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白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達(dá)和酶學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-03-15 10:48
  將源于白囊耙齒菌(Irpex lacteus)的一種錳過氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化后連接于表達(dá)載體pET-28a,并在E.coli BL21中表達(dá),重組錳過氧化物酶經(jīng)鎳離子親和層析分離得到純酶,其分子質(zhì)量和比酶活分別為43 ku和24 U/mg。酶學(xué)性質(zhì)研究表明,重組錳過氧化物酶的最適反應(yīng)溫度為40℃,最適反應(yīng)pH值為3.0,且該重組酶在20℃~50℃、 pH 2.5~3.5范圍內(nèi)穩(wěn)定性較好。當(dāng)添加的金屬離子濃度為10 mmol/L,Na+、Ca2+和Mg2+對(duì)重組酶酶活有促進(jìn)作用;當(dāng)添加的金屬離子濃度為5 mmol/L時(shí),除Ca2+外,其他金屬離子均能抑制重組酶的活力;Fe2+、Cu2+在10、5和1 mmol/L離子濃度下均對(duì)重組酶有明顯的抑制作用。重組錳過氧化物酶在48 h內(nèi)可以有效降解玉米秸稈中35.8%及麩皮中27.3%的木質(zhì)素,降解效果顯著。 

【文章來源】:生物學(xué)雜志. 2020,37(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【部分圖文】:

白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達(dá)和酶學(xué)分析


PCR擴(kuò)增得到的pET-28a和MnP線性化的電泳圖以及菌液PCR的結(jié)果

白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達(dá)和酶學(xué)分析


重組蛋白MnP表達(dá)及純化的SDS-PAGE鑒定

白囊耙齒菌錳過氧化物酶基因的表達(dá)和酶學(xué)分析


溫度對(duì)重組MnP酶活力和熱穩(wěn)定性的影響

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重組人溶菌酶在畢赤酵母中的誘導(dǎo)表達(dá)及活性研究[J]. 李浩杰,楊雪珍,藍(lán)文康,張偉崇,王曄,何蘭花,林樹茂,劉燊,張輝華.  家畜生態(tài)學(xué)報(bào). 2019(10)
[2]木質(zhì)素降解酶系染料降解原理概述[J]. 郭玉敏,代廣輝.  河北建筑工程學(xué)院學(xué)報(bào). 2019(02)
[3]范氏法與王玉萬法植物纖維素測(cè)定方法探討[J]. 李朝英,鄭路,莫世宇.  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(03)
[4]誘導(dǎo)劑對(duì)乳白耙齒菌產(chǎn)MnP活性影響研究[J]. 何平,張健,池玉杰.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(05)
[5]白囊耙齒菌產(chǎn)錳過氧化物酶條件優(yōu)化及其對(duì)染料的脫色[J]. 羅鑫,覃育賢,于存.  菌物學(xué)報(bào). 2018(09)
[6]微生物遺傳轉(zhuǎn)化篩選標(biāo)記及其生物安全性的研究進(jìn)展[J]. 樂易林,孫宇,王洪成,邵蔚藍(lán).  微生物學(xué)通報(bào). 2016(08)
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[8]錳過氧化物酶的生物信息學(xué)分析[J]. 張娛,曾光明,劉利鋒.  廣州化工. 2012(11)
[9]高活力錳過氧化物酶菌株的選育及其酶學(xué)性質(zhì)初探[J]. 白娜,頓寶慶,宋立立,奚亞軍,李桂英,路明.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(11)
[10]金屬離子對(duì)纖維素酶活力影響的研究[J]. 李德瑩,龔大春,田毅紅,余燕.  釀酒科技. 2009(06)

博士論文
[1]粟酒裂殖酵母生物安全性高效表達(dá)載體的構(gòu)建及優(yōu)化[D]. 王洪成.南京師范大學(xué) 2013



本文編號(hào):3084052

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