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LRRFIP1基因干擾對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞炎癥、氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-02-28 04:02
  目的探討富亮氨酸重復(fù)序列相互作用蛋白1(LRRFIP1)基因?qū)χ嗵牵↙PS)誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞炎癥、氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的影響及其作用機(jī)制。方法使用LPS處理人支氣管上皮細(xì)胞株16HBE,并利用Lipofectamine 2000試劑將siLRRFIP1轉(zhuǎn)染到16HBE細(xì)胞,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)LRRFIP1 mRNA表達(dá);免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)檢測(cè)LRRFIP1、細(xì)胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p65、磷酸化p65(p-p65)、IκBα和IκBα和磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表達(dá);噻唑藍(lán)(MTT)檢測(cè)細(xì)胞活力;試劑盒檢測(cè)細(xì)胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脫氫酶(LDH)水平和炎癥因子白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)分泌;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果LPS誘導(dǎo)的16HBE細(xì)胞中L... 

【文章來源】:免疫學(xué)雜志. 2020,36(10)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞和試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
    1.3 q RT-PCR檢測(cè)LRRFIP1 m RNA表達(dá)
    1.4 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染與處理
    1.5 Western blot檢測(cè)LRRFIP1、CyclinD1、Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p65、p-p65、IκBα和p-IκBα蛋白表達(dá)
    1.6 MTT檢測(cè)細(xì)胞活力
    1.7 試劑盒檢測(cè)細(xì)胞氧化應(yīng)激和炎癥因子分泌
    1.8流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 LRRFIP1在LPS誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞16HBE中的表達(dá)
    2.2 抑制LRRFIP1對(duì)LPS誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞16HBE細(xì)胞活力
    2.3 抑制LRRFIP1對(duì)LPS誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞16HBE細(xì)胞氧化應(yīng)激
    2.4 抑制LRRFIP1對(duì)LPS誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞16HBE中炎癥因子分泌的影響
    2.5 抑制LRRFIP1對(duì)LPS誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞16HBE凋亡的影響
    2.6 抑制LRRFIP1對(duì)LPS誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞16HBE中NF-κB信號(hào)通路的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]花青素通過Nrf-2/HO-1信號(hào)通路調(diào)控哮喘氣道炎癥[J]. 劉宇彤,車楠,李莉,李良昌,馬立光.  免疫學(xué)雜志. 2019(01)
[2]歐前胡素通過p38MAPK/NF-κB途徑改善哮喘小鼠氣道炎癥[J]. 趙雨喆,咸哲民,姜京植,王重陽,李俊峰,李良昌,李燕,樸紅梅,延光海.  免疫學(xué)雜志. 2018(09)
[3]蟲草素抑制脂多糖誘導(dǎo)的支氣管上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)[J]. 鄧霞,鄭丹丹,莊瓊馨,柳星星,錢粉紅.  江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(02)



本文編號(hào):3055287

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