第一部分絞股藍(lán)轉(zhuǎn)錄組測序挖掘三萜合成通路及相關(guān)酶基因目的:通過對絞股藍(lán)（Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino,G.pentaphyllum）的根、莖和葉三個部位分別進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序分析,挖掘絞股藍(lán)三萜合成通路及相關(guān)酶基因。使用q PCR技術(shù)檢驗絞股藍(lán)三萜合成通路上呈現(xiàn)部位差異表達(dá)的法呢基焦磷酸合酶（Farnesyl diphosphate synthase,FPS）、鯊烯合酶（Squalene synthase,SS）和鯊烯環(huán)氧化酶（Squalene epoxidase,SE）基因在轉(zhuǎn)錄后水平的表達(dá),驗證它們在轉(zhuǎn)錄組測序分析中的表達(dá)規(guī)律。同時,使用紫外分光光度法測量三萜皂苷在根、莖和葉三個部位的含量差異,進(jìn)一步驗證FPS、SS和SE在根、莖和葉的表達(dá)差異。最后總結(jié)絞股藍(lán)FPS、SS和SE表達(dá)的部位差異性規(guī)律與三萜皂苷含量差異分布規(guī)律,為進(jìn)一步研究絞股藍(lán)三萜合成相關(guān)基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制做鋪墊。方法:分別提取絞股藍(lán)根、莖和葉三個部位的RNA并進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序反應(yīng),結(jié)合KEGG通路數(shù)據(jù)庫查找注釋文件當(dāng)中的絞股藍(lán)三萜合成關(guān)鍵酶基因FPS、SS和SE,尋找三個基因的... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

絞股藍(lán)根、莖和葉三部位RNA電泳圖(1-3分圖中，M泳道代表DL2000的DNAMaker，泳道1-9分別為葉1、葉2、莖2、葉3、莖3、莖1、根1、根2和根3的RNA；4分圖是TaKaRaDL2000

絞股藍(lán)三萜合成通路圖(英文縮寫注釋見附錄表1-1)

絞股藍(lán)根莖葉的FPS，SS和SE表達(dá)量RPKM值(G，J和Y分別代表絞股藍(lán)的根，莖和葉；

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]HPLC法同時測定絞股藍(lán)藥材中8種皂苷的含量[J]. 蔣慧宣,陳粲文,徐茂保,張現(xiàn)濤.  廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2018(02)
[2]絞股藍(lán)有效成分的藥理作用研究進(jìn)展[J]. 鮑鳳霞,陶泠雪,章海燕.  中國新藥與臨床雜志. 2018(01)
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[4]β-淀粉樣蛋白前體蛋白裂解酶1相關(guān)干預(yù)策略在阿爾采末病治療的研究進(jìn)展[J]. 黃娟,楊小惠,柳源,吳芹,石京山.  中國新藥與臨床雜志. 2017(07)
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