外陰陰道假絲酵母菌病患者,其中RWC致病菌株95株,VVC致病菌株223株,均分離純化后先用科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基、安圖念珠菌顯色培養(yǎng)基初步鑒定菌種,最后用生物梅里埃VITEK 2系統(tǒng)鑒定明確菌種;2、提取樣本的基因組DNA,根據(jù)樣本255rDNA基因編碼區(qū)可轉(zhuǎn)座I型內(nèi)含子的有無及大小,通過PCR技術(shù)對(duì)270株致病白假絲酵母菌進(jìn)行基因分型;3、采用美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究院（Clinical And Laboratory Standards In... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基鑒定結(jié)果（本實(shí)驗(yàn)部分菌株）??注：Ａ為白假絲酵母菌；Ｂ為光滑假絲酵母菌；Ｃ為克柔假絲酵母菌；Ｄ為熱帶假??

２．３．３安圖顯色培養(yǎng)基鑒定??挑取制備的假絲酵母菌新鮮單菌落均勻接種于安圖顯色培養(yǎng)基平板上，置于??３７°Ｃ恒溫培養(yǎng)箱孵育４８小時(shí)，根據(jù)菌落不同顏色判定假絲酵母苗菌種。顯色培養(yǎng)??基上綠色菌落鑒定為白假絲酵母菌，奶油色到白色菌落鑒定為光滑假絲酵母菌，??紫色、模糊有微毛的菌落鑒定為克柔假絲酵母菌，灰藍(lán)色到鐵藍(lán)色菌落鑒定為熱??帶假絲酵母菌。（見圖２、圖３）??／ＪＬ?－ＪＬ＼?Ｍ??＼?ＪＶ?，??，Ｃ?＇?〇??圖２安圖念珠菌顯色平板標(biāo)準(zhǔn)鑒定結(jié)果（安圖生物提供）??注：Ａ為白假絲酵母菌；Ｂ為光滑假絲酵母菌；Ｃ為克柔假絲酵母菌；Ｄ為熱帶假絲酵母菌??圖３安圖念珠菌顯色平板鑒定結(jié)果（本實(shí)驗(yàn)部分菌株）??注：Ａ為白假絲酵母菌；Ｂ為光滑假絲酵母菌；Ｃ為克柔假絲酵母菌；Ｄ為熱帶假??絲酵母菌；Ｅ為其它假絲酵母菌??１４??

２．３．３安圖顯色培養(yǎng)基鑒定??挑取制備的假絲酵母菌新鮮單菌落均勻接種于安圖顯色培養(yǎng)基平板上，置于??３７°Ｃ恒溫培養(yǎng)箱孵育４８小時(shí)，根據(jù)菌落不同顏色判定假絲酵母苗菌種。顯色培養(yǎng)??基上綠色菌落鑒定為白假絲酵母菌，奶油色到白色菌落鑒定為光滑假絲酵母菌，??紫色、模糊有微毛的菌落鑒定為克柔假絲酵母菌，灰藍(lán)色到鐵藍(lán)色菌落鑒定為熱??帶假絲酵母菌。（見圖２、圖３）??／ＪＬ?－ＪＬ＼?Ｍ??＼?ＪＶ?，??，Ｃ?＇?〇??圖２安圖念珠菌顯色平板標(biāo)準(zhǔn)鑒定結(jié)果（安圖生物提供）??注：Ａ為白假絲酵母菌；Ｂ為光滑假絲酵母菌；Ｃ為克柔假絲酵母菌；Ｄ為熱帶假絲酵母菌??圖３安圖念珠菌顯色平板鑒定結(jié)果（本實(shí)驗(yàn)部分菌株）??注：Ａ為白假絲酵母菌；Ｂ為光滑假絲酵母菌；Ｃ為克柔假絲酵母菌；Ｄ為熱帶假??絲酵母菌；Ｅ為其它假絲酵母菌??１４??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外陰陰道假絲酵母菌病病原菌菌種分布及耐藥性分析[J]. 曾文,華麗燕,歐陽凱,麥榮嘉.  現(xiàn)代醫(yī)院. 2018(07)
[2]復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病診治研究進(jìn)展[J]. 羅蘭蘭,李衛(wèi),陳娟.  現(xiàn)代醫(yī)學(xué). 2017(12)
[3]龍膽瀉肝湯氯仿提取物抑制白念珠菌VVC臨床株水解酶活性[J]. 濮燕屏,王霞,馮鑫,邵菁,吳大強(qiáng),汪天明,汪長中.  中國中藥雜志. 2017(21)
[4]多藥耐藥外排泵ABC基因?qū)Π咨俳z酵母菌及克柔假絲酵母菌耐藥性產(chǎn)生的研究[J]. 楊靜,奚志琴,張謹(jǐn)宇,馬彥,喬祖莎,王一如,陳晉宇,馮文莉.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2016(19)
[5]口腔白念珠菌3種致病相關(guān)分泌型水解酶檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 孫康德,張家勝,陳旭,虞中敏,陳福祥.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2016(05)
[6]陰道白假絲酵母菌25SrDNA基因分型與藥物敏感性的關(guān)系[J]. 張旭,劉朝暉.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2016 (04)
[7]中、美、加外陰陰道假絲酵母菌病診治指南解讀[J]. 歐陽振波,黃志霞,袁瑞瑩,張秋實(shí).  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2016(01)
[8]假絲酵母菌性外陰陰道病不同基因型致病菌株藥物敏感性比較[J]. 祁文瑾,李白鸞,錢源.  中國全科醫(yī)學(xué). 2016(02)
[9]不同基因型陰道白假絲酵母菌細(xì)胞外蛋白水解酶和磷脂酶活性的研究[J]. 張旭,劉魏,宋琦,劉朝暉.  實(shí)用婦產(chǎn)科雜志. 2011(06)
[10]白念珠菌毒力因子的研究進(jìn)展[J]. 陳雪蓉,肖敦振.  中國婦幼保健. 2007(32)

碩士論文
[1]熱帶假絲酵母菌毒力表型特征及其編碼基因表達(dá)水平研究[D]. 于栓寶.中國疾病預(yù)防控制中心 2016
[2]復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病致病菌ERG耐藥機(jī)制研究[D]. 凌開建.昆明醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3099801