白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達和酶學分析
發(fā)布時間:2021-03-15 10:48
將源于白囊耙齒菌(Irpex lacteus)的一種錳過氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)基因進行密碼子優(yōu)化后連接于表達載體pET-28a,并在E.coli BL21中表達,重組錳過氧化物酶經(jīng)鎳離子親和層析分離得到純酶,其分子質量和比酶活分別為43 ku和24 U/mg。酶學性質研究表明,重組錳過氧化物酶的最適反應溫度為40℃,最適反應pH值為3.0,且該重組酶在20℃~50℃、 pH 2.5~3.5范圍內穩(wěn)定性較好。當添加的金屬離子濃度為10 mmol/L,Na+、Ca2+和Mg2+對重組酶酶活有促進作用;當添加的金屬離子濃度為5 mmol/L時,除Ca2+外,其他金屬離子均能抑制重組酶的活力;Fe2+、Cu2+在10、5和1 mmol/L離子濃度下均對重組酶有明顯的抑制作用。重組錳過氧化物酶在48 h內可以有效降解玉米秸稈中35.8%及麩皮中27.3%的木質素,降解效果顯著。
【文章來源】:生物學雜志. 2020,37(06)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
PCR擴增得到的pET-28a和MnP線性化的電泳圖以及菌液PCR的結果
重組蛋白MnP表達及純化的SDS-PAGE鑒定
溫度對重組MnP酶活力和熱穩(wěn)定性的影響
【參考文獻】:
期刊論文
[1]重組人溶菌酶在畢赤酵母中的誘導表達及活性研究[J]. 李浩杰,楊雪珍,藍文康,張偉崇,王曄,何蘭花,林樹茂,劉燊,張輝華. 家畜生態(tài)學報. 2019(10)
[2]木質素降解酶系染料降解原理概述[J]. 郭玉敏,代廣輝. 河北建筑工程學院學報. 2019(02)
[3]范氏法與王玉萬法植物纖維素測定方法探討[J]. 李朝英,鄭路,莫世宇. 浙江農(nóng)業(yè)科學. 2019(03)
[4]誘導劑對乳白耙齒菌產(chǎn)MnP活性影響研究[J]. 何平,張健,池玉杰. 江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(05)
[5]白囊耙齒菌產(chǎn)錳過氧化物酶條件優(yōu)化及其對染料的脫色[J]. 羅鑫,覃育賢,于存. 菌物學報. 2018(09)
[6]微生物遺傳轉化篩選標記及其生物安全性的研究進展[J]. 樂易林,孫宇,王洪成,邵蔚藍. 微生物學通報. 2016(08)
[7]白腐真菌產(chǎn)錳過氧化物酶的研究[J]. 余梅,阮小文,譚麗泉,盧玉娟. 化學與生物工程. 2014(11)
[8]錳過氧化物酶的生物信息學分析[J]. 張娛,曾光明,劉利鋒. 廣州化工. 2012(11)
[9]高活力錳過氧化物酶菌株的選育及其酶學性質初探[J]. 白娜,頓寶慶,宋立立,奚亞軍,李桂英,路明. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2010(11)
[10]金屬離子對纖維素酶活力影響的研究[J]. 李德瑩,龔大春,田毅紅,余燕. 釀酒科技. 2009(06)
博士論文
[1]粟酒裂殖酵母生物安全性高效表達載體的構建及優(yōu)化[D]. 王洪成.南京師范大學 2013
本文編號:3084052
【文章來源】:生物學雜志. 2020,37(06)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
PCR擴增得到的pET-28a和MnP線性化的電泳圖以及菌液PCR的結果
重組蛋白MnP表達及純化的SDS-PAGE鑒定
溫度對重組MnP酶活力和熱穩(wěn)定性的影響
【參考文獻】:
期刊論文
[1]重組人溶菌酶在畢赤酵母中的誘導表達及活性研究[J]. 李浩杰,楊雪珍,藍文康,張偉崇,王曄,何蘭花,林樹茂,劉燊,張輝華. 家畜生態(tài)學報. 2019(10)
[2]木質素降解酶系染料降解原理概述[J]. 郭玉敏,代廣輝. 河北建筑工程學院學報. 2019(02)
[3]范氏法與王玉萬法植物纖維素測定方法探討[J]. 李朝英,鄭路,莫世宇. 浙江農(nóng)業(yè)科學. 2019(03)
[4]誘導劑對乳白耙齒菌產(chǎn)MnP活性影響研究[J]. 何平,張健,池玉杰. 江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(05)
[5]白囊耙齒菌產(chǎn)錳過氧化物酶條件優(yōu)化及其對染料的脫色[J]. 羅鑫,覃育賢,于存. 菌物學報. 2018(09)
[6]微生物遺傳轉化篩選標記及其生物安全性的研究進展[J]. 樂易林,孫宇,王洪成,邵蔚藍. 微生物學通報. 2016(08)
[7]白腐真菌產(chǎn)錳過氧化物酶的研究[J]. 余梅,阮小文,譚麗泉,盧玉娟. 化學與生物工程. 2014(11)
[8]錳過氧化物酶的生物信息學分析[J]. 張娛,曾光明,劉利鋒. 廣州化工. 2012(11)
[9]高活力錳過氧化物酶菌株的選育及其酶學性質初探[J]. 白娜,頓寶慶,宋立立,奚亞軍,李桂英,路明. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2010(11)
[10]金屬離子對纖維素酶活力影響的研究[J]. 李德瑩,龔大春,田毅紅,余燕. 釀酒科技. 2009(06)
博士論文
[1]粟酒裂殖酵母生物安全性高效表達載體的構建及優(yōu)化[D]. 王洪成.南京師范大學 2013
本文編號:3084052
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