彩葉芋（Caladium bicolor）為單子葉植物綱天南星科五彩芋屬的多年生草本植物,其葉片常嵌有彩色斑點(diǎn)或彩色葉脈,是重要的觀葉植物,適于溫室栽培觀賞,因此篩選培育彩葉芋新材料或新品種,是提高市場競爭力的有效途徑。由于花青素苷對彩葉植物葉色多彩的形成起主要作用,利用分子育種調(diào)控彩葉植物中花青素苷的合成,有望快速獲得新材料或新品種。有研究表明,在花青素苷合成途徑中,轉(zhuǎn)錄因子通過MYB-bHLH復(fù)合物或者M(jìn)YB-bHLH-WD40復(fù)合物（MBW復(fù)合物）直接調(diào)控結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá),從而影響花青素苷在植物中的分布和含量。本研究優(yōu)化了彩葉芋‘紅桃K’的遺傳轉(zhuǎn)化體系,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法,將植物表達(dá)載體pC1300-PAP1+Lc導(dǎo)入彩葉芋‘紅桃K’中,探究MYB型轉(zhuǎn)錄因子AtPAP1基因與bHLH型轉(zhuǎn)錄因子玉米Lc基因的異源表達(dá)對轉(zhuǎn)基因彩葉芋的表型變化,為進(jìn)一步的園林綠化育種提供技術(shù)支持與理論參考。主要研究結(jié)果如下:（1）優(yōu)化了‘紅桃K’的遺傳轉(zhuǎn)化體系。以彩葉芋‘紅桃K’為材料,探索了與遺傳轉(zhuǎn)化相關(guān)的參數(shù),篩選抗生素濃度、抑菌抗生素濃度、預(yù)培養(yǎng)時間、農(nóng)桿菌侵染時間、共培養(yǎng)時間、共培養(yǎng)基... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

花青素苷的生物合成途徑及關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)[18]

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系；利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法，將植物表達(dá)載體 pC1300-PAP1+Lc 導(dǎo)入彩葉芋‘紅桃 K’中，探究 MYB 型轉(zhuǎn)錄因子 AtPAP1 基因與 bHLH 型轉(zhuǎn)錄因子玉米 Lc 基因的異源表達(dá)對轉(zhuǎn)基因彩葉芋的表型變化與影響，為進(jìn)一步的彩葉植物育種提供技術(shù)支持與理論參考，為本實驗室今后利用基因工程技術(shù)改變彩葉芋葉色奠定基礎(chǔ)。2.2 研究技術(shù)路線

圖 3-1 不同濃度的潮霉素對彩葉芋‘紅桃 K’葉盤再生的影響Fig.3-1 Effectsof Hyg concentrations on leaf discs regeneration of Caladium bicolor ‘Hongtao K3.3.2 羧芐青霉素濃度的確定羧芐青霉素對農(nóng)桿菌有抑制作用，試驗將‘紅桃 K’葉盤置于附加不同濃度的羧芐青霉素愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，以不加羧芐青霉素的培養(yǎng)基做對照。經(jīng) 4 周觀察與統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)羧芐青霉素濃度在 300mg/L-700mg/L 之間時，對彩葉芋紅桃 K 外植體的影響以及愈傷形成不顯著，與對照比較無明顯差別（如表 3-3），表明羧芐青霉素在 300mg/L-700mg/L 之間對彩葉芋‘紅桃 K’形成愈傷沒有明顯影響。由圖 3-2 可以看出，隨著培養(yǎng)時間的增加，彩葉芋‘紅桃 K’葉盤成活數(shù)量呈現(xiàn)略微下降的趨勢，并且不是所有成活的葉盤都形成了愈傷組織，從試驗的觀察中發(fā)現(xiàn)沒有形成愈傷的葉盤切口處沒有出現(xiàn)膨大現(xiàn)象。試驗結(jié)果表明，羧芐青霉素在周內(nèi)對彩葉芋外植體沒有嚴(yán)重危害，但隨著外植體在羧芐青霉素中的時間增加，存在羧芐青霉素抑制彩葉芋外植體正常生長的可能。根據(jù)這一試驗判斷，可以在篩選中選用羧芐青霉素作為抑菌抗生素。為防止篩選培養(yǎng)時農(nóng)桿菌的過度生長，使用羧芐青霉素的濃度不能過低，綜合本試驗獲

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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