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蠟梅花香相關基因BEAT的克隆和功能初步探究

發(fā)布時間:2021-03-10 12:18
  蠟梅(Chimonanthus praecox L.)冬天開花,香氣怡人,廣泛應用于切花和園林種植。芳香是蠟梅最為重要的觀賞特征,其中乙酸芐酯是蠟梅的主要香氣成分之一。本實驗室前期對花香物質(zhì)測定,發(fā)現(xiàn)芳香的H93株系乙酸芐酯含量較高,而無香的SW001株系不含乙酸芐酯。本文在實驗室前期基礎上,以蠟梅芳香的H93和無香的SW001株系為研究材料,比較2個材料3個時期乙酸芐酯含量的差異。篩選轉(zhuǎn)錄組庫中控制乙酸芐酯合成的差異表達基因CpBEAT5、CpBEAT8,通過實時定量表達分析,結合乙酸芐酯釋放量差異,尋找基因表達與花香釋放之間的聯(lián)系。另外將蠟梅CpBEAT5、CpBEAT8轉(zhuǎn)入早花煙草,初步探究該基因的功能。主要研究結果如下:1.芳香株系H93中能檢測到乙酸芐酯,但在無香株系SW001任何花期都未發(fā)現(xiàn)揮發(fā)物中有乙酸芐酯。在H93中不同花期乙酸芐酯的含量變化趨勢與底物苯甲醇的含量變化趨勢一致,在盛花期兩者出現(xiàn)了最大值,與蠟梅花香總揮發(fā)物在盛花期達到最高峰現(xiàn)象相同。而在SW001中雖沒檢測到乙酸芐酯,但在末花期揮發(fā)物中存在微量的苯甲醇。2.經(jīng)蛋白序列比對,CpBEAT5、CpBEAT8在... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

蠟梅花香相關基因BEAT的克隆和功能初步探究


花朵釋放揮發(fā)性化合物種類可劃分為三大類:萜類化合物,苯丙素/苯環(huán)形和脂肪酸衍生物(Joelleetal2014)

苯丙烷,途徑,揮發(fā)性


圖 2 苯環(huán)型和苯丙烷化合物的合成途徑(Joelle et al 2014)Fig. 2 Schematic representation of the VOC phenylpropanoid/benzenoid biosyntheticpathway(Joelle et al 2014)5 植物 BAHD ;D(zhuǎn)移酶家族研究進展植物中需要經(jīng)過很多修飾過程,才能完成次生代謝活動(John et al 2006)基化反應對其具有重大意義。; CoA 和含硫、含氧、含氮的化合物在 BA作用下可形成許多物質(zhì),包括抵御病原微生物對植物造成傷害作用的物質(zhì)的花青素、揮發(fā)性脂類(John et al 2006)。BAHD 的名稱來源于該家族中有代表的酶。B 是指從仙女扇中克隆獲得的參與揮發(fā)性酯類化合物合成的O-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(BEAT);A 是指從三花龍膽中克隆獲得的參與花青素類基化的花青素羥化肉桂;D(zhuǎn)移酶(AHCT);H 是指從香石竹中克隆獲得

形態(tài)變化,花被片,盛花期,稱重


圖 3 H933 和 SW001 在開花過程中的形態(tài)變化1:H93 露瓣期 ;2:H93 盛開期 ;3:H93 末花期;4:SW001 露瓣期 ;5:SW001 盛開期 ;6:SW001末花期;Fig.3 Flower morphological of H93 & SW001of different flowering periods: petal baring period of H93; 2: profuse flowering period of H93; 3 :final flowering period of H93; 4: petalbaring period of SW001; 5: profuse flowering period of SW001; 6 :final flowering period of SW001在吳昌陸等方法(吳昌陸等 1995)基礎上,將蠟梅花分為露瓣期、盛花期、末三個時期,露瓣期, 花蕾顯著增大,黃色;盛花期,花被片張開,未散粉;末,花已散粉,花被片逐漸萎縮。采取 H93 株系三個時期鮮花于事先已稱重的l 樣品瓶,每個樣品為 3 朵,每個時期重復測定 3 個樣品。3 朵取完后立即用封密封,并用天平進行稱重。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]植物來源BAHD;D(zhuǎn)移酶家族研究進展[J]. 劉雨雨,莫婷,王曉暉,史社坡,劉曉,屠鵬飛.  中國中藥雜志. 2016(12)
[2]蠟梅異戊烯基焦磷酸異構酶基因CpIPI的克隆及表達分析[J]. 李瑞,張杰,馬婧,李名揚.  西南大學學報(自然科學版). 2016(03)
[3]玉簪屬植物花香研究[J]. 劉倩,孫國峰,張金政,李曉東.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2015(21)
[4]蠟梅SAMT基因在煙草中的遺傳轉(zhuǎn)化及其功能分析[J]. 龐宏東,向林,趙凱歌,李響,楊楠,陳龍清.  北京林業(yè)大學學報. 2014(05)
[5]蠟梅屬品種國際登錄工作緊鑼密鼓[J]. 陳龍清.  中國花卉園藝. 2014(09)
[6]蠟梅科植物研究進展[J]. 陳龍清.  中國園林. 2012(08)
[7]蠟梅花揮發(fā)油成分的GC-MS分析[J]. 熊敏,周明芹,向林,吳華,陳龍清.  華中農(nóng)業(yè)大學學報. 2012(02)
[8]花香代謝與調(diào)控研究進展[J]. 孔瀅,孫明,潘會堂,張啟翔.  北京林業(yè)大學學報. 2012(02)
[9]蠟梅花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析及次生代謝產(chǎn)物合成途徑研究[J]. 楊楠,趙凱歌,陳龍清.  北京林業(yè)大學學報. 2012(S1)
[10]文心蘭不同花期及花朵不同部位香氣成分的變化[J]. 張瑩,李辛雷,王雁,田敏,范妙華.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2011(01)

博士論文
[1]蠟梅花香相關基因的克隆與功能分析[D]. 向林.華中農(nóng)業(yè)大學 2009
[2]中國蘭花揮發(fā)及特征花香成分研究[D]. 彭紅明.中國林業(yè)科學研究院 2009

碩士論文
[1]蠟梅花揮發(fā)物組分測定及芳樟醇合成酶啟動子分析[D]. 李瑩瑩.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[2]蠟梅花揮發(fā)性組分與花色色素分析[D]. 余莉.華中農(nóng)業(yè)大學 2013



本文編號:3074647

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