中華絨螯蟹脂肪酸代謝相關(guān)基因的克隆及表達(dá)分析
發(fā)布時(shí)間:2021-03-19 12:08
中華絨螯蟹是我國(guó)重要的水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)物種之一。該物種在全國(guó)廣泛養(yǎng)殖,2017年全國(guó)總產(chǎn)量達(dá)道75萬(wàn)噸。肝胰腺是河蟹脂類儲(chǔ)存和代謝的主要場(chǎng)所,通常含有30-80%的脂肪含量,是研究甲殼動(dòng)物脂質(zhì)代謝的良好模型。近年來(lái)水產(chǎn)動(dòng)物的脂質(zhì)代謝機(jī)制是一項(xiàng)研究熱點(diǎn),河蟹在脂質(zhì)代謝研究方面也取得了很大進(jìn)展,而關(guān)于河蟹脂肪酸β-氧化和膽固醇代謝相關(guān)基因方面的研究鮮有報(bào)道。因此,脂肪酸β-氧化關(guān)鍵基因方面,本研究驗(yàn)證了河蟹的三個(gè)CPT亞型的ORF,分析了它們的分子特征和組織表達(dá)模式,并探究了植物油替代飼料中的魚(yú)油對(duì)中華絨螯蟹的肝胰腺中CPT-mRNA表達(dá)的影響。膽固醇代謝關(guān)鍵基因方面,驗(yàn)證了河蟹SOAT1的ORF,然后分析了該基因的分子特性和組織分布,接著研究了不同卵巢發(fā)育時(shí)期主要組織SOAT1表達(dá)和膽固醇含量的變化規(guī)律,最后通過(guò)酵母轉(zhuǎn)化方法探究SOAT1的功能。具體的研究結(jié)果如下:1.中華絨螯蟹CPT家族基因的克隆及表達(dá)分析肉堿棕櫚;D(zhuǎn)移酶(CPT)家族由CPT1和CPT2組成,它們轉(zhuǎn)運(yùn)長(zhǎng)鏈脂肪酸進(jìn)入線粒體以進(jìn)行β氧化。本研究中,從中華絨螯蟹中獲得了CPT三個(gè)亞型(CPT 1α、CPT 1β和CPT 2)的完...
【文章來(lái)源】:上海海洋大學(xué)上海市
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
CPT1、CACT和CPT2聯(lián)合作用將;o酶A轉(zhuǎn)移到線粒體[3]
圖 2 人體內(nèi) ACAT 的作用[54]Fig.2 Role of humanACAT in vivo和分子特性993 鑒定出第一個(gè) ACAT 基因[56],ACAT 家二酰甘油;D(zhuǎn)移酶 DGAT1[62]。這些酶是膜結(jié)族的創(chuàng)始成員。MBOATs 是多跨膜酶,利用長(zhǎng)物質(zhì)作為它們的底物[63]。 這些酶在一長(zhǎng)段疏H),在一段適度親水的殘基內(nèi)含有近似不變的天 DGAT1 外,其他 MBOATs 還包括生長(zhǎng)素辛酰基磷脂;D(zhuǎn)移酶[67]。人 ACAT1 位于兩條不同每條染色體都含有一個(gè)特別的啟動(dòng)子:P1,與外上;P7,與可選的長(zhǎng)外顯子 Xa 相鄰,位于 7 號(hào)
圖 1-2 CPT 氨基酸序列的 NJ 進(jìn)化樹(shù)Fig.1-2 The neighbor-joining phylogenetic tree for CPTsCPTs 在中華絨螯蟹各組織中的表達(dá)分析種 CPT 亞型在雄蟹和雌蟹所有檢測(cè)的組織中均有分布,包括血淋巴、肝胰腺、胃、腦神經(jīng)、胸神經(jīng)、三角膜、納精囊、副性腺或卵巢,但同亞型之間的表達(dá)量存在差異(圖 1-3。就雄蟹而言,CPT 1α 在肝胰高,其它組織 CPT 1α 的表達(dá)水平顯著低于該組織(P < 0.05)。然而1β 最高的表達(dá)量在肌肉和心臟中,隨后是肝胰腺、腸道和腦神經(jīng)。特胰腺,不同組織中的 CPT 1β 表達(dá)量均高于 CPT 1α 和 CPT2。此外,腺中的表達(dá)量是最高的,而且顯著高于其它組織(P < 0.05)。因此,分布與 CPT 1α 的相似。雌蟹而言,CPT1α 的表達(dá)量在腸道中最高,其次是肝胰腺,在胃中的組織中 CPT1β 的表達(dá)量在三種亞型中是最高的,這與在雄蟹中的相似
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]酯酰輔酶A:膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶的研究進(jìn)展[J]. 王曉微,高明明. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2018(07)
[2]育肥飼料中混合植物油替代魚(yú)油對(duì)中華絨螯蟹成體雄蟹性腺發(fā)育、脂質(zhì)代謝、抗氧化及免疫性能的影響[J]. 趙磊,龍曉文,吳旭干,劉澤華,何杰,成永旭. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(02)
[3]中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)野生和養(yǎng)殖蟹種對(duì)池塘養(yǎng)殖成蟹可食率和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響研究[J]. 何杰,吳旭干,龍曉文,趙恒亮,姜曉東,王幼鵬,成永旭. 海洋與湖沼. 2016(01)
[4]不同脂肪源對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能、機(jī)體成分、血清生化指標(biāo)、體組織脂肪酸組成及脂質(zhì)代謝的影響[J]. 張媛媛,劉波,戈賢平,劉文斌,謝駿,高啟平,顧夕章. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2012(07)
[5]鱸魚(yú)CPTⅠ基因cDNA克隆及表達(dá)分析[J]. 鄭偉賢,錢(qián)云霞,童麗娟. 生物學(xué)雜志. 2012(03)
[6]中華絨螯蟹性腺發(fā)育期脂肪合成酶活性變化研究[J]. 劉立鶴,吳建開(kāi),周永奎,鄭石軒,董愛(ài)華,陳立僑. 水利漁業(yè). 2005(06)
[7]Enhancement of human ACAT1 gene expression to promote the macrophage-derived foam cell formation by dexamethasone[J]. Li YANG, Jin Bo YANG, Jia CHEN, Guang Yao YU, Pei ZHOU, Lei LEI, Zhen Zhen WANG, Catherine CY CHANG, XinYing YANG, Ta Yuan CHANG, Bo Liang LI State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, 320 Yueyang Road Shanghai 200031, China. Department of Biochemistry, Dartmouth Medical School, Hanover, NH 03756; USA.. Cell Research. 2004(04)
[8]不同階段中華絨螯蟹肝胰腺的脂類及脂肪酸組成[J]. 成永旭,堵南山,賴偉. 動(dòng)物學(xué)報(bào). 1998(04)
[9]中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)雌性生殖系統(tǒng)的組織學(xué)研究[J]. 薛魯征,堵南山,賴偉. 華東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 1987(03)
碩士論文
[1]固城湖中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)可食部位營(yíng)養(yǎng)組成與代謝的性別差異[D]. 陳志強(qiáng).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]黑曲霉中肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶基因功能的研究[D]. 陳泓.天津科技大學(xué) 2014
本文編號(hào):3089540
【文章來(lái)源】:上海海洋大學(xué)上海市
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
CPT1、CACT和CPT2聯(lián)合作用將;o酶A轉(zhuǎn)移到線粒體[3]
圖 2 人體內(nèi) ACAT 的作用[54]Fig.2 Role of humanACAT in vivo和分子特性993 鑒定出第一個(gè) ACAT 基因[56],ACAT 家二酰甘油;D(zhuǎn)移酶 DGAT1[62]。這些酶是膜結(jié)族的創(chuàng)始成員。MBOATs 是多跨膜酶,利用長(zhǎng)物質(zhì)作為它們的底物[63]。 這些酶在一長(zhǎng)段疏H),在一段適度親水的殘基內(nèi)含有近似不變的天 DGAT1 外,其他 MBOATs 還包括生長(zhǎng)素辛酰基磷脂;D(zhuǎn)移酶[67]。人 ACAT1 位于兩條不同每條染色體都含有一個(gè)特別的啟動(dòng)子:P1,與外上;P7,與可選的長(zhǎng)外顯子 Xa 相鄰,位于 7 號(hào)
圖 1-2 CPT 氨基酸序列的 NJ 進(jìn)化樹(shù)Fig.1-2 The neighbor-joining phylogenetic tree for CPTsCPTs 在中華絨螯蟹各組織中的表達(dá)分析種 CPT 亞型在雄蟹和雌蟹所有檢測(cè)的組織中均有分布,包括血淋巴、肝胰腺、胃、腦神經(jīng)、胸神經(jīng)、三角膜、納精囊、副性腺或卵巢,但同亞型之間的表達(dá)量存在差異(圖 1-3。就雄蟹而言,CPT 1α 在肝胰高,其它組織 CPT 1α 的表達(dá)水平顯著低于該組織(P < 0.05)。然而1β 最高的表達(dá)量在肌肉和心臟中,隨后是肝胰腺、腸道和腦神經(jīng)。特胰腺,不同組織中的 CPT 1β 表達(dá)量均高于 CPT 1α 和 CPT2。此外,腺中的表達(dá)量是最高的,而且顯著高于其它組織(P < 0.05)。因此,分布與 CPT 1α 的相似。雌蟹而言,CPT1α 的表達(dá)量在腸道中最高,其次是肝胰腺,在胃中的組織中 CPT1β 的表達(dá)量在三種亞型中是最高的,這與在雄蟹中的相似
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]酯酰輔酶A:膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶的研究進(jìn)展[J]. 王曉微,高明明. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2018(07)
[2]育肥飼料中混合植物油替代魚(yú)油對(duì)中華絨螯蟹成體雄蟹性腺發(fā)育、脂質(zhì)代謝、抗氧化及免疫性能的影響[J]. 趙磊,龍曉文,吳旭干,劉澤華,何杰,成永旭. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(02)
[3]中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)野生和養(yǎng)殖蟹種對(duì)池塘養(yǎng)殖成蟹可食率和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響研究[J]. 何杰,吳旭干,龍曉文,趙恒亮,姜曉東,王幼鵬,成永旭. 海洋與湖沼. 2016(01)
[4]不同脂肪源對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能、機(jī)體成分、血清生化指標(biāo)、體組織脂肪酸組成及脂質(zhì)代謝的影響[J]. 張媛媛,劉波,戈賢平,劉文斌,謝駿,高啟平,顧夕章. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2012(07)
[5]鱸魚(yú)CPTⅠ基因cDNA克隆及表達(dá)分析[J]. 鄭偉賢,錢(qián)云霞,童麗娟. 生物學(xué)雜志. 2012(03)
[6]中華絨螯蟹性腺發(fā)育期脂肪合成酶活性變化研究[J]. 劉立鶴,吳建開(kāi),周永奎,鄭石軒,董愛(ài)華,陳立僑. 水利漁業(yè). 2005(06)
[7]Enhancement of human ACAT1 gene expression to promote the macrophage-derived foam cell formation by dexamethasone[J]. Li YANG, Jin Bo YANG, Jia CHEN, Guang Yao YU, Pei ZHOU, Lei LEI, Zhen Zhen WANG, Catherine CY CHANG, XinYing YANG, Ta Yuan CHANG, Bo Liang LI State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, 320 Yueyang Road Shanghai 200031, China. Department of Biochemistry, Dartmouth Medical School, Hanover, NH 03756; USA.. Cell Research. 2004(04)
[8]不同階段中華絨螯蟹肝胰腺的脂類及脂肪酸組成[J]. 成永旭,堵南山,賴偉. 動(dòng)物學(xué)報(bào). 1998(04)
[9]中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)雌性生殖系統(tǒng)的組織學(xué)研究[J]. 薛魯征,堵南山,賴偉. 華東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 1987(03)
碩士論文
[1]固城湖中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)可食部位營(yíng)養(yǎng)組成與代謝的性別差異[D]. 陳志強(qiáng).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]黑曲霉中肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶基因功能的研究[D]. 陳泓.天津科技大學(xué) 2014
本文編號(hào):3089540
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