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白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達和酶學分析

發(fā)布時間:2021-03-15 10:48
  將源于白囊耙齒菌(Irpex lacteus)的一種錳過氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)基因進行密碼子優(yōu)化后連接于表達載體pET-28a,并在E.coli BL21中表達,重組錳過氧化物酶經(jīng)鎳離子親和層析分離得到純酶,其分子質量和比酶活分別為43 ku和24 U/mg。酶學性質研究表明,重組錳過氧化物酶的最適反應溫度為40℃,最適反應pH值為3.0,且該重組酶在20℃~50℃、 pH 2.5~3.5范圍內穩(wěn)定性較好。當添加的金屬離子濃度為10 mmol/L,Na+、Ca2+和Mg2+對重組酶酶活有促進作用;當添加的金屬離子濃度為5 mmol/L時,除Ca2+外,其他金屬離子均能抑制重組酶的活力;Fe2+、Cu2+在10、5和1 mmol/L離子濃度下均對重組酶有明顯的抑制作用。重組錳過氧化物酶在48 h內可以有效降解玉米秸稈中35.8%及麩皮中27.3%的木質素,降解效果顯著。 

【文章來源】:生物學雜志. 2020,37(06)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達和酶學分析


PCR擴增得到的pET-28a和MnP線性化的電泳圖以及菌液PCR的結果

白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達和酶學分析


重組蛋白MnP表達及純化的SDS-PAGE鑒定

白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達和酶學分析


溫度對重組MnP酶活力和熱穩(wěn)定性的影響

【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]粟酒裂殖酵母生物安全性高效表達載體的構建及優(yōu)化[D]. 王洪成.南京師范大學 2013



本文編號:3084052

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