Ti質(zhì)粒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因早粳稻核基因組外源基因完整性分析
發(fā)布時間:2021-02-15 21:22
水稻是重要的糧食作物,其重要作用更是無可替代;長期以來由于受蟲害、病害、低溫冷害等影響嚴(yán)重,造成糧食的大量減產(chǎn),傳統(tǒng)的解決辦法是使用化學(xué)農(nóng)藥,對環(huán)境威脅很大。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育具有相關(guān)優(yōu)良性狀的水稻新品種成為解決這個問題的關(guān)鍵途徑,近些年這項技術(shù)也正在慢慢地走向成熟,且在水稻育種方面很常用,利用此項技術(shù)已經(jīng)培育出了耐冷、抗病、抗蟲的水稻品系。本論文利用項目前期獲得的轉(zhuǎn)基因HD7(空育131(Bt/bar))、HD8(松粳9號((Bt/bar))品系水稻為實驗材料,這兩個品系是通過利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法將人工改造優(yōu)化后的pBar-cry1C*、pBar-cry2A*質(zhì)粒作為載體導(dǎo)入受體材料空育131和松粳9號得到的。通過多個世代的遺傳培育,對報告基因bar基因表達(dá)檢測、外源T-DNA的PCR檢測,篩選陽性轉(zhuǎn)基因植株過程中,發(fā)現(xiàn)部分材料表現(xiàn)出抗Basta但不抗蟲的現(xiàn)象。通過對已獲得的水稻材料進(jìn)行進(jìn)一步的Basta抗感性篩選、目的基因分子檢測,同時檢測并分析抗蟲Bt基因于轉(zhuǎn)基因水稻核基因組上的存在情況,通過鑒定外源目的基因的整合種類并檢測轉(zhuǎn)基因水稻中...
【文章來源】:黑龍江大學(xué)黑龍江省
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的分區(qū)Fig.1-1SubregiouofagrobacteriumTiplasmid
圖 1-2 農(nóng)桿菌與受體植物作用圖[31]Fig. 1-2 Overview of the Agrobacterium-plant interaction.受傷釋放信號 2. VirA/G 激活 3.農(nóng)桿菌 T-DNA 合成和 vir 基因表達(dá) 4. T-DNA 和 Vir 蛋白合體形式通過 T4SS 進(jìn)入植物細(xì)胞 5. T-DNA 復(fù)合體進(jìn)入植物細(xì)胞核 6 .T-DNA 通過重組整合進(jìn)植物基因組1. Plant signals induce 2. VirA/G activation and thereby 3. T-DNAsynthesis and vir geneessionin Agrobacterium. 4. Through a bacterial type IV secretion system (T4SS) T-DNAand Veins are transferred into the plant cell to assemble a T-DNA/Vir protein complex. 5. The T-DNAplex is imported into the host cell nucleus in which 6. the T-DNAbecomes integrated into thehost chromosomes by illegitimate recombination.系統(tǒng)對酚類物質(zhì)的反應(yīng)程度倍數(shù)增長。酚類可以用作誘導(dǎo)劑,比如 AS,研究在農(nóng)桿菌介導(dǎo)法中,AS 可以提高植物轉(zhuǎn)化效率。VirA,VirG 能夠特異識別酚糖類物質(zhì),因此農(nóng)桿菌的宿主相對較多。
第 1 章 引言胞核,還能夠與組蛋白結(jié)合,該功能也是 T-DNA 整合所必需的[52]。VIP2 蛋白對于轉(zhuǎn)基因的穩(wěn)定表達(dá)是必需的。(5)T-DNA 的整合T-DNA 到達(dá)宿主時,會通過自身與受體細(xì)胞中有關(guān)蛋白的互作進(jìn)入細(xì)胞核。例如某些細(xì)菌 Vir 蛋白、植物蛋白會參與 T-DNA 的整合,如圖 1-3。T-DNA 整合的農(nóng)桿菌 Vir 蛋白包含 VirD2,VirE3 等; 植物蛋白有 VIP1,VIP2,IMPa 等。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]抗除草劑轉(zhuǎn)基因水稻的研究進(jìn)展[J]. 溫莉嫻,周菲,鄒玉蘭. 植物保護(hù)學(xué)報. 2018(05)
[2]草菇電擊法遺傳轉(zhuǎn)化的研究[J]. 呂貝貝,于海龍,蔣瑋,吳瀟,武國干,趙妍,陳蕾,唐雪明. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2017(03)
[3]Western blot detection of PMI protein in transgenic rice[J]. RONG Rui-juan,WU Peng-cheng,LAN Jin-ping,WEI Han-fu,WEI Jian,CHEN Hao,SHI Jia-nan,HAO Yu-jie,LIU Li-juan,DOU Shi-juan,LI Li-yun,WU Lin,LIU Si-qi,YIN Chang-cheng,LIU Guo-zhen. Journal of Integrative Agriculture. 2016(04)
[4]淺談轉(zhuǎn)基因水稻發(fā)展中存在的問題及對策[J]. 張慧,況慧云,程大軍,謝煒. 農(nóng)業(yè)科技通訊. 2015(06)
[5]轉(zhuǎn)Bt基因水稻的食用安全性評價研究進(jìn)展[J]. 譚小燕,陳高峰,周曉冰,湯瑤,黃芝瑛,王雪. 食品科學(xué). 2015(21)
[6]基因槍法介導(dǎo)的轉(zhuǎn)KN2基因小麥的獲得及鑒定[J]. 周鵬,池青,呂金洋,劉香利,趙惠賢. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(01)
[7]丹東地區(qū)水稻生長的氣候條件分析[J]. 孫鶯歌. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2013(05)
[8]基因槍法獲得無選擇標(biāo)記的1Dx5基因表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小麥[J]. 王勇,覃建兵,范玲,祝長青. 植物研究. 2013(02)
[9]玉米、小麥、水稻原生質(zhì)體制備條件優(yōu)化[J]. 孫鶴,郎志宏,朱莉,黃大昉. 生物工程學(xué)報. 2013(02)
[10]低能離子束誘變機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 陳浩,解繼紅,于林清,鐔建國,賈蕓. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(04)
博士論文
[1]三種Bt基因(cry1Ac、cry2A~*和cry9C~*)抗蟲水稻的培育及評價[D]. 陳浩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]轉(zhuǎn)基因抗蟲早粳稻HD1和HD3品系性狀鑒定及土壤環(huán)境安全性評估[D]. 高祎.黑龍江大學(xué) 2017
[2]轉(zhuǎn)基因抗蟲早粳稻HD2和HD4品系性狀鑒定及土壤環(huán)境安全性評估[D]. 劉迎哲.黑龍江大學(xué) 2017
[3]小麥成熟胚再生體系的優(yōu)化和基因槍轉(zhuǎn)化影響因素的研究[D]. 張磊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[4]轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的安全性研究[D]. 紀(jì)逸媚.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[5]二價抗蟲基因cry1C*/cry2A*對寒區(qū)超級稻松粳9號的遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 崔瑩.黑龍江大學(xué) 2011
[6]河北省農(nóng)戶應(yīng)用轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉品種的現(xiàn)狀、效果及其影響因素研究[D]. 吳玉紅.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號:3035559
【文章來源】:黑龍江大學(xué)黑龍江省
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的分區(qū)Fig.1-1SubregiouofagrobacteriumTiplasmid
圖 1-2 農(nóng)桿菌與受體植物作用圖[31]Fig. 1-2 Overview of the Agrobacterium-plant interaction.受傷釋放信號 2. VirA/G 激活 3.農(nóng)桿菌 T-DNA 合成和 vir 基因表達(dá) 4. T-DNA 和 Vir 蛋白合體形式通過 T4SS 進(jìn)入植物細(xì)胞 5. T-DNA 復(fù)合體進(jìn)入植物細(xì)胞核 6 .T-DNA 通過重組整合進(jìn)植物基因組1. Plant signals induce 2. VirA/G activation and thereby 3. T-DNAsynthesis and vir geneessionin Agrobacterium. 4. Through a bacterial type IV secretion system (T4SS) T-DNAand Veins are transferred into the plant cell to assemble a T-DNA/Vir protein complex. 5. The T-DNAplex is imported into the host cell nucleus in which 6. the T-DNAbecomes integrated into thehost chromosomes by illegitimate recombination.系統(tǒng)對酚類物質(zhì)的反應(yīng)程度倍數(shù)增長。酚類可以用作誘導(dǎo)劑,比如 AS,研究在農(nóng)桿菌介導(dǎo)法中,AS 可以提高植物轉(zhuǎn)化效率。VirA,VirG 能夠特異識別酚糖類物質(zhì),因此農(nóng)桿菌的宿主相對較多。
第 1 章 引言胞核,還能夠與組蛋白結(jié)合,該功能也是 T-DNA 整合所必需的[52]。VIP2 蛋白對于轉(zhuǎn)基因的穩(wěn)定表達(dá)是必需的。(5)T-DNA 的整合T-DNA 到達(dá)宿主時,會通過自身與受體細(xì)胞中有關(guān)蛋白的互作進(jìn)入細(xì)胞核。例如某些細(xì)菌 Vir 蛋白、植物蛋白會參與 T-DNA 的整合,如圖 1-3。T-DNA 整合的農(nóng)桿菌 Vir 蛋白包含 VirD2,VirE3 等; 植物蛋白有 VIP1,VIP2,IMPa 等。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]抗除草劑轉(zhuǎn)基因水稻的研究進(jìn)展[J]. 溫莉嫻,周菲,鄒玉蘭. 植物保護(hù)學(xué)報. 2018(05)
[2]草菇電擊法遺傳轉(zhuǎn)化的研究[J]. 呂貝貝,于海龍,蔣瑋,吳瀟,武國干,趙妍,陳蕾,唐雪明. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2017(03)
[3]Western blot detection of PMI protein in transgenic rice[J]. RONG Rui-juan,WU Peng-cheng,LAN Jin-ping,WEI Han-fu,WEI Jian,CHEN Hao,SHI Jia-nan,HAO Yu-jie,LIU Li-juan,DOU Shi-juan,LI Li-yun,WU Lin,LIU Si-qi,YIN Chang-cheng,LIU Guo-zhen. Journal of Integrative Agriculture. 2016(04)
[4]淺談轉(zhuǎn)基因水稻發(fā)展中存在的問題及對策[J]. 張慧,況慧云,程大軍,謝煒. 農(nóng)業(yè)科技通訊. 2015(06)
[5]轉(zhuǎn)Bt基因水稻的食用安全性評價研究進(jìn)展[J]. 譚小燕,陳高峰,周曉冰,湯瑤,黃芝瑛,王雪. 食品科學(xué). 2015(21)
[6]基因槍法介導(dǎo)的轉(zhuǎn)KN2基因小麥的獲得及鑒定[J]. 周鵬,池青,呂金洋,劉香利,趙惠賢. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(01)
[7]丹東地區(qū)水稻生長的氣候條件分析[J]. 孫鶯歌. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2013(05)
[8]基因槍法獲得無選擇標(biāo)記的1Dx5基因表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小麥[J]. 王勇,覃建兵,范玲,祝長青. 植物研究. 2013(02)
[9]玉米、小麥、水稻原生質(zhì)體制備條件優(yōu)化[J]. 孫鶴,郎志宏,朱莉,黃大昉. 生物工程學(xué)報. 2013(02)
[10]低能離子束誘變機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 陳浩,解繼紅,于林清,鐔建國,賈蕓. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(04)
博士論文
[1]三種Bt基因(cry1Ac、cry2A~*和cry9C~*)抗蟲水稻的培育及評價[D]. 陳浩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]轉(zhuǎn)基因抗蟲早粳稻HD1和HD3品系性狀鑒定及土壤環(huán)境安全性評估[D]. 高祎.黑龍江大學(xué) 2017
[2]轉(zhuǎn)基因抗蟲早粳稻HD2和HD4品系性狀鑒定及土壤環(huán)境安全性評估[D]. 劉迎哲.黑龍江大學(xué) 2017
[3]小麥成熟胚再生體系的優(yōu)化和基因槍轉(zhuǎn)化影響因素的研究[D]. 張磊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[4]轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的安全性研究[D]. 紀(jì)逸媚.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[5]二價抗蟲基因cry1C*/cry2A*對寒區(qū)超級稻松粳9號的遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 崔瑩.黑龍江大學(xué) 2011
[6]河北省農(nóng)戶應(yīng)用轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉品種的現(xiàn)狀、效果及其影響因素研究[D]. 吳玉紅.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號:3035559
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